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1959 年，Worthington 提供了个商业上可用的胶原酶。当时其提供了一种粗酶，并只测试了胶原酶的活性。最终，在研究界许多人的合作下，确定了四个基本概况： Worthington胶原酶解离酶背景： 细菌胶原酶是含有胶原酶的粗复合物，更准确地称为梭菌肽酶 A，它是一种蛋白酶，对序列 Pro-X-Gly-Pro 中的 X-Gly 键具有特异性，其中 X 最常见的是中性氨基酸。这种序列经常在胶原蛋白中发现，但在其他蛋白质中很少见。虽然许多蛋白酶可以水解单链、变性的胶原蛋白多肽，但梭菌肽酶 A 在蛋白酶中是独一无二的，因为它能够攻击和降解结缔组织中常见的三螺旋天然胶原原纤维。 真正的胶原酶可以同时切割所有三个链或攻击单链。哺乳动物胶原酶在特定位点以天然三螺旋构象分裂胶原蛋白，产生片段 TC A 和 TC B，代表原胶原分子的 3/4 和 1/4 长度。碎片化后，这些片段倾向于展开成随机多肽，并且更容易受到其他蛋白酶的攻击。 细菌胶原酶通常从宿主侵入菌株中提取。这些酶与哺乳动物胶原酶的不同之处在于它们攻击螺旋上的许多位点。Mandl 等人首先制备的来自溶组织梭菌的胶原酶已经得到了最彻底的研究。市售胶原酶主要限于来自Cl 的胶原酶。尽管最近有其他来源可用。梭菌胶原酶还优先降解天然胶原蛋白中的螺旋区域，优先在 Pro-X-Gly-Pro 序列中的 X-Gly 键处，其中 X 最常见的是中性氨基酸。合成肽底物中的这种键也可能被分裂。 由于所有胶原多肽的不完全水解及其对细胞外基质中发现的高浓度非胶原蛋白和其他大分子的有限活性，单独纯化的梭菌肽酶 A 通常在解离组织方面效率低下。最常用于组织解离的胶原酶是含有梭菌肽酶 A 以及许多其他蛋白酶、多糖酶和脂肪酶的粗制品。粗胶原酶非常适合组织解离，因为除了水解结缔组织和上皮组织的细胞外基质中的其他蛋白质、多糖和脂质的酶之外，它还含有攻击天然胶原蛋白和网状纤维所需的酶。
1、类型 1包含平均数量的测定活性（胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性）。一般推荐用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备。 2、2 型含有更大的梭菌蛋白酶活性。它通常用于心脏、骨骼、肌肉、甲状腺和软骨。 3、选择3 型是因为蛋白水解活性低。它通常用于乳腺细胞。 4、选择4 型是因为胰蛋白酶活性低。它通常用于胰岛和其他受体完整性至关重要的应用。 2007 年推出的无动物源胶原酶（代码 CLSAFA）源自在完全不含动物成分的培养基中生长的培养物，专为必须防止引入潜在动物源性病原体的生物加工应用而设计。二级蛋白酶的水平与 1 型和 2 型相似。 不同组织的类型和有效性之间的相关性很好，但并不完美，部分原因是使用参数可变。然而，大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。Worthington 胶原酶检测的详细描述以及梭菌肽酶 A 检测程序可在Worthington 酶手册中找到。 写在最后：如果你找到适合你的细胞分离程序的胶原酶类型之一，你可能想尝试 Worthington 的胶原酶采样程序。这个免费的程序让研究人员可以对不同批次的胶原酶进行预采样，并在其特定应用中对其进行评估，以实现细胞产量和活力的最佳组合。 Worthington核心酶：包括：胶原蛋白酶，脱氧核糖核酸酶I，弹性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。 |
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