重要的两步:种细胞,种多少细胞;检测,在什么时间检测 检测的时间点(checekpoint),检测的时间需要看文献,文献中选用的细胞系培育的时间,从开始0,1,2,3天或者 0,12,24,36小时,不同的细胞,增殖时间和增殖能力不一样; 前列腺癌株增殖的比较慢,检测周期为7天,假如,种细胞后,第二天算第一天,后续为1,3,5,7; 如果,细胞生长快,检测时间点要最少超过3个,少于3个就形成不了曲线 种的细胞的个数,96孔板,种1万个的细胞浓度就算比较大的,注意避免细胞接触抑制,控制种植细胞数量; 预实验,先种植1千个细胞,记录一个梯度,细胞增长的梯度,增长的速度梯度; 确定种植细胞个数,和观察时间,再去设计分组和记录时间点, 接下来进行正式实验 ,比如 种2000细胞,0,1,2,3,4天五个节点去进行检测。 |
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