【原】防污染--PCR实验室管理核心

从事分子诊断的小伙伴们看过来，这里是老法师经历的PCR实验室的血与泪、爱与恨。老法师希望大家规范实验，勤于管理，重在预防，减少和避免污染。

.........................(◕ᴗ◕✿)........................

污染，是PCR实验室出现实验假阳性、结果不可信、研发不可靠的重要推手，PCR实验室应当将防污染作为日常管理、实验安排、清洁消毒、实验习惯的核心。

什么是PCR污染？

在聚合酶链式反应的一系列实验操作中产生的，对PCR实验室内的人员、试剂、环境和实验结果产生不利影响的某种物质或思想。

PCR污染的原因有哪些？

1、标本间交叉污染，不规范的标本操作极易形成气溶胶，导致污染。

2、PCR试剂的污染，不规范的试剂操作或者试剂的储存环境和条件会造成试剂的污染。

3、PCR扩增产物污染，最为常见也最不易处理。

如何处理PCR污染？

PCR实验室污染一旦爆发、后果非常严重。受影响实验室包括上下楼层间甚至是紧邻楼层间的研发PCR实验室、QC检验PCR实验室，不仅影响实验、还会对耗材等产生不可预估的影响。小到实验不准确，大到影响整个公司的经营活动。只有通过管理流程和机制的完善，才能最终有效的解决问题并且能够有效预防和控制污染。以下一家公司污染后的措施和反思建议，供每个人去思考并且能够帮助管理。

1、应当善于发现污染

QC检验早一天、早一步发现，越早报告、越早采取措施，对后续影响就越小。

一旦发现阴性参考品出现阳性结果，随即展开实验室OOS调查，必须从人机料法环各方面进行调查。依次排除人员、仪器、操作、参考品等因素，通过更换试剂盒和耗材批号，进一步排除试剂和耗材，于是只剩下环境待进一步的调查。

环境调查主要分2步走。

一步：使用测试来确认是否存在实验室污染以及污染的区域范围；

二步：通过管理来进一步证实实验室污染并且找到根本的原因。比如，我们发现实验室内仪器布局不合理，发现实验操作人员的某些习惯性小动作存在风险，发现实验后的日常清理不够到位，等等。

2、必须全面应急措施

立即停止所有PCR实验，防止进一步扩大和加深污染，并且减少不必要的浪费。

立即报告污染情况，协调相关人员及经验丰富的人员讨论确定处理措施。

动员全体实验人员进行全面的实验室清洁。

实行对污染的监控，及时发现各种异常情况。

3、处理污染需及时并有效

使用次氯酸钠和酒精清洁实验室并进行通风处理，经过一个多月，经检测仍然有阳性出现；而后处理措施进一步加强力度，将仪器及设备搬至厂区空地上，实验室所有门窗打开进行通风，1~2个月后再进行检测，确认无阳性后才陆续开展PCR实验。

处理污染的过程中同时存在多个注意点需要加强控制：①注意保护隔离生产区，特别是有洁净度级别的生产区；②注意保护隔离仓库，防止仓库内储存的试剂耗材受到污染；③一味的清洁和通风可能无法快速的达到效果，联合质量管理的手段能快速有效的找到源头，解决问题。

执行非常非常重要，管理上不能想当然说了他会做，不能想着这样应该没问题。这种侥幸心理非常害人。事后的总结分析，总是出现在哪个犄角旮旯没注意到、酒精应该再多一点、灭菌时间再长一点、通风还需要久一些…

4、严抓预防措施、教训必须深入人心

PCR实验室的预防污染非常重要，因为一旦发生将可能造成不可估计的影响。

1、  制定卫生清洁制度

1. 清场，关注垃圾的处理情况

2. 实验室仪器设备、桌面、墙面、地面等清洁卫生，开窗通风，紫外灯照射。

3. 关注清洁卫生的操作是否到位，关键部位重点清洁

4. 关注清洁卫生的频率

2、  制定实验室管理制度，有效预防污染的发生

1. 关注实验室设计，实验室内仪器设备的布局

2. 关注PCR实验流程的设计

3. 实验室严格分区使用，仪器设备、移液器等定位使用，所有耗材专区专用。

4. 合理制定实验计划，减少PCR实验的次数。

5. 关注人员的实验操作，严格按照PCR实验sop进行操作。

总结感慨

PCR污染的范围很广，不同楼层也会产生影响，甚至会影响相邻建筑；PCR污染的时间很长，几个月甚至半年；PCR污染的影响很深，影响我们的生产计划，阻碍我们的研发进度，直接造成公司人力、财力的损失。