盘点4种小动物临床常用的粪检技术：直接涂片、染色涂片、粪便漂浮、贝尔曼法

宠医客-助力小动物医生终身成长

Michael R. Lappin, DVM, PhD, Dipl.ACVIM (Internal Medicine)

宠医客编译，如需转载请与宠医客联系

粪检可以用来帮助诊断胃肠道疾病和呼吸道疾病的寄生虫病因，最常用的技术包括直接涂片和生理盐水涂片、染色涂片、粪便浮选和贝尔曼技术；每种方法都可以在小动物临床中操作。

直

接

涂

片

新鲜的液体粪便或含有大量粘液的粪便应立即用显微镜检查原生动物滋养体，包括贾第虫属的滋养体，在小肠腹泻和大肠腹泻下的胎儿三毛滴虫，可以直接盐水涂片，以加强对这些可移动微生物的观察。

将2mm×2mm×2mm的新鲜粪便与1滴0.9%NaCl或水充分混合。应取用粪便表面或粘液包裹的粪便，因为滋养体在这些部分最常见。盖上盖玻片后，在100倍率下(即在大多数显微镜用10倍物镜)检查涂片来评估是否有活动微生物。

染

色

涂

片

所有腹泻的犬猫粪便都可以制成薄薄的粪便涂片。如果可能，应该用直肠拭子收集样本，以增加发现白细胞和一些微生物，如荚膜组织胞浆菌的机会。

用棉签轻轻地经肛门进入直肠末端3到4厘米，指向直肠壁，然后轻轻旋转几次。在棉签上滴一滴0.9%NaCl更容易进入肛门，也不会影响观察细胞形态。棉签在载玻片上轻轻滚动多次，形成不同涂抹厚度的区域(图91.1)。风干后，对载玻片染色。

经Diff-Quik或瑞氏或吉姆萨染色后，可观察到白细胞和弯曲杆菌(螺旋菌)或产气荚膜梭菌(芽孢杆菌；图91.2)。然而，这些发现并不能确诊，因为粪便中有许多螺旋体，细胞学检测到可疑的产气荚膜梭菌孢子也并不总是与肠毒素有关。

在单核细胞的细胞质中可观察到组织胞浆菌或原壁菌。醋酸缓冲液(pH 3.6)的亚甲基蓝可染色肠道原虫的滋养体。碘和乙酸甲基绿染色也可用于原生动物的染色。

患有腹泻的犬猫可采用改良的粪便涂片抗酸染色，以帮助诊断隐孢子虫病。隐孢子虫，是唯一一种直径约4-6 µm的肠道微生物，可被抗酸染色染成粉色至红色(图91.3)。

图91.1 适当涂片厚度的Diff-Quik染色的粪便涂片 

图91.2瑞氏染色稀薄的粪便涂片。

中性粒细胞和芽胞杆菌出现在视野的中央。

图91.3 改良抗酸染色的微小隐孢子虫卵囊。

卵囊大小约为4×6µm。

粪

便

浮

选

可以浓缩粪便中的包囊、卵囊和虫卵，以提高检测的灵敏度。有多种技术可用于兽医临床。离心法比被动浮选法更敏感。大多数虫卵、卵囊和包囊在硫酸锌溶液(表91.1)或乳胶糖溶液中离心后很容易被识别出来。

在显示原生动物包囊方面，这些方法优于被动浮选技术(尤其是贾第鞭毛虫；图91.4)。许多临床医生现在利用大型商业实验室来提供这项服务。粪便沉淀法可回收大多数包囊和虫卵，但也含有杂质。

图91.4 硫酸锌浮选后的贾第鞭毛虫包囊。

囊泡大小约为10×8 µm。

贝

尔

曼

技

术

这种技术被用来从粪便中回收活动的幼虫。粪便在水中稀释，放在下方收紧的漏斗中，幼虫通过重力集中。

一些呼吸道寄生虫通过幼虫卵传播，但在通过粪便后会短暂地排放幼虫。呼吸道寄生虫的卵或幼虫也可以通过呼吸道冲洗液的细胞学评估来检测(图91.5)。

图91.5 经支气管肺泡灌洗收集的呼吸道冲洗液中的猫肺线虫幼虫。

粪

便

的

保

存

直到化验前，粪便应该冷藏，而不是冷冻。如冷冻的弓形虫卵囊不太可能产生孢子并变得具有传染性。此外，冷藏粪便中酵母菌的过度生长较少，假阳性结果较少。

如果粪便样本需要送往外部实验室进行进一步分析，并且在48小时内不做评估，则应保存该样本。可以使用聚乙烯醇、硫柳汞碘福尔马林和10%福尔马林保存。

通常使用10%的福尔马林，因为容易获得；临床医生将1份粪便加到9份福尔马林中，并混合均匀。

更多干货文章/直播/视频学习请进入宠医客APP⇩