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T7 RNA聚合酶化学性质： T7 RNA 聚合酶是一种依赖 DNA 的 RNA 聚合酶，其对噬菌体 T7 启动子序列有高特异性。该酶从 T7 启动子插入到转录载体下游的 DNA 上合成大量 RNA。 应用：标记和未标记的 RNA 转录本的合成。 来源：从在质粒上表达 T7 RNA 聚合酶基因的大肠杆菌纯化获得。 性能和质量检验：3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口检测； 转录反应中的性能。 单位定义：一个单位是指在1 hr 内、37°C 下，以 T7 转录载体作为模板，将 1 nmoL 核糖核苷酸水解为酸性可沉淀物质所需要的酶量。 单位反应条件：40 mM Tris-HCl (pH 8.0)、25 mM NaCl、8 mM MgCl2、2 mM 亚精胺-(HCl)3、5 mM DTT、0.4 mM ATP、0.4 mM CTP、0.4 mM GTP、0.4 mM UTP、1µCi [3H]GTP、1 µg SphI-cut pT7L13 和酶（50 µL、10 min.、37°C 下）。
T7 RNA 聚合酶配有一瓶 5X 反应缓冲液 [200 mM Tris-HCl（pH 值 8.0）、40 mM MgCl2、10 mM 亚精胺-(HCl)3、125 mM NaCl] 和一瓶 100 mM DTT。保存于 -20°C。 T7 RNA聚合酶文献参考： 1、Novel binding of HuR and poly(C)-binding protein to a conserved UC-rich motif within the 3'-untranslated region of the androgen receptor messenger RNA. Yeap Bu B; Voon Dominic C; Vivian Julian P; McCulloch Ross K; Thomson Andrew M; Giles Keith M; Czyzyk-Krzeska Maria F; Furneaux Henry; Wilce Matthew C J; Wilce Jackie A; Leedman Peter J; J Biol Chem (2002) 277:27183-27275 2、Principles of 3' splice site selection and alternative splicing for an unusual group II intron from Bacillus anthracis. Robart AR, Montgomery NK, Smith KL, Zimmerly S, RNA (2004) 10:854-862 |
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