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CpG-A DNA,人/小鼠的功能和应用

 艾美捷科技 2022-11-22 发布于湖北

ODN 2216是一类CpG-a寡脱氧核苷酸(ODN)的原型,也称为“D”型ODN,包含一个磷酸二酯(PO)骨架。它对激活NK细胞和诱导浆细胞样树突状细胞(PDC)前体中IFN-α的产生特别有效。

脊椎动物的免疫系统已经进化出先天免疫防御模式识别受体(PRRs),它检测细菌DNA中的非甲基化胞嘧啶磷酸鸟嘌呤(CpG)基序。CpG基序的细胞激活通过Toll信号通路发生。Toll样受体-9(TLR9,CD289)似乎是CpG DNA受体的主要成分,通过与CpG DNA直接结合而起作用,这触发细胞信号通路的诱导,包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和NFκB,从而刺激免疫系统的各种细胞。人TLR9在B细胞和PDC中表达。小鼠也在髓系隔室中表达TLR9。激活TLR9的最佳序列因物种而异。合成ODN含有模仿细菌DNA免疫刺激作用的CpG DNA基序,因此可以用作免疫保护剂、疫苗佐剂和抗过敏剂。CpG ODN还影响免疫耐受和自身免疫。不同类型的CpG ODN的特征在于,每种都对免疫反应有不同的影响:CpG-A(“D”型)、CpG-B(“K”型)和CpG-C。

CpG-A ODN的特征在于在5'和3'端具有磷酸(PS)键的多-G基序(促进细胞摄取)和ODN中心含有PO回文CpG的序列。CpG-A ODN在PDC中诱导大量IFN-α(与CpG-B不同),导致NK细胞和γ-δT细胞中的强激活和IFN-γ产生,但不能激活B细胞。暴露于CpG-A引发的细胞因子环境的人单核细胞可以分化为树突状细胞。

CpG-a的原型序列是20-mer ODN 2216,其模拟PDC的病毒感染,并能够调节人和小鼠的免疫应答。其序列如下:5'-gggGGGACGATCGTCgggggG-3'。小写字母表示PS连接,大写字母表示碱基的PO连接3',粗体字母表示CpG二核苷酸。

CpG-A DNA,人/小鼠可用于体外生物测定以激活细胞。此外,CpG-A DNA可以用作免疫调节剂。

CpG-A DNA,人/小鼠化学性质:

类型:LPS和配体

规格:200 nmol

制剂约200 nmol冻干、纯化的20-mer CpG ODN。确切数量在标签上标明。内毒素水平无法检测。通过吸取蒸馏水或去离子水(体积取决于使用的浓度)重新配制小瓶。

使用对于体外刺激,可使用0.05至3μM。建议用户测试试剂并确定自己的最佳浓度。

储存和稳定性:冻干产品应在4°C下储存。将储备溶液储存在-20°C的等分试样中。反复的冷冻和解冻循环将导致活性丧失。在推荐的储存条件下,产品可稳定一年。

用途:对于体外刺激,可使用0.05至3μM。建议用户测试试剂并确定自己的最佳浓度。

CpG-A DNA,人/小鼠相关文献:

1. Krieg, A; CpG motifs in bacterial DNA and their immune effects. Annu Rev Immunol 2002, 20: 709

2. Krug, A et al; CpG-A oligonucleotides induce a monocyte-derived dendritic cell-like phenotype that preferentially activates CD8 T cells. J Immunol 2003, 170: 3468

3. Huijbregts, R et al; Hormonal Contraception and HIV-1 Infection: Medroxyprogesterone Acetate Suppresses Innate and Adaptive Immune Mechanisms. Endocrinology 2012, 154:1282

4. Chen, J et al; CpG oligodeoxynucleotide induces bone marrow precursor cells into myeloid-derived suppressor cells. Mol Med Rep 2013, 8:1149

5. Li, H et al; Interferon-induced mechanosensing defects impede apoptotic cell clearance in lupus. J Clin Inv 2015, 125:2877

6. Michel, K et al; Effect of hormonal contraception on the function of plasmacytoid dendritic cells and distribution of immune cell populations in the female reproductive tract. J Acquir Immune Defic Syndr 2015, 68:511

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