FLIVO探针：用于细胞活体凋亡检测，助力科研！

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡，乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此，有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。

FLIVO®(荧光活体)是一种强大的无创检测体内半胱天冬酶活性的方法。NIR-FLIVO 690示踪剂是caspases的非细胞毒性、细胞透过荧光抑制剂，优化用于整个活体动物。ICT的NIR-FLIVO 690示踪探针包含大多数caspases (Val-Ala-Asp或VAD)的首选结合序列。

接下来咱就聊一聊 ImmunoChemistry（ICT）FLIVO探针——用于细胞凋亡活体检测，助力大家高精度检测。

一、FLIVO探针活体凋亡检测之FAM-FLIVO®体内Poly Caspase检测试剂盒：

FLIVO®试剂盒提供了一种简单、准确的方法来检测体内caspase活性。类似于我们的FLICA®探针，但优化了整个活动物标记。为标记含有活性caspases的细胞，静脉注射FLIVO并让其循环约60分钟。由于试剂是细胞本身的，当它在体内循环时，它很容易在遇到的所有细胞内扩散或扩散。如果细胞内存在活跃的caspase酶，FLIVO会与caspase活性位点形成不可逆共价键。如果细胞膜完好，结合的FLIVO探针将留在细胞内。任何未绑定的FLIVO将在大约一个小时内从动物的循环中移除。组织中剩余的绿色荧光信号是注射试剂时发生的半胱天冬酶活性的直接测量。一旦多余的FLIVO从动物体内清除，组织就可以进行分析了。无需进一步染色。组织可以通过窗腔系统或其他可接近的腔直接观察。或者，目标组织可以被移除并进行分析。FLIVO非常敏感，会检测到自然发生的背景细胞凋亡。凋亡细胞的caspase活性高于对照细胞，因此它们在FLIVO作用下荧光更亮。

二、FLIVO探针活体凋亡检测之FLIVO示踪剂：

准备样品和对照品。

用45 mL diH20按1:10稀释10X注射缓冲液。

用50μL DMSO重组NIR-FLIVO 690示踪剂。

用450μL 1X注射缓冲液稀释NIR-FLIVO 1:10。

静脉注射50μL。

让NIR-FLIVO循环4小时。

想象动物。NIR-FLIVO690示踪剂在690nm激发，在709nm发射。

如果不直接查看，则切除组织并处理样本以进行进一步分析。

可选：用其他染色剂（如Hoechst 33342或抗体）标记切除的样品。

如果需要，修复切除的样本。

用荧光显微镜或流式细胞仪分析切除的样品。

以上，是有关于FLIVO探针活体凋亡检测的相关研究方案。