  细胞化学染色：是细胞学与化学相结合而形成的一门科学，是以细胞形态学为形态学为基础，结合运用化学反应的原理，对血细胞内的各种化学成分（如酶类、酯类、铁、蛋白质、核酸等）进行定性、定位，半定量分析的方法。 不同细胞化学染色步骤不同，但基本步骤为固定、显示及复染。 常用的细胞化学染色  细胞化学染色种类很多，下面让我们来了解一下细胞室常用的几种染色方法。有瑞氏染色、铁染色、中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）、髓过氧化物酶染色（MPO）和糖原染色（PAS）。    01 瑞氏染色 AUTUMN   1、染色步骤： 瑞士染液10滴（1min）→磷酸缓冲液以2-3倍混匀（骨髓片25min,血片15min）→冲洗晾干（血片用小水冲）。    经瑞士染色后的细胞： 02 铁染色 1、染色步骤： 酸化亚铁氰化钾溶液（用前配置）（30min）→水洗后片上加满水膜→沙黄6滴混匀（15min）→冲洗晾干。 2、临床意义： 铁染色主要用于缺铁性贫血和环形铁粒幼红细胞增多性贫血的诊断和鉴别诊断。 ①缺铁性贫血：细胞外铁明显减少甚至阴性，细胞内铁阳性率降低或为零，经铁剂治疗有效后，其他细胞内铁和外铁增多。 ②铁粒幼细胞贫血:铁粒幼红细胞增多，其中环铁粒幼红细胞增多，有时可见到铁粒红细胞，细胞外铁也明显增多。 3、结果判断： ①细胞内铁：一般指分布在中、晚幼红细胞的铁，其胞质内出现蓝色铁颗粒为阳性，称为铁粒幼（红）细胞。 ②环形铁粒幼细胞：铁颗粒绕核排列，2008年造血与淋巴组织肿瘤WHO分类指出，Rs的标准为：铁颗粒≥5颗且绕核≥1/3。 ③细胞外铁： 通过观察骨髓小粒的巨噬细胞胞质内有无蓝色沉淀来判断。 细胞外铁分级：A、B骨髓外铁（++）。C、D骨髓外铁（+++）。E、F骨髓外铁（+++++）。 ④正常参考区间 细胞外铁：（+）~（++） 细胞内铁：25%~90%，为Ⅰ型、Ⅱ型。 03 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 1、染色步骤： 无水乙醇固定（15min）→基质液（水浴5h，用前需配置）→硝酸钴（15min）→水洗后硫化铵（15min）→伊红（5-8min）（整个过程不可干，不可冲洗，应在蛊内晃洗干净）。 全程不可干 2、临床意义： 临床上NAP染色应用较广泛，但由于观察者记分标准有所不同，易受主观因素影响，参考区间较大。只有NAP积分明显增高或明显降低时，才有较大的临床意义。 （1）病理变化： ①NAP积分增高，见于细菌性感染、类白血病反应、再生障碍性贫血、某些骨髓增殖性疾病、慢性粒细胞白血病加速期或疾病、急性淋巴细胞白血病及慢性淋巴细胞白血病。 ②NAP积分下降，见于慢性粒细胞白血病慢性期，阵发性睡眠性血红蛋白尿症，骨髓增生异常综合症、恶性组织细胞病等。 3、结果判断： 胞质出现紫黑色或棕红色，颗粒为阳性。 （1）分级标准： 根据细胞内有无阳性颗粒、多少，分为（-）~（++++），积分分别为0分、1分、2分、3分、4分。 （-）无阳性颗粒。 （+）有少数阳性颗粒，约占胞质面积1/4。 （++）有中等数量阳性颗粒，约占胞质面积1/2。 （+++）有大量阳性颗粒，充满胞质但有少量空隙，约占胞质面积3/4。 （++++）充满阳性颗粒，没有空隙。 正常参考区间：阳性率30%~70%阳性积分35~100分。 04 糖原染色 1、染色步骤： 甲醇固定（10min）→吹干后过碘酸（水浴10min）→冲洗吹干后加雪夫试剂（水浴30min）→冲以后加入苏木素（15min）。 滑动查看更多 2、临床意义： 3、结果判断： （1）阳性结果：胞质内出现红色即为阳性，苏木素复染后胞核为蓝色。 （2）分级标准： ①粒、单系细胞的分级标准：主要根据细质内红色分级。 ②有核红细胞的分级标准：根据细胞质内红色深浅分级。 ③淋系细胞的分级标准：主要根据细胞质内阳性的多少及性状分级。 05 髓过氧化物酶染色 1、染色步骤： poxⅠ液（1min）→poxⅡ液（3min）（1:1混合）（Ⅱ液用前配制25ml蒸馏水，8滴双氧水）→95%酒精脱色（约2分钟，脱到无色为止）→吹干后瑞士染色（25min） * 2、临床意义： MPO染色是临床上辅助诊断急性白血病细胞类型，首选、最重要的细胞化学染色。 ①正常细胞的反应，原始粒细胞呈阴性或阳性，阳性反应为粗颗粒聚集状；早幼粒细胞、各阶段中性粒细胞均为阳性，并随其成熟程度其阳性逐渐增加，但衰老的细胞因髓随过氧化物酶活性降低而反应减弱；嗜酸性粒细胞呈强阳性，嗜碱性粒细胞、单核细胞呈阴性或弱阳；有核红细胞、淋巴细胞、浆细胞、巨核细胞、血小板均呈阴性。 ②急性白血病细胞反应，根据各系细胞阳性结果及特点辅助判断急性白血病细胞系列，如：原始细胞的MPO呈阳性（指阳性率>3%）证明存在髓系细胞。 3、结果判断： （1）正常细胞髓过氧化物酶结果。 作者｜苏天全、梁增敏 审核｜黄一芳 — END — |
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