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食品微生物检测  沙门氏菌病的病原体，属肠杆菌科，革兰氏阴性肠道杆菌。已发现的近一千种（或菌株）。菌体大小（0.6～0.9)×（1～3)微米无芽胞，一般无荚膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外，大多有周身鞭毛。  缓冲蛋白胨水Buffered Peptone Water 用途：用于沙门氏菌、阪崎杆菌前增菌培养。 配方：（g/L）  反应原理： 蛋白胨：提供菌体生长所需的碳源、氮源等营养元素； 氯化钠：维持体系渗透压平衡； 磷酸盐：作为缓冲剂。 目的：食品加工中采用的各种工艺（冷冻、加 热、干燥、高盐）使得细胞不同程度的受损BPW 作为非选择型的增菌培养基，其较高的pH的缓冲体系有利于受损细胞的恢复到稳定的生理状态。 四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB) Tetrathionate Broth Base 用途：用于沙门氏菌选择性增菌培养，需加入煌绿和碘液。 配方：（g/L） 基础液：
 反应原理：蛋白胨、牛肉膏：氮源、碳源及其他营养元素； 氯化钠：维持培养基体系渗透压； CaCO3：中和吸收有毒性的代谢物质（主要是培养 基酸碱度的变化对菌生长的影响）； 牛胆盐：抑制革兰氏阳性菌的生长； 硫代硫酸钠经碘氧化生成四硫磺酸钠对大肠菌群有抑制作用；沙门氏菌可产四硫磺酸酶分解四硫磺酸，因而能在此培养基中生长繁殖。 亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）Selenite Cystine Broth 用途：用于沙门氏菌选择性增菌培养。 配方：（g/L）  反应原理：蛋白胨：碳源、氮源，维生素及矿物质元素； 乳糖：作为碳水化合物，通过代谢提供能量； 亚硒酸盐：抑制革兰氏阳性菌及除沙门氏菌以 外的大多数革兰氏阴性肠道菌； L-半胱氨酸：培养基中作为还原剂。 用法：除亚硒酸氢钠和L胱氨酸外,将各成分加入蒸馏水中,煮沸溶解,冷至55℃以下,以无菌操作加入亚硒酸氢钠和1g/L L-胱氨酸溶液10mL(称取0.1 gL-胱氨酸,加1mol/L氢氧化钠溶液15mL,使溶解,再加无菌蒸馏水至100 mL即成，如为DL-胱氨酸,用量应加倍)。摇匀,调节pH至7.0士0.2。 亚硫酸铋琼脂（BS）（GB4789） 配方：（g/L）  反应原理：蛋白胨、牛肉粉：氮源、碳源、维生素及矿物质等营养元素；葡萄糖：作为碳水化合物提供细菌代谢所需的能量； 磷酸盐：缓冲培养环境pH值； 亚硫酸钠和柠檬酸铋铵反应生成亚硫酸铋， 煌绿和亚硫 酸铋能抑制大肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生长， 但是对伤寒、副伤寒等沙门氏菌的生长没有影响； 伤寒沙门氏菌及其他沙门氏菌能够利用葡萄糖，将亚硫酸盐还原成硫化物并与硫酸盐铁反应使菌落呈黑色；此外还可以将铋离子还原成金属铋，使菌落呈现金属光泽，从而使沙门氏菌得到分离。 使用注意事项：不可过度加热；使用前一天配 制，且在48h内使用； 倾注平板前需摇匀；不能反复溶解；平板需避光保存于室温环境。 XLD培养基XyloseLysineDeso 用途：选择性培养基，主要用于分离志贺氏菌属，亦可用于分离沙门氏菌。 配方：（g/L）  反应原理：酵母膏：为细菌生长提供维生素和辅助因子； 木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵的碳源；除志贺氏菌外，其 他大多数肠杆菌均能发酵木糖； 赖氨酸：可鉴别沙门氏菌；沙门氏菌发酵木糖产酸，形成 酸性环境有利于产生脱羧酶，沙门氏菌使赖氨酸脱羧，从而使培养基的pH值升高向碱性转变，但这种转变可因其 他菌发酵乳糖和蔗糖产生大量的酸而被阻止； 在碱性条件下，硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与沙门氏菌产生 的硫化氢反应使菌落的颜色呈黑色；但是酸性条件下这种 反应被抑制； 酚红：作为酸碱指示剂； 氯化钠：维持培养基的渗透压； 去氧胆酸盐：抑制革兰氏阳性菌的生长。 使用注意事项： 使用前一天配制，避免过度加热！室温避光储存。 HE琼脂 用途：用于沙门氏菌的选择性分离培养（GB标准）。 配方：（g/L） 反应原理：蛋白胨、牛肉粉:提供菌体细胞生长所需的氮源、碳源等； 氯化钠:维持体系渗透压平衡； 胆盐、去氧胆酸钠:主要抑制革兰氏阳性菌的生长； 蔗糖、水杨素、乳糖:作为鉴别系统； 溴麝香草酚蓝和酸性复红:作为酸碱指示剂，能把发酵糖和 不发酵糖类的细菌区分开，前者为橘黄色菌落，后者为无色； 柠檬酸铁铵及硫代硫酸钠分别作为产硫化氢的指示剂和底物，能产生硫化氢但不发酵糖类的沙门氏菌为无色半透明菌落，中心为黑色。 使用注意事项：本培养基不需要高压灭菌,在制备过程中不宜过分加热,避免降低其选择性。 三糖铁（TSI）琼脂Triple Sugar Iron Agar 用途：生化培养基，用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选 配方：（g/L） 原理：该培养基含有三种可发酵的碳源，即葡萄糖 （1g/L）、蔗糖（10g/L）和乳糖（10g/L），这些碳 源被菌体利用产酸，可使酚红指示剂变色。另外某些 菌能还原Na2S2O3产生H2S，与硫酸亚铁铵反应生成黑 色的FeS，而使培养基变黑。 尿素琼脂（pH 7.2） 用途：生化培养基，用于细菌脲酶检测 配方：（g/L）
原理：某些细菌在酸性厌氧环境，且有赖氨酸底物存在的情况下能诱导产生 赖氨酸脱羧酶，使赖氨酸脱羧产生尸胺，导致培养基变紫，而不产生赖氨酸 脱羧酶的细菌只能代谢葡萄糖产酸，使培养基变黄。 糖发酵管 配方：（g/L） 制法：①葡萄糖发酵管按上述成分配好后，调节pH。按0.5％加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min 。 ②其他各种糖发酵管可按上述成分配好后, 分装每瓶100mL，121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好10％溶液，同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100mL培养基内，以无菌操作分装小试管。 注：蔗糖不纯, 加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。 试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养, 一般2d～3d。 |
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