大口黑鲈(Micropterus salmoides)俗称加州鲈，为鲈形目(Perciformes)，棘臀鱼科(Centrarchidae)，黑鲈属(Micropterus)鱼类，是一种适应性强，生长迅速，易于捕捞，饲养周期短，且肉质鲜嫩，不含肌间刺，外形美观的优良淡水鱼，深受养殖者和消费者喜爱。近年来，我国大口黑鲈的养殖技术日趋成熟，养殖规模逐步扩大。2021年，大口黑鲈的总养殖量达到70.2093万吨，较2020年的61.9519万吨提高了8.2574万吨，增幅达到13.33%，是国内增长速度最快的淡水养殖鱼类。但近几年，部分大口黑鲈养殖业者却屡受病害困扰。目前已报道对大口黑鲈产生危害的细菌包括气单胞菌、诺卡氏菌、柱状黄杆菌、爱德华氏菌等，其中气单胞菌是主要的致病菌，严重制约了其健康养殖的发展。2023年5月，四川省某养殖户养殖的大口黑鲈发病并大量死亡，给养殖户带来了巨大的经济损失。通过对死亡鱼体剖检观察和病原菌的分离和鉴定，最终证实该病原为维氏气单胞菌。现就其诊断和治疗方法作一简要介绍。 01 症状及主要病理变化 2023年5月19日，四川某养殖场的大口黑鲈出现了大规模发病，给养殖场带来了严重的损失。为了深入了解该疾病的特征和病因，采集了来自发病池塘的6条发病鱼样本，并进行了详细的观察和分析。经调查，发病早期无明显体表症状，以食性减退为主，随病程进展，食量逐渐降低。症状严重时，病鱼的眼睛泛白，略微向外凸出，体表的粘液增多，体表多处如背部肌肉、尾鳍、眼睛等出现不同程度溃疡灶。部分病鱼还可见深度溃疡，皮肤肌肉严重溃烂，有的可见尾柄骨骼暴露。解剖后发现肝脏肿大发黄、质地较脆。其余脏器无明显变化。 02 诊断 将送检鱼鳃丝剪下置于预先滴有生理盐水的玻片上，制作组织压片，光学显微镜下低倍观察鳃丝组织，未见寄生虫寄生。从不同的患病大口黑鲈的肝、脾、肾、溃疡灶边缘接种细菌于BHI培养基，28℃培养24小时。结果发现，在脾脏和溃疡边缘接种的BHI培养基上，生长出了大量的细菌菌落，其特征表现为不透明、表面光滑、略凸、直径2-3mm、边缘不整齐的乳白色菌落。经革兰氏染色发现，细菌多单个或两个排列，呈两端钝圆的革兰氏阴性杆菌。挑选单个菌落进行进一步的平板划线，28℃恒温培养24h，将分离得到的优势细菌扩大培养后提取细菌基因组DNA，利用16S rRNA通用引物进行PCR扩增。结果显示，分离得到的细菌均扩增出了与预期结果1500 bp相近的目的片段。经BLAST比对后发现，从大口黑鲈溃疡灶中分离获得的菌株16S rRNA序列与维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)同源性最高，达到了98.62%。根据流行情况和实验室检查的结果，初步认为本病是由维氏气单胞菌感染引起的疾病。 03 防治 利用药敏纸片法测定该菌对不同药物的敏感性，结果表明从大口黑鲈溃疡灶中分离的菌株对庆大霉素、恩诺沙星、复方新诺明、环丙沙星敏感；对四环素、链霉素中度敏感；对氨苄西林耐受。根据药物敏感性试验结果，可以有针对性地采用内服敏感抗生素，同时外用消毒药物相结合的方法进行治疗。所以采用恩诺 沙星拌料投喂，每天3次，连用5-7天。鉴于病鱼有明显的体表溃疡，为了降低刺激，建议选用刺激性更小的聚维酮碘溶液开展水体及鱼体外用消毒，每天1次，连续使用2天；养殖场、养殖用具等建议使用低本高效的消毒剂溴氯海因消毒，每天1次，连续使用直至痊愈。 04 小结 大口黑鲈作为一种重要的经济品种，具有很好的养殖前景。近年来，随着大口黑鲈养殖规模的不断扩大和密度的提高，在其生长过程中发生的疾病情况也越来越严重，造成了巨大的经济损失。维氏气单胞菌隶属弧菌科、气单胞菌属，属于革兰氏阴性菌。维氏气单胞菌广泛存在于自然界中，且有着较强的适应性，也是引起淡水鱼败血症和溃疡综合征的重要病原菌。因此，当类似维氏气单胞菌病的症状出现时，养殖户往往未经实验验证，就开始用药，可能出现用药错误，造成了不必要的经济损失。因此在养殖过程中，如果发现不能现场诊断的疾病，应该第一时间留存送样检测，然后根据检测结果进行对症下药。除此以外，对疾病的处理，应该以“预防为主，治疗为辅”的方针，将大口黑鲈的饲养密度控制在一个合理的范围内，做好“体质、水质、底质”的管理。平时要多注意肝脏、肠等部位的养护，可以在饲料中添加维生素、益生菌、中草药和酶等物质，以增强鱼类的免疫功能；此外，要保证水的质量，特别要关注水的溶氧、pH、氨氮、亚硝酸盐、有害藻等相关数据的变化；改善底质，在进行养殖之前，应该对池塘底部进行清洗和消毒，并且在养殖的过程中，要定期对池塘进行监控和维护，要及时解决出现的问题，要采用科学的养殖方法来创造一个好的水体环境。 本研究由四川省科技计划项目(No.2022NZZJ0014)、成都市科技项目(No.2022-YF09-00040-SN)和成都市科技项目(No.2022-YF05-00636-SN)资助。 本文为“水产前沿”独家稿件，版权合作，敬请联系wx@fishfirst.cn。 |
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