腺相关病毒载体应用 病毒载体可分为整合型与非整合型,慢病毒(整合型)与腺相关病毒(非整合型)成为应用主流。我们以2020年英国ATMP(前沿治疗药物)临床试验中的基因递送载体为例,腺相关病毒占比达39%(非整合型病毒),慢病毒占比为37%(整合型病毒),是最主流的病毒载体。主要原因为: 1)慢病毒(以HIV-1病毒为基础,也是逆转录病毒的一种)相对逆转录病毒(一般指γ-逆转录病毒)有更强的嗜性,能够感染非分裂细胞,同时在安全性上较逆转录病毒有所进步; 2)腺相关病毒(AAV)的宿主范围极为广泛,可长时间稳定地表达目的基因,同时其免疫原性较低,因而在非整合型病毒中应用较多。 腺相关病毒载体的细胞培养体系 HEK293细胞/三质粒系统是AAV生产的主流系统:AAV生产系统包括HEK293细胞/三质粒系统和依赖于昆虫杆状病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒或痘病毒的包装系统。以HEK293细胞/三质粒系统和昆虫杆状病毒系统最为常见,但由于昆虫杆状病毒系统的单个细胞生产效率低、病毒活性低等特点,目前业内最主流的还是采用HEK293细胞/三质粒生产系统。 vectorbuilder |
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