事实上,许多所谓的“安全”凝胶染料含有众所周知的染料,可以结合活细胞中的 DNA,具有细胞毒性作用。GelRed 和 GelGreen 是高度敏感的凝胶染色剂,由于不透细胞膜,因此设计为无毒和无致突变性,因此它们不能进入活细胞。 为了使 GelRed 和 GelGreen 安全,Biotium 的科学家使用了一个新颖但非常简单的概念:通过防止染料进入活细胞来降低基因毒性。我们相信,通过拒绝其与活细胞中的基因组 DNA 接触的机会,可以使 DNA 结合染料不致突变或基本上不致突变。因此,我们设计了 GelRed 和 GelGreen 的化学结构,使染料无法穿过细胞膜。Ames 测试证实 GelRed 和 GelGreen 在远高于其用于凝胶染色的工作浓度的浓度下是非诱变性的。此外,环境安全测试表明,GelRed 和 GelGreen 对水生生物无害且无毒。因此,GelRed 和 GelGreen 可以丢弃到下水道或扔进普通垃圾桶。 GelGreen、GelRed、SYBR Green I 和 EtBr 在 +1 移码沙门氏菌指示菌株 TA98 中的致突变性比较,其中存在 S9 组分。* 表示 EB 未在此浓度下进行测试。# 表示 SYBR Green I 在此浓度下有毒。 GelRed 和 GelGreen 作为预制凝胶染色剂或凝胶后染色剂都非常敏感。GelRed 比 EtBr 敏感得多,并且与 SYBR Gold 不同,GelRed 还可以用作高度敏感的预制凝胶染料。GelRed 也可用作方便的预染上样缓冲液。GelGreen 的光谱与 SYBR Safe 相似,但灵敏度更高,可与 DarkReader 等蓝光凝胶成像系统一起使用。PAGE GelRed 专为丙烯酰胺凝胶中的 DNA 染色而设计。GelRed 和 GelGreen DNA 染料的另一个主要优势是它们卓越的稳定性。您可以像处理 EtBr 一样存储和处理这两种核酸染色染料。为方便起见,GelRed 和 GelGreen 也提供预包被的琼脂糖形式。 比 EtBr、SYBR Safe 和其他产品更灵敏 用于预制或后染色 兼容下游克隆和测序 GelRed 提供 6X 上样缓冲液形式 用于丙烯酰胺凝胶的 PAGE GelRed GelRed:使用紫外透照仪和 EtBr 过滤器 GelGreen:使用 UV 或蓝色 LED 和 SYBR 过滤器,或我们的新型 Gel-Bright™ LED 照明器 为您的应用选择合适的染色剂: 产品/方法 程序 好处 缺点 推荐给 使用GelRed Prestain Plus 6X DNA Loading Dye进行 DNA 预染色 GelRed 加载缓冲液在加载前直接添加到 DNA 样本中 · 快速简单:一步上样和 DNA 染色 · 染料浓度较低,操作更安全 · 可以重新运行凝胶以使用空泳道 · 不推荐用于 PAGE、DGGE、EMSA 或 PFGE 凝胶 · 上样大量 DNA(超过 ~100 ng/条带)或某些限制性消化时,染料可能会导致条带迁移问题 · 常规琼脂糖凝胶 · 建议加载 50-200 ng ladder 或 2-5 uL PCR 产物(~100 ng/条带或更少) 使用GelRed 10,000X 水溶液或GelGreen 10,000X 水溶液进行预制染色 GelRed 或 GelGreen 在凝胶浇铸前与熔化的琼脂糖混合 熟悉的协议,快速的结果 使用GelRed Agarose LE或GelGreen Agarose LE进行预制染色 提供的琼脂糖预涂有 GelRed 或 GelGreen,只需溶解、加热和倾倒 更安全更方便,无需处理浓缩染料 使用GelRed 10,000X 水溶液或GelGreen 10,000X 水溶液 或 – GelRed 3X 水溶液进行电泳后染色 凝胶中不添加荧光染料,电泳后在 3X GelRed 或 3X GelGreen 溶液中染色 · 最准确的大小/最清晰的条带 · 染色溶液可重复使用 · 通过添加 NaCl 提高灵敏度 电泳后额外的染色步骤(最多 30 分钟)(一些客户报告说如果染料不重复使用,仅 5 分钟后结果良好) · 高度准确的条带大小 · 凝胶中每条带含有超过 ~100 ng DNA · 分析限制性酶切 使用PAGE GelRed 10,000X 或 1X 水溶液对 PAGE 凝胶进行电泳后染色 凝胶中不添加荧光染料,电泳后在1X PAGE GelRed溶液中染色 · 专为聚丙烯酰胺凝胶的高效渗透和染色而设计 · 与经典的 GelRed 一样,安全且环保 大约额外的染色步骤。电泳后30分钟 PAGE 凝胶中的核酸染色 |
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