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图解WB | 第1期. Western blot我们看什么?

 新用户4064dVjo 2023-07-24 发布于北京

Western blot作为我们最为常用且最为成熟的实验技术,是我们每一个科研工作者必须掌握的实验技术,那我们应该怎么看文献中的Wb图呢?

动物组织的Western blot

由于动物组织的个体异质性较大,通常展示动物组织的Western blot数据时采用con组(n≥3,con1 con2 con3 con4)+实验组(n≥3,Treat1 Treat2 Treat3 Treat4)的展示,同时要注明目的蛋白与内参蛋白及其蛋白大小,内参蛋白在绝大多数的展示中是整齐且含量差异不大,绝大多数会同时统计其相对蛋白水平(与内参蛋白比较),至于统计图的展示方式为柱状图还是仅展示例数以及配色则可根据个人审美实现个性化定制。

细胞水平的Western blot

细胞层面我们通常采用的是相同来源的细胞系或原代细胞,再进行传代操作后细胞原本组间差异不大,所以通常展示形式为con组、实验组(如下图所示)。如果展示重复组,则con1-实验组1、 con2-实验组2 、con3-实验组3的展示方式。同时也要注明目的蛋白与内参蛋白及其蛋白大小,绝大多数会同时统计其相对蛋白水平(与内参蛋白比较)。

其实看了很多文献中的Wb展示图以后,会发现展示方式各有不同,但是逃不开1)蛋白来源:组织/细胞;2)分组及处理条件;3)可靠的数据:目的蛋白与内参蛋白名称及大小;4)必要的Wb统计图(统计展示方式在能说明实验现象的前提下,可根据个人审美个性化定制),更大的难点还在于前期的实验处理及数据整理等方面,将在接下来的几期中逐步讲解~

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