自噬？
铁死亡？
自噬依赖性的铁死亡...？
莫急莫急，各位看官，今天小编就带大家来深入学习一篇文章，讲的就是：
自！噬！依！赖！性！铁！死！亡！
文章的Title是：
《自噬依赖型铁死亡通过释放和摄取致癌的KRAS蛋白来驱动肿瘤相关的巨噬细胞极化》
收录杂志《Autophagy》，IF：11 中科院1区
背景介绍
· KRAS是人类癌症中最常见的突变致癌基因之一。尽管投入了大量资金来了解KRAS突变在癌细胞中的作用，但致癌性KRAS活化对免疫细胞的直接作用仍然难以捉摸。
· 胰腺导管腺癌(PDAC)是少数KARS驱动的癌症之一。在PDAC中，G12D是KRAS中最常见的突变(简称KRASG12D)，与肿瘤微环境（TME）的显著特征相关。
· 静息巨噬细胞受到的环境压力可分化为两种主要亚型：抗肿瘤M1和前致癌性M2。
下面我们来捋一捋文章的结果
Fig 1
KRASG12D在自噬依赖性铁死亡过程中释放到胞外
PDAC的启动和发展与氧化应激、自由基和抗氧化剂的不平衡有关。
· 用H2O2处理后3种PDAC细胞上清液中KRASG12D的含量，随处理时间增加而增加（图1A）。
· 随后，加入多种细胞死亡方式的抑制剂处理细胞来探讨其死亡方式，发现自噬抑制剂和铁死亡抑制剂能抑制H2O2诱导的细胞死亡（图1B）及KRASG12D的释放（图1C），这就说明细胞死亡能诱导KRASG12D释放，且KRASG12D的释放与自噬和铁死亡有关。
· 随后诱导铁死亡且抑制自噬后，发现其KRASG12含量明显降低（图1K），说明自噬依赖性的铁死亡诱导KRASG12D的释放。
Fig 2
巨噬细胞外来摄取KRASG12D需要AGER（外泌体抑制剂）
外泌体在氧化应激和细胞死亡过程中介导细胞间通讯。
· 抑制自噬（图2D、2E）、铁死亡（图2D）及外泌体发生（图2F、2G）后，从细胞中分离出的外泌体中KRASG12D量降低，初步说明KRASG12D是以外泌体形式运输。
· 取100K转速离心下的外泌体，用Proteinase K、Triton X-100处理后，只有在Proteinase K处理下能检测到KRASG12D（图2I），进一步说明KRASG12D是以外泌体形式运输。
· 在PBMC中加入外泌体抑制AGER后，WB分析检测不到KRASG12D蛋白，表明KRASG12D的摄取需要AGER。
Fig 3
KRASG12D通过STA3依赖性脂肪酸氧化促进巨噬细胞M2极化
KRASG12D突变能导致巨噬细胞M2极化，但是其机制并不清楚。
· 加入Etomoxir（脂肪酸氧化抑制剂）（图3A）和分别抑制脂肪酸氧化过程中表达高的CPT1A和ACADM（图3D）后能显著抑制KRASG12D介导的M2极化和脂质氧化水平（图3B）。
· 加入外泌体及过表达KRASG12D后p-STAT3（STAT3是一种主要的转录因子，在KRASG12D的下游起作用以驱动胰腺肿瘤发生）表达上升，而敲低AGER后p-STAT3则几乎无表达，说明STAT3参与AGER调控KRASG12D的通路。
随后，作者又在裸鼠体内做了验证，发现阻断KRASG12D可抑制巨噬细胞介导的胰腺肿瘤在体内的生长。
最后，在Fig5 中作者对59位PDAC患者进行生存分析，发现巨噬细胞中KRASG12D高表达的患者存活期低于低表达的患者（图5B），这些发现表明巨噬细胞对KRASG12D摄取的增加可能有助于人类PDAC的进展。
图5
文章到此就结束了
下面来总结下本文的科学发现：
氧化应激能诱导自噬依赖性KRASG12D蛋白从PDAC细胞以外泌体形式释放。释放的KRASG12D蛋白通过AGER / RAGE（是一种细胞表面受体，可促进炎症和肿瘤生长）进一步被巨噬细胞吸收。然后KRASG12D蛋白通过诱导脂肪酸氧化，将巨噬细胞驱动到类似于M2的促肿瘤TAM中，从而加速PDAC的进程。
本文研究十分精彩，值得对铁死亡感兴趣的研究者们仔细研读，学习借鉴！
