|
 细胞划痕实验 （ Wound-Healing Assay ） 细胞划痕实验（又称伤口愈合实验，Wound-Healing Assay）是检测细胞迁移、肿瘤侵袭的常规实验。通常在体外培养的单层贴壁细胞上，人为得在细胞生长的中间区域划线，每隔一定时间进行拍照记录，获得多个时间点的图片序列，通过统计划痕面积或宽度随着时间的变化、以及伤口愈合百分比，来反映细胞的侵袭性。 理想状态下的划痕实验，细胞分布均匀，划痕清晰可辨。然而在现实实验中，我们常常遇到以下的划痕图像和不准确的分析结果：     图1、划痕实验原始图片（左侧）及分析结果（右侧），黄色为识别显示的轮廓。图片来源网络。 因为，传统的细胞划痕实验分析是通过采集不同时间点的细胞图像，再运用第三方软件来对拍摄的细胞图像进行分析的，整个过程相对繁琐且复杂，结果也可能不够准确。 相对于传统的实验方法，我们的Cellaview赛乐微MN-100能够实时展示细胞划痕愈合情况，无需再将不同时间点的拍摄图像导入ImagePro Plus或ImageJ 等软件进行图片转换、边界识别、面积计算等操作，可以直接将实验结果展示出来，使划痕实验变得轻松简单。
图2、Cellaview赛乐微MN-100细胞智能监控助手 是的，您没看错！细胞划痕实验就能如此简单！接下来，我们手把手教您，如何用Cellaview赛乐微MN-100做细胞划痕实验。  一、细胞划痕实验常用材料 6孔板、marker笔、直尺、胰酶、枪头、PBS、胰酶、基础培养基等。 二、细胞划痕实验步骤 Step 1 板底画线 用marker笔在6孔板背后，用直尺比着均匀画线，每隔0.5cm左右画一条线，横穿过整排孔。每孔可以画3-4条线。
图3、板底画线 Step 2 细胞铺板 在6孔板孔中加入约5×105个细胞（每种细胞有所差异，根据实验前摸索的细胞浓度进行铺板）。 Step 3 划痕 第二天，细胞长满到约90%后，用10uL白枪头垂直背后的横线在孔板中进行划痕。尽量保证划线笔直，每条划痕宽度相近，保证实验数据的可比性。
图4、细胞划痕 Step 4 清洗 用PBS清洗细胞2~3次，洗掉划下的细胞，加入无血清的基础培养基进行培养。 Step 5 拍照 Cellaview赛乐微MN-100表面用75%酒精擦拭后，放入细胞培养箱中，将划痕过的六孔板放在Cellaview赛乐微MN-100平台上。通过数据线将Cellaview赛乐微 MN-100与计算机进行连接，随后在计算机上打开miniEYES软件，根据实验需要设置拍摄参数进行拍摄。拍照时“划痕”的方向最好在软件视野内为水平的或者垂直的。
图5、划痕拍摄 Step6 分析 Cellaview赛乐微MN-100可以边拍摄不同时间点的细胞图像边进行数据分析，实时呈现细胞迁移情况（如图6、7所示）。
图6、不同时间点细胞划痕图像展示
图7、细胞划痕区域面积变化  Cellaview赛乐微MN-100通过实时观察细胞划痕愈合情况，同步分析实验数据，通过细胞汇合度的变化反映细胞迁移情况。因此，划痕实验结果清晰明了，无需再使用其他软件进行分析，整个实验轻松便捷。此外，在整个培养过程中，培养皿一直位于培养箱内，细胞能够一直处于较为稳定的培养环境，不会因频繁拿取切换环境而影响细胞生长，也不会因此导致细胞污染，实验结果更加准确。 看到这里，您是不是已经get到了？只要有Cellaview赛乐微MN-100，根本无需繁琐的数据处理，它可以代劳一切，给出又好又漂亮的结果。从此细胞实验大概可以边做边快乐地飞起来了吧。那么，赶紧把握时机，动动小手参与以下活动，赢取试用机会吧！ ▼ |
|
|
