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第十一单元 生物技术与工程 第54讲 微生物的培养技术及应用 1. (2022·无锡期末)下列关于“酵母菌的纯培养”实验的叙述，错误的是( ) A．马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分 B．接种环灭菌时，顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧 C．平板划线时，接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线 D．完成平板划线后，应将平板立刻倒置培养以免污染培养基 2．(2022·如皋中学)平板划线法和稀释涂布平板法是分离并纯化微生物的常用方法。相关叙述正确的是( ) A．平板划线法分离微生物前一般需要将菌液进行梯度等比稀释 B．细菌的纯化培养通常比霉菌需要更高的温度和更少的培养时间 C．使用稀释涂布平板法统计的微生物数量是活菌和死菌的总和 D．接种后的平板放置在摇床上倒置培养，防止杂菌的污染 3．(2022·苏锡常镇一模)微生物的计数方法有多种，下列有关叙述错误的是( ) A．用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌的数目时，需利用鉴别培养基培养后计数 B．用平板划线法和稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际少 C．用血细胞计数板进行微生物显微计数时，高倍镜下观察不到完整的计数室 D．用已知密度的红细胞悬液对待测菌液以比例计数法计数时，两种液体需混合均匀 4．(2022·苏州期初)细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法见下图。将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在已接种被检菌的固体培养基表面，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈，结果如下图所示。下列相关叙述错误的是( )
A．抗生素Ⅲ的效果大于抗生素Ⅰ B．为了获得上述结果，应使用稀释涂布平板法 C．抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素Ⅳ的抗性越强 D．抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株 5．(2022·扬州三模)为探究菌株ZI对病原菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ生长的抑制效果，取病原菌的菌丝块放置在平板中央，在距离中央3 cm处用接种环分别在4个位点接种菌株ZI,28 ℃培养3～5 d，观察抑菌圈大小，实验结果见下图。下列分析错误的是( )
A．病原菌Ⅰ在培养基上生长的速度最快 B．菌株 ZI 对三种病原菌的抑制作用不同 C．菌株 ZI 通过释放分泌物抑制病原菌生长 D．两类微生物的接种分别使用了平板划线法和稀释涂布平板法 6．(2022·盐城二模)为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，图1为部分实验器材。将含有相同浓度的抗生素Ⅰ～Ⅳ四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如图2所示。下列相关叙述正确的是( )
A．为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中器材①② B．图2中Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感 C．图2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下产生了突变株 D．不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果 7．(2022·南通海安质检)牙刷在使用后残留大量的细菌，科研人员比较了2.5%的碳酸氢钠和沸水消毒牙刷的效果，实验结果如下图所示。相关叙述正确的是( )
A．培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B．涂布用的菌浓度应控制在30～300个·mL－1 C．将接种后的培养基倒置于25 ℃恒温培养箱中培养24 h D．建议定期使用2.5%碳酸氢钠溶液对牙刷进行消毒 8．(多选)(2022·扬州高邮期初)已知固体培养基会因碳酸钙的存在而呈乳白色，且乳酸能分解培养基中碳酸钙。某同学用新鲜的泡菜滤液为材料进行分离纯化乳酸菌的实验，下列叙述正确的是( ) A．分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是鉴别乳酸菌 B．分离纯化所用的培养基加入锥形瓶后一般还要进行灭菌处理 C．分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释 D．分离纯化乳酸菌时，应挑选出不具有透明圈的菌落作为候选菌 9．(多选)(2022·南通一模)下图是筛选果胶酶产生菌实验中获得的变色圈，相关叙述正确的是( )
A．培养基应以果胶为唯一营养物质，并加入琼脂 B．配制好的培养基需高压蒸汽灭菌后倒平板 C．平板冷却凝固后应采用平板划线法接种样品液 D．根据变色圈与菌落直径比可初步筛选果胶酶产生菌 10．(多选)(2022·苏州高新区一中)下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素的细菌的过程示意图，有关叙述错误的是( )
A．在配制步骤②③的培养基时，都应添加琼脂作凝固剂 B．步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落 C．步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素 D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，可通过溶液pH的变化大小来比较细菌分解尿素的能力 11．(多选)(2022·如皋一调)一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选高效降解一次性口罩的细菌。下列操作正确的是( ) A．培养基中应以PP作为唯一碳源 B．挖取的土壤和装土壤的纸袋无需灭菌 C．只能使用平板划线法进行接种 D．培养时恒温箱的温度控制在30～37 ℃ 12．(2018·江苏卷)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染，又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图为操作流程，请回答下列问题：
(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的________，及时对培养基进行分装，并进行____________灭菌。 (2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约________(选填“25 ℃”“50 ℃”或“80 ℃”)的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。 (3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有________。 a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌 b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落 c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量 d．逐步提高培养基中甲醇的浓度，可获得甲醇高耐受株 (4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上______色细胞的个数应不少于________，才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。 13．(2022·扬州中学)民间传统酒曲中含有大量的微生物，现进行下述实验分离酒曲中的主要微生物。 (1)实验一：将酒曲用________制成悬液后，分别取不同稀释度的酒曲悬液用____________接种法接种到培养基上，经培养后根据____________________ ____________________________________________________________(写出三种)等菌落特征以及统计不同微生物的菌落数，发现酒曲中主要有两类微生物，即酵母菌和霉菌。研究者发现在液体中酵母菌比霉菌生长快，而酸性培养基中酵母菌比细菌生长更适宜。据此设计实验二将酵母菌从酒曲中进行分离。 (2)实验二：用小刀切开曲块，挖取米粒大小一块投入酸性蔗糖豆芽汁培养液中，然后置于25 ℃培养箱中培养两天。上述实验操作中，需要灭菌的物品或材料有__________________。 培养两天后，可见培养液变浑浊，这是因为____________________________________________。 (3)实验三：取浑浊的培养液1 mL转接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培养液中并培养，如此重复多次。多次转接后，取稀释液用下图所示方法接种在蔗糖豆芽汁平板上。
①如图所示接种方法为________________，使用该接种方法的目的是__________________。 ②与酸性蔗糖豆芽汁培养液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培养基成分中少了乳酸，请简要解释不再需要添加乳酸的原因：_________________________ _____________________________；同时培养基中添加了琼脂，这种成分改变的原因是________________________________________________________。 第十一单元 生物技术与工程 第54讲 微生物的培养技术及应用 1．D 2．B 3．B 4．C 5．D 6．D 7．D 8．ABC 9．BD 10．AC 11．AD 12．(1)pH 高压蒸汽(或湿热) (2)50 ℃ (3)abd (4)O2 无 30 13．(1)无菌水 稀释涂布平板 菌落的形状、大小、隆起程度和颜色 (2)小刀、培养液 微生物进行繁殖，数量增加 (3)①平板划线法 分离出单个菌落 ②通过多次转接，已筛选出酵母菌，因此不必再用酸性培养液 通过划线分离酵母菌，此操作需要在固体培养基上进行 学习高中生物 关注高中生物学习帮手 |
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