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配方一（需要50℃水浴，适用于NC和PVDF膜）： β-mercaptoethanol 342 μl 20% SDS 5 ml 1M Tris-Cl pH 6.7 3.125 ml 加ddH2O至50 ml 使用方法：将用过的膜浸入stripping buffer中，置50℃水浴箱中30min，间歇性震荡。然后用TBS洗5min/次，直到没有beta-mercaptoethanol的味道就行。然后就可以重新孵一抗了。 配方二（常温，适用于PVDF膜）： 50mM Glycine-NaOH(pH10.8) 7M Guanidine hydrochloride 100mM KCl 0.2mM EDTA 22.5uL beta-mercaptoethanol 总体积为10mL 使用方法：将用过的膜先用TBST或PBST洗10min。加入stripping buffer常温洗10min。用TBST或PBST洗3次，每次10min。重新封闭后孵一抗。 配方三（常温，温和型，适用于NC和PVDF膜）： 15g glycine 1g SDS 10mL Tween20 调节pH至 2.2 加ddH2O定容至1L 使用方法：加入stripping buffer常温洗10min。弃去加入stripping buffer，加入新的stripping buffer常温洗10min。PBS洗2次，每次10min。再用TBST或PBST洗2次，每次10min。重新封闭后孵一抗。 配方四（常温，适用于NC和PVDF膜）： 100 mM glycine 200 mM NaCl 0.1% Tween 20 0.1% β-mercaptoethanol 调节pH至 2.5 使用方法：加入stripping buffer常温洗45min。PBS洗2次，每次10min。再用TBST或PBST洗2次，每次10min。重新封闭后孵一抗。 小编推荐使用配方三，优点是可以常温使用，并且适用于NC和PVDF膜。根据小编经验，配方三比较温和，亲测一张膜可以反复剥离和敷抗体三次没问题。剥离效果非常干净，实际上配方三的这个stripping buffer可以重复使用3次以上都没问题。 需要注意的是，配方三需要调pH至2.2，需要加入大量的HCL。HCL属于危化品，要严格按照危化品的规范使用，并且注意在通风厨中使用，戴手套、穿白大褂和戴护目镜，注意防护自身安全。 如果你觉得有用的话，就帮忙点个「赞」和「再看」吧。 |
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