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最新专家共识丨关于淋巴细胞亚群检测,这五点一定要知道!(文末附共识原文)

 付刚8bid499jz5 2024-04-07 发布于河南

淋巴细胞亚群中的T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤淋巴细胞及淋巴细胞功能亚群调节性T细胞是细胞免疫检测的常用指标,广泛用于血液肿瘤患者的免疫状态评估、疾病复发或转移风险预测及治疗指导等。


为了更加深刻认识淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中的作用,加强其检测过程的质量管理,促进其规范地应用于临床《淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识》介绍了淋巴细胞亚群的检测方法,归纳总结了其对血液肿瘤筛查、复发转移预警及预后评估、合并感染风险预警、造血干细胞移植后免疫重建监测与移植物抗宿主病预防、嵌合抗原受体T细胞免疫治疗后监测、用药指导与疗效监测等方面的应用,并对血液肿瘤患者的监测方案与随访时机选择做出了推荐。

小编特别整理五大项,供大家参考。

第一,淋巴细胞亚群具体包括哪些?


淋巴细胞是构成人体免疫系统的主要细胞,根据淋巴细胞表面的标记物和功能可以分为许多不同的群体,包括CD3+T淋巴细胞,CD3+CD4+辅助/诱导T淋巴细胞,CD3+CD8+抑制/杀伤T淋巴细胞,CD3-CD19+B淋巴细胞 , CD3- ( CD16+CD56 ) +NK淋巴细胞 ,简称为 TBNK ,及CD3+CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(Treg)等。

本共识中将TBNK和Treg统称为淋巴细胞亚群。

第二,淋巴细胞亚群在血液肿瘤到底有哪些临床意义?


①血液肿瘤初筛。我们知道,血液肿瘤包括多种类型,其中一些类型可表现为特定淋巴细胞亚群的增殖和分化异常,如急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞增殖性疾病(CLPD)等;

②肿瘤复发及转移预警及预后评估。肿瘤细胞逃脱免疫监视机制之一就是抑制免疫细胞,如Treg,其在多种血液肿瘤中比例增加,与恶性程度、转移倾向、复发率等预后指标密切相关;

③合并感染风险预警。

④移植后免疫重建评估与GVHD的预防。其中,Treg可作为急性和慢性GVHD的生物标志物。

⑤CAR-T治疗患者的规范化管理和评估。

⑥靶向药物、免疫抑制剂和化疗药物的疗效监测,治疗指导。

第三,淋巴细胞亚群检测的主要方法有哪些?


流式细胞术(FCM)临床上常用的淋巴细胞亚群检测方法。具体课参考《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》,注意事项有以下几点:

首选EDTA-K2抗凝真空管进行外周静脉血标本采集,并在24 h内进行检测;

②TBNK检测推荐的单抗为CD45、CD3、CD4、CD8、CD19、CD16、CD56;

③Treg检测的单抗为CD4、CD25、CD3、CD127;

第四,淋巴细胞亚群检测的参考区间是什么?


淋巴细胞亚群检测的结果报告内容通常包括CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞和NK细胞的相对计数(百分比)和绝对计数(绝对值)、CD4+/CD8+比值、Treg细胞占CD4+T细胞的百分比。

我国不同地区、年龄、民族健康人群的TBNK、Treg细胞参考区间见表1和表2。
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最重要的是,第五,到底如何解读报告?


1.出现以下情况,需结合临床进行血液肿瘤的筛查。
  • B或NK淋巴细胞显著增高;
  • CD3+CD4+CD8+T淋巴细胞或CD3+CD4-CD8-T淋巴细胞明显增高;
  • CD4/CD8比值大于10:1或小于1:10;CD3+%+CD19+% +(CD16+CD56)+%明显大于或小于(100 ±  5)%、CD4+%+CD8+%明显大于或小于CD3+%(变化范围为5%~10%);
  • 需排除标本、仪器、设门、试剂及反应性改变等因素。
具体流程如下:
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2.当血液肿瘤患者出现CD4+和CD8+T细胞减少,CD4+/CD8+比值降低,Treg细胞明显增加时,提示肿瘤复发和转移的风险增加;

当CD4+T淋巴细胞绝对计数<500个/μL时,机会性感染风险会大幅升高;CD4+T、CD8+T淋巴细胞数量低下的淋巴瘤患者,化疗后感染风险明显升高;初诊时Treg细胞比例升高的血液肿瘤患者,感染率明显增加。

3.当移植患者免疫重建监测时。一般,NK细胞恢复较快,移植后2~3周可恢复;CD3+CD8+T淋巴细胞1~3月恢复,CD3+CD4+T淋巴细胞1年以上;CD3-CD19+B淋巴细胞移植后恢复时间不定,短至3个月,长至1年半以上;Treg细胞在移植早期比例低,晚期逐渐增多。

4.当移植患者GVHD预防时。Treg细胞随GVHD等级的增加呈下降趋势;NK细胞迅速增加可能会促进急性GVHD发生。建议再移植患者早期植入阶段(输注后2~4周)、移植后早期阶段(输注后1~3月)、移植后晚期阶段(输注
后3月以后)都行淋巴细胞亚群检测。

5.当用于CAR-T细胞增殖监测时。在回输CAR-T细胞后,通过FCM监测外周血CAR-T细胞的比例和数量如CAR-T细胞 (占淋巴细胞 ) 、 CD4+CAR-T细胞 (占 T淋巴细胞 )和CD8+CAR-T细胞(占T淋巴细胞),从而监测CAR-T细胞增殖水平。建议连续监测患者CAR-T细胞回输前1天、回输后第4天、第7天、第14天、第28天外周血淋巴细胞亚群变化情况,及治疗后2个月、3个月、6个月随访。

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6.除上述以外,在指导血液肿瘤患者药物治疗时,B细胞是否完全清除可用于评估CD20单抗的治疗反应和疗效

对于免疫功能严重受损的患者,当CD4+T细胞绝对计数小于100个/μL时,应及时停用免疫抑制药

对于移植及个体化免疫治疗患者,当CD4+/CD8+细胞比值出现小于0.2时,应停用免疫抑制药。



参考资料:
淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识
编辑 | 肥乙

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