染色法是使染色剂与细菌细胞质结合,最常用的染色剂是盐类。其中,碱性染色剂( basic stain)由有色的阳离子和无色的阴离子组成,酸性染色剂( acidic stain)则相反。酸性染色剂不能使细菌着色,而使背景着色形成反差,故称为负染( negative staining)。染色法有多种,最常用和最重要的分类鉴别染色法是革兰染色法(Gram staining)。该法是丹麦细菌学家革兰(Hans Christian Gram,1853—1938)于1884年创建,至今仍在广泛应用。标本经固定后,先用碱性染料结晶紫初染,再加碘液媒染,使之生成结晶紫-碘复合物。此时细菌均染成深紫色。然后用95%乙醇脱色,有些细菌被脱色,有些不能。最后用稀释复红或沙黄复染。革兰染色法在鉴别细菌、选择抗菌药物、研究细菌致病性等方面具有重要的意义。但与菌细胞壁结构密切相关,如果在结晶紫-碘染色之后,乙醇脱色之前去除革兰阳性菌的细胞壁,革兰阳性菌细胞就能够被脱色。目前,对革兰阳性和革兰阴性菌细胞壁的化学组分已十分清楚,但对革兰阳性菌细胞壁阻止染料被溶出的原因尚不清楚。如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血链球菌、非溶血链球菌、肺炎球菌,肠球菌等如肠杆菌科细菌(大肠埃希菌、沙门菌属、志贺菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属等)、流感杆菌,弧菌科细菌(霍乱弧菌、El Tor弧菌、副溶血弧菌)等炭疽杆菌、蜡样杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒杆菌、难辨梭菌等不形成芽胞的细菌有单核细胞增多性李斯特菌、红斑丹毒丝菌等此外,重要的致病菌还有白喉杆菌、结核杆菌、麻风杆菌等1.医学微生物学/李凡,徐志凯主编.- 9版. -北京:人民卫生出版社,20182.临床药物治疗学.感染性疾病/颜青等主编.-北京:人民卫生出版社,2017
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