【原】JNJ-3989 和 Bersacapavir 在病毒抑制慢乙肝患者2b期临床试验结果发表（REEF-2研究）

ARO HBV（JNJ-73763989，JNJ-3989 ）是一款由 Arrowhead 公司开发用于慢性乙型肝炎治疗的在研短RNAi（siRNA）疗法药物，ARO HBV（JNJ-3989 ）可以沉默来自游离cccDNA和整合HBV DNA的HBV RNA转录（现已被GSK从强生公司手中接手）。

JNJ-56136379 (JNJ-6379) 是一款由强生旗下 Janssen 公司开发用于慢乙肝治疗的新型有效衣壳组装调节剂（CAM），它通过诱导缺乏基因组物质的病毒衣壳的形成来抑制病毒复制（该药现已被终止研究）。

REEF-2 是一项 2b 期、多中心、双盲、安慰剂对照随机研究。旨在评估 JNJ-3989 和/或 JNJ-6379 + NA 治疗方案和停用 NA 的疗效，评估指标是完成 48 周治疗阶段停药 24 周无需重启NA治疗的 HBsAg 血清清除率。次要目标包括病毒学参数随时间的变化以及安全性和耐受性。

研究纳入 HBeAg 阴性非肝硬化慢性乙型肝炎患者作为受试对象，患者在筛查前接受 NA 治疗后病毒学抑制≥24 个月。符合条件的患者在筛查时 HBsAg >100 IU/mL，且 HBV DNA <60 IU/mL，丙氨酸氨基转移酶（ALT）<2.0×正常值上限（ULN），两次测量间隔≥6 个月（其中一次在筛查时）。

患者按 2:1 随机分配接受 JNJ-3989（200 毫克 SC 注射剂，每 4 周一次 [Q4W]）+ JNJ-6379（250 毫克口服 [PO] 片剂，每天一次 [QD]）+ NA（恩替卡韦、替诺福韦艾拉酚胺或富马酸替诺福韦二吡呋酯，QD；药物组）或 JNJ-3989 安慰剂（SC Q4W）+ JNJ-6379 安慰剂（PO QD）+ NA（对照组）。

患者接受 48 周治疗，然后停止包括 NA 在内的所有治疗，无需满足预先指定的标准；随后是 48 周的停药随访阶段。随访期间的 NA 再治疗标准为：确认 HBeAg 血清转换、HBV DNA 增高 >2000 IU/mL、ALT >5× ULN、HBV DNA 增高 >20,000 IU/mL。如果实验室或临床评估显示肝功能有下降或受损迹象，或 HBV DNA >100,000 IU/mL，无论 ALT 水平如何，都应立即重新开始 NA 治疗（最后一项标准是在研究期间通过修订方案增加的）。

研究结果

研究招募了130名NA抑制、HBeAg阴性慢乙肝患者。85名和45名患者分别被随机分配到药物组和对照组。mITT人群包括128名患者，不包括因COVID-19相关原因退出的2名患者（图1）。

总体而言，66.9%的患者为男性，66.2%为白人，19.2%为亚裔，平均年龄为46.0岁；进入研究时接受NA治疗的平均时间为8.3年。所有患者的基线 HBV DNA 均小于 LLOQ，药物组和对照组的基线 HBsAg 平均值（标准差 [SD]）分别为 3.43 (0.53) IU/mL 和 3.49 (0.70) IU/mL。

在入组的 130 名患者中，有 81 名（95.3%）和 40 名（88.9%）患者分别在药物组和对照组完成了研究（图 1）。大多数过早终止研究的原因是患者的选择，只有 8 例（9.4%）和 4 例（8.9%）药物组和对照组患者过早终止了 JNJ-3989、JNJ-6379 或安慰剂的治疗（图 1）。

疗效

主要终点

在随访第 24 周，没有患者达到功能性治愈（停药治疗后 HBsAg 血清清除）的主要终点，在随访第 48 周（随访结束；图 2），也没有患者达到功能性治愈。

HBsAg 值

次要终点，即第 48 周时 HBsAg 从基线变化的平均值（标准误差 [SE]；范围），药物组为 -1.89 (0.06; -3.4, -1.0)log10IU/mL，对照组为 -0.06 (0.01; -0.3, 0.2)log10IU/mL（P<0.001；图 3A；表 2）。

随访第 48 周时，药物组 HBsAg 从基线变化的平均值（SE；范围）为-1.46 (0.07; -4.0, -0.3)log10IU/mL，对照组为-0.49 (0.12; -4.5, 0.1)log10IU/mL（P<0.001；图 3A；表 2）。在第 48 周、随访第 24 周和随访第 48 周，药物治疗组中分别有 54/76 (71.1%)、53/79 (67.1%) 和 38/81 (46.9%) 例患者的 HBsAg 达到 <100 IU/mL，而对照组在这些时间点分别有 1/41 (2.4%)、4/39 (10.3%) 和 6/40 (15.0%) 例患者的 HBsAg 达到 <100 IU/mL（图 2）。

虽然 EOT 后药物治疗组的平均 HBsAg 水平有所上升，但在随访第 48 周时，81.5% 的患者的 HBsAg 水平比基线降低 >1log10IU/mL，而对照组仅为 12.5%。此外，从第 48 周到随访第 48 周，分别有 13.2% 和 18.4% 的积极治疗组患者的 HBsAg 水平下降（下降 >0.2log10IU/mL）或稳定（变化 ±0.2log10IU/mL）。

从随访第 28 周到随访第 36 周，药物治疗组的一名患者实现了短暂的 HBsAg 血清学清除，对照组的一名患者在随访第 36 周至后研究结束实现了 HBsAg 血清学清除，直到临床发作（ALT 和/或天冬氨酸转移酶 [AST] >3× ULN 和 >3× nadir）并重新开始 NA 治疗。另有两名患者（两组各一名）因肝细胞癌而需要进行肝移植，结果 HBsAg 血清阴性，其中药物组患者继续 NA，而对照组患者则出现严重的 HBV 再激活。

治疗中反应

所有患者的基线 HBV DNA 水平均小于 LLOQ（20 IU/mL），在第 48 周时，药物治疗组和对照组分别有 73/75 例（97.3%）和 41/41 例（100%）患者保持了这一水平（图 4）。在 48 周的治疗阶段，两组均未出现病毒突破（即证实[连续 2 次就诊]从最低点增加 1log10IU/mL，或证实 HBV DNA >200 IU/mL（如果 HBV DNA 低于 LLOQ））。在治疗阶段，平均 ALT 值保持在基线水平附近；在药物治疗组中，ALT 值逐渐升高，76 例患者中有 16 例（21.1%）的 ALT 值大于基线值的 2 倍（而对照组中没有）。平均 ALT 水平保持在正常范围内（图 5）。

停药治疗后反应

在药物治疗组和对照组中，分别有 3/77 (3.9%) 和 11/41 (26.8%) 例患者观察到治疗后临床复发（即 HBV DNA >2000 IU/mL 的增加与 ALT 增高[证实 ALT ≥3× ULN 和 ≥3× nadir]）。

随访期间 HBV DNA 的升高与 ALT 升高相关，HBV DNA 峰值 >100,000 IU/mL 与 ALT 复发≥3×ULN 相关。在病毒学复发且确认停药治疗 HBV DNA 峰值 >100,000 IU/mL 的患者中，（药物治疗组和对照组）分别有 1/2 （50%）和 11/11 （100%）例患者观察到 ALT 峰值 >3× ULN。

在药物治疗组中，HBV DNA 增高的频率较低且不明显（HBV DNA 峰值 >2000 IU/mL：积极治疗组 = 33.8%，对照组 = 65.8%；HBV DNA 峰值 >100,000 IU/mL [病毒学复发]：药物治疗组 = 2.6%，对照组 = 26.8%），因此随访期间 ALT 复发率大大降低（药物治疗组 = 3.6%，对照组 = 28.6%）。

观察到 7 例治疗后一过性 HBeAg 阳性，其中大多数是符合 NA 再治疗标准的对照组患者。

在随访阶段，药物治疗组很少有患者出现 ALT 阳转，73/77（94.8%）例患者的 ALT 峰值<3×ULN，而对照组为 25/41（61.0%）例（表 2）。相比之下，对照组中有 10/41（24.3%）例患者的 ALT 峰值≥10×ULN，而药物组中仅有 1/77（1.3%）例患者的 ALT 峰值≥10×ULN（表 2）。

药物治疗组 77 例患者中有 7 例（9.1%）和对照组 11/41 例（26.8%）患者在随访期间的任何时间达到了 NA 再治疗标准（图 3B）。随访期间，对照组的 1 名患者出现了与停用 NA 有关的严重 AE（SAE）。尽管该患者在符合重新开始标准时立即重新开始了NA治疗，但还是出现了严重的HBV再激活和急性肝功能衰竭，需要紧急进行肝移植，并最终成功。

在停止NA治疗的患者中，随访第48周时，药物治疗组和对照组分别有17/77（22.1%）和1/41（2.4%）名患者的HBV DNA小于LLOQ；药物治疗组和对照组分别有31/77（40.3%）和3/41（7. 3%）的患者 HBV DNA <2000 IU/mL，HBsAg <100 IU/mL；12/77（15.6%）和 0（0）的患者 HBV DNA <LLOQ 和 HBsAg <100 IU/mL，即通常所说的部分治愈。

安全性

在为期48周的治疗阶段，药物组有69例（81.2%）患者出现≥1级AE，其中38例（44.7%）与治疗有关，对照组有32例（71.1%）患者出现≥1级AE，其中15例（33.3%）与治疗有关（表3）。

在 48 周的随访阶段，药物治疗组和对照组分别有 55 例（65.5%）和 28 例（68.3%）患者出现≥1 级 AE。

在治疗期间，药物组和对照组分别有 13 例（15.3%）和 2 例（4.4%）患者出现 3 级或 4 级 AE，其中大多数为 3 级（药物组：11 例 [12.9%]；对照组：1 例 [2.2%]）。6名患者（4.6%）出现了与研究治疗相关的3级或4级AE，所有这些患者都属于药物治疗组。

在双盲阶段，大多数 3 级 AE 和 6 例相关 3 级 AE 中的 4 例根据肌酐水平报告为 eGFR 下降。在随访期间，每组有 7 名患者出现 3 级或 4 级 AE，每组只有 1 名患者出现与研究药物相关的 3 级或 4 级 AE。两组患者在治疗阶段和随访期间的SAE发生率均较低，药物治疗组和对照组分别有2例（2.4%）和1例（2.2%）患者发生SAE，药物治疗组和对照组分别有2例（2.4%）和3例（7.3%）患者发生SAE。没有死亡病例。