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----- 广告 ----- ----- 广告 ----- 噬菌体、抗菌肽联合用药防控对虾综合细菌性疾病 正文字数：5312 预计阅读时间：8分钟以上 随着对虾养殖端细菌性疾病的严重爆发与耐药性不断增加，减抗、替抗已是大势所趋，尤其2020年我国养殖业实施“禁抗令”后，寻找新的防控产品、替抗产品迫在眉睫。其中，沉寂多年的噬菌体因诸多优势突出重围成为替抗的一柄利器。然而，目前市面上噬菌体的产品良莠不齐，如何科学甄别对于养殖户而言至关重要！
据悉，广东诚吉邦生物科技有限公司（以下简称“广东诚吉邦”）于2013年成立，距今已有近12年光景，链接行业内多家知名企业与集团，形成了研发、生产、供应，应用完整的产业链。集科研、生产、销售、技术服务于一体的生物科技创新型企业。战略合作方有：广东润华药业、探海生物、荣鼎生化、灝洋科技、诺安百特、海鸿源水产养殖公司等。多年来，广东诚吉邦一直秉承“诚始于心、表于行、终于信”的精神理念，致力于水产噬菌体、抗菌肽的研究，与国内知名噬菌体产品研发企业青岛诺安百特生物技术有限公司开展了实质性合作，其开发的“638+639”组合方案更是成为防控弧菌病害的重要解决方案，深受养殖户追捧。为更了解该噬菌体、抗菌肽的相关特性以及广东诚吉邦公司研发情况，笔者与青岛诺安百特首席科学家任慧英教授和广东诚吉邦技术总监董礼雄进行了交流。 
任慧英 女，博士，青岛诺安百特生物技术有限公司首席科学家。为中国噬菌体专业委员会委员，从事噬菌体治疗研究二十余年，是国内最早开展噬菌体研究，并且把它产业化的教授。任教授获得过国家科技进步二等奖1项，省部级以上的奖励5项，拥有国家授权发明专利42项，带领诺安百特建立库容一万余株的噬菌体毒株库。   噬菌体特异性强， 是防控弧菌问题主要手段  水产前沿：任教授您好，能否请您给我们简单介绍一下噬菌体的作用机理？ 任慧英：噬菌体属于病毒的一种，由核酸和蛋白组成。噬菌体进入细菌体内，能与细菌发生特定结合，并在细菌体内不断增殖，最终使细菌裂解，同时释放出更多噬菌体。噬菌体杀菌具有特异性，如副溶血弧菌，其通过在副溶血弧菌体内进行增殖，最终使副溶血弧菌裂解死亡。 此外，在养殖过程中，常规化药经常面临耐药与变异菌问题，但噬菌体一般不受细菌耐药性变异的限制。由于噬菌体对水体酸碱度耐受范围比较广，噬菌体一般情况可以和大多药物联用，如中草药、抗菌肽（638增效酶肽）、微生态制剂等，如搭配抗生素药物一起使用时，能够有效降低药物使用量，互增药效、提高治疗率。我们在塘口开展了大量实验，结果显示，长期使用噬菌体的水体，水体中分离出来的细菌耐药性变异也会相应降低。值得注意的是，对于消毒剂、氧化性较强等药物，由于其会破坏噬菌体的结构，则不能一起使用。
水产前沿：与其他抗菌型产品相比，噬菌体具有哪些优势？ 任慧英：首先，能够很好的裂解水体和虾体中的各种弧菌；其次，噬菌体特异性强，只裂解致病弧菌，不影响有益菌，且不会产生耐药性；此外，噬菌体无抗组方，对养殖动物没有任何毒副作用，不影响动物的正常生长。 水产前沿：目前水产上噬菌体产品鱼目混珠，如何辨别噬菌体的真假，好与坏？ 任慧英：首先，由于噬菌体是活的微生物，我们可以用沸水煮噬菌体十分钟后，然后将其涂到有弧菌的培养皿上，若弧菌长势未受到任何影响，证明噬菌体是真的，因为噬菌体在高温下会失去活性，而抗生素、化药类等高温后仍然具有抑菌效果。 其次，噬菌体杀菌具有特异性，我们可以通过实验去确定，举个例子，如某片养殖水体里有黄弧菌、绿弧菌及其他弧菌。我们取水样在平板上培养后，可以看见平板上有黄弧菌、绿弧菌及其他弧菌，此时用杀灭绿弧菌的噬菌体产品处理以后的水去培养，绿弧菌会大量的减少，但其他弧菌的种类依旧存在。
然而，如果用的产品是非噬菌体，可以观察到平板上的弧菌不单是绿弧菌减少，黄弧菌和其他种类的杂菌也都会减少，从这一点就可以很好的去区别这个产品里面是否含有噬菌体。 复合型鸡尾酒疗法 噬菌体具有多重优势 水产前沿：我们主要通过什么方式保证噬菌体的有效性？ 任慧英：首先，我们实验室与养殖端互动联合，保证实时更新，持续优化。通过分布在全国各地的服务团队持续从养殖区收集水样、污泥，实验室对接收的样品进行不断筛选，持续不断的获得新的噬菌体，并实时动态掌握养殖区域弧菌的流行情况。 其次，我们通过市场调研，结合水产养殖端的实际情况分析，发现养殖水体环境事实上是复杂多变的，同片水域存在的弧菌不止一种，且弧菌暴发具有不确定性，如若哈维氏弧菌比较优势，使用对抗哈维氏弧菌的噬菌体降低其载量后，看似解决危机，实际上很可能过几天其他弧菌就异军突起，此时为防止弧菌暴发，便需要二次用药。为解决这个问题，我们推出了复合型鸡尾酒疗法噬菌体，复合型鸡尾酒疗法噬菌体矩阵可以同时对抗哈维氏、副溶血、创伤等多种弧菌，将塘口弧菌载量降到安全范围，减少用药次数，同时能降低二次弧菌暴发对塘口带来的风险，能实实在在助力养户减少成本、减少损失。 此外，在复合型鸡尾酒疗法噬菌体这款产品中，一方面我们通过独有的发酵工艺，进行了多毒株的协同发酵，即节约了成本，也保证了产品效果；另一方面，我们的浓缩纯化工艺可以去除噬菌体的内毒素，且噬菌体依旧能保持非常好的裂解效率，从而保证噬菌体原料具有非常高的出厂效价。 最后，由于噬菌体需要冰箱进行低温储存，为保证噬菌体的稳定性，我们开发了特有的保护剂，让噬菌体在常温状态下也不易失活，同时我们有目前全国唯一的一套噬菌体固体工艺转化的设备，能把液体的噬菌体产品加工成粉剂，相比液体噬菌体，粉剂的噬菌体保质期更长。
水产前沿：相比单一性噬菌体，复合型鸡尾酒疗法噬菌体有哪些优势？ 任慧英：主要有以下几点 1.裂解谱广，对于常见烈性的副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌、霍乱弧菌等多种致病菌均可高效裂解，裂解率高达98%以上。 2.可精准防控烈性弧菌VP、EMS、AHPND、HLVD等。 3.安全无残留，不影响水体有益微生物的活性，无毒无害无刺激，裂解后自然排出体外，对动物机体细胞无损伤。 4.具有全球最先进的噬菌体防盗技术和抗性防控技术。 5.效价高，噬菌体含量可达1012pfu/g。 
董礼雄 广东诚吉邦技术总监，毕业于广东水产学院、上海海洋大学养殖专业，获水产技术工程师评称，具有服务水产养虾终端近16年经验，致力于生物絮团技术养虾的研究与推广。
水产前沿：董总好，您经常进行塘头服务，噬菌体在塘头实际使用过程，会不会出现效果不佳情况，对此有何建议？ 董礼雄：集约化养虾是个系统工程，疾病发生主要取决于环境、病原、体质三者之间的关联性。目前噬菌体在生物防控弧菌疾菌上的确存在有一定缺陷，但从生物防控的角度来讲，弧菌噬菌体的独特优势仍是防控弧菌感染的最佳选择。对于如何提高弧菌病防控效果，我们建议养殖户平时需要做好水环境与虾体质管理工作，在此基础上再通过使用我们公司拳头产品“639副溶净1号”+“638增效酶肽”提高防控效果。也纳鉴以下几个因素： 1.如大部分对虾由于烈性弧菌原因导致已不食料，肝胰腺已有明显不可逆痿缩的情况，此时不建议使用噬菌体来治疗。 2.水体恶化有机质多、弧菌含量高，可提前一天使用碘剂、强氧化剂等改善水环境。 3.遇到防控效果不明显时，应综合排查，判断病虾是否吃到药饵，调节使用剂量与次数，排除是否有强酸强碱化药干扰，同时联系我司送样排查产品噬菌体对该弧菌的敏感度。 4.水温在26-28度时，噬菌体进入宿主体内15-20分钟后便可以增殖到100-200个噬菌体，因此我们建议如需要PCR或TCBS检测，应该在使用产品20小时后进行对照。
水产前沿：上述您提到了贵司的拳头产品--“639副溶净1号”，这名字挺有意思？在同类产品中竞争优势如何？ 董礼雄：诚吉邦公司的微生物产品都以“6”字开头，而几年前，“玻璃苗”还没大量爆发，大部分客户在检测、防控上以副溶血、“绿菌”为主要代表词，所以产品名当时以“副溶净”命名，主要是为了通俗易懂的推广，便一直留用至今。目前，我们的这款639副溶净1号“鸡尾酒”复合烈性弧菌噬菌体产品已升级到12株，对现有常见烈性弧菌裂解率保持在98%以上，防控效果显著。
一直以来，公司通过积极引导各地客户和服务团队寄病样，对各地区病样进行检测和诊断、分离鉴定病原菌以及抗生素药敏试验和噬菌体敏感性试验。一旦发现有当前噬菌体产品所不能覆盖的细菌，我们马上就会筛选新噬菌体，同时检测细菌耐药性、对哪些抗生素敏感，及时向用户提供科学用抗生素信息。此外，我们也会有一个全国调研，对不同地区的流行病菌进行摸排，筛选新的噬菌体，及时更新配方，以保证产品效果。 对于大客户，公司一般采用定制化服务方案，通过对塘口采样调查，确认菌株类型，筛选对应噬菌体，定制产品，提高服务密度，增加客户粘性。 水产前沿：贵司的鸡尾酒疗法噬菌体产品不是已经升级到有12株了么？但刚才您又讲到还需要联合用药，这需要怎么理解？ 董礼雄：弧菌噬菌体的裂菌效果大家有目共睹，但其只能针对特定细菌，这种特异性是优点同时也是缺点。为了补齐噬菌体此短板，我们在推出“639副溶净1号”的同时开发了“638增效酶肽”抗菌肽产物配合使用。 联合用药主要目的在于不同药物作用机理起互增药效、提高防控率、减少剂量、减抗替抗、减少对机体的副作用、耐药性等角度出发。参见以下：噬菌体、抗肽菌、抗生素作用机理。
当下，弧菌病是对虾养殖危害最大的疾病之一，临床常见的弧菌有烈性溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、欧文斯弧菌、坎贝氏弧菌等，还有条件致病弧菌的大部分弧菌属。在对虾养殖过程中，除弧菌外也有其他致病细菌，如常见的有嗜水气单胞菌、发光杆菌类杆菌以及球菌等，这些病原菌都会引发对虾综合偷死症。防控这些病原菌，现有的噬菌体并不能完全覆盖，所以需要配合“638增效酶肽”进行综合处理，整体提升对虾的细菌病防控水平。
对虾养殖环境中的弧菌、嗜水气单胞菌等大多数条件致病菌多属于革兰阴性菌，芽孢杆菌等有益菌多属于革兰阳性菌。“638增效酶肽”抗菌肽产物可以抑制革兰阴性菌，提高虾体免疫应答，同时为肠道益生菌提供基础营养如低聚糖等，协同有益菌在肠道占位生长，防控有害细菌的侵入。在同等正常环境下拌料“638增效酶肽”喂对虾一段时间后对照组可见对虾肝胰腺、肠道清晰，肠道变粗、虾色漂亮。 “638增效酶肽”+“639副溶净1号” 在临床使用细节： 内服：“638增效酶肽+639副溶净1号”，联合内服拌料效果更佳。 常态预防：养成场：各1包产品拌120-160斤饲料，每天一餐使用这组合。 苗场：各2个PPM与饲料浸泡后全池泼洒均匀。每天一餐使用这组合。 以上视综合情况调整用量与次数。 外用：“638增效酶肽”不建议在养成池外用，因性价比、用药量大、水环境复杂干扰性不确定。“639副溶净1号”外用，每包可用2-4亩米水体。视情增减用量与次数。 水产前沿：能否分享几个”639副溶净1号“和“638增效酶肽“在塘头案例？ 董礼雄： “639副溶净1号“案例 漳浦客户陈秋兰，约20口高位池，在2023年10月19日放苗至11月19日共30天。全程使用“639副溶净1号“拌料防控弧菌引起的疾病，对照同期周边放苗情况： 全程用“639副溶净1号“防控，苗期投喂粉料，投喂料量少，约1包”639副溶净1号“化水浸泡40斤粉料，相对应泼洒到每口池，1天1餐药料。养殖全程相对顺利，没发生弧菌病害。在这个过程中，同期周边的养殖户，对虾塘口绿弧菌、玻璃苗爆发率很高，出现很大比例的排塘情况。
“638增效酶肽“+”639副溶净1号“预防案例 福建·漳浦·白沙·魏总案例。2024年1月27号放苗，22天后上料台后接触到我司产品，开始尝试用“638增效酶肽“与”639副溶净1号“配合使用（各1包产品拌80斤饲料），期间连续使用一个多月至今3月底，3天为一周期，拌3天停3天，一天拌一餐。 小结：两口池使用以上方案内服，均测不到烈性弧菌，同期周边好几口池都测到烈性弧菌。 特别是虾体黑色斑点多的时候连续拌本组合，一天一餐、连用三天，第四天虾体色就很透明。 “638增效酶肽”+“639副溶净1号”治疗案例 广东·粤东一高位池养金刚虾，2亩水面一个池，放苗有一个多月，2024年3月24日 测水样PCR发现1号池2号池水样都有2次方副溶血弧菌。防控方案如下： 25日，我们建议客户开始外用“639副溶净1号“一包用1亩米水体，共下3包/池，连用2天，同时内服”638增效酶肽“+”639副溶净1号“，各一包产品拌80斤饲料，一天二餐，连用三天。28日，技术人员进行1号池2号池PCR水样虾体检查，副溶血弧菌均转为阴性。
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