慢性肾功能衰竭（Chronic Renal Failure，CRF），系指肾功能出现的持续、不可逆的减退过程。其核心特征在于肾小球滤过率（GFR）的明显降低，导致了体内代谢废物、水分以及电解质的平衡失调，从而对全身多个系统造成不利影响。CRF的诱因纷繁复杂，涵盖了原发性肾小球疾病、糖尿病肾病、高血压肾病以及梗阻性肾病等多种疾病状态。在我国，CRF的患病率逐年攀升，已然成为影响公众生活质量的重要公共卫生挑战。山茱萸，由山茱萸果实提取所得，乃中医药中常用之一味，对于慢性肾脏疾病之治疗已有确凿之疗效。其加工形态主要分为生山茱萸（CCF）与酒制山茱萸（WCF）两种。自古以来，WCF与CCF在治疗肾脏疾病方面已有广泛应用。然而，随着现代医学技术的不断进步，传统中药在慢性病治疗中的优势逐渐受到人们的关注。尽管如此，WCF与CCF在慢性肾脏疾病治疗中的应用仍显不足，其确切的治疗机制亦有待深入研究。一篇名为“The therapeutic effect of wine-processed Corni Fructus on chronic renal failure in rats through the interference with the LPS/IL-1-mediated inhibition of RXR function”的论文研究了CCF或WCF对慢性肾功能衰竭（CRF）模型的潜在处理机制。CCF和WCF对CRF大鼠的肾保护作用
经过系统的实验研究和数据分析，研究发现WCF和阳性对照药物金水宝胶囊（JSB）在针对腺嘌呤诱导的CRF大鼠模型中展现出了显著的治疗效果和良好的疗效。在大鼠接受WCF和JSB治疗后，其肾功能参数得到了明显改善，具体表现为血清肌酐（Scr）和血尿素氮（BUN）的水平显著降低，尿量有所增加，同时尿酸（UA）的排泄率也相应提升。这些结果表明，WCF和JSB在药理作用上表现出了一定的相似性（图2A）。进一步的组织病理学检查显示，WCF在减轻大鼠肾组织中的肾小球硬化、间质纤维化和炎症等病理变化方面发挥了积极作用，从而有效保护了肾脏免受进一步损伤（图2B）。相比之下，CCF的治疗效果则显得相对有限。尽管CCF也在一定程度上改善了肾功能参数，但与WCF相比，其改善效果并不显著。此外，在组织病理学检查中，CCF对肾小球硬化和间质纤维化的抑制作用相对较弱，未能有效缓解肾脏的病理损伤。综上所述，WCF在治疗腺嘌呤诱导的大鼠CRF方面相较于CCF展现出了更为优越的效果。这些发现为深入探索WCF的潜在临床应用提供了坚实的科学依据，并为制定更加有效的治疗策略提供了重要参考。然而，深入的研究工作还需继续开展，以验证这些结果，进一步明确WCF的适应症和治疗机制，并推动其在临床实践中的广泛应用。图2 大鼠肾脏生化指标（A）及组织病理学检查（B）
CCF和WCF对CRF大鼠组织代谢组学概况
研究通过对数据集执行主成分分析（PCA），以便在得分图中揭示不同组别间的分离趋势。为验证对照组与CRF组间的代谢差异，研究者构建了正交偏最小二乘判别分析法（OPLS-DA）模型。根据PCA评分图与OPLS-DA（图3），质控（QC）样品在两种模式下均表现出优秀的聚集性，这证明了色谱分离与质谱采集的稳定性，从而确保了样品分析过程中的精确性与可靠性。R2X与Q2的高值进一步证实了PCA与OPLS-DA模型具有出色的解释与预测能力。MG与空白对照组（CG）的明显分离，揭示了腺嘌呤诱导的大鼠动物模型中存在的代谢紊乱现象。然而，CCF与WCF组的代谢谱更接近CG而非MG，表明CRF模型的代谢谱受到了CCF与WCF的影响。此外，WCF组相较于CCF组更接近CG，这暗示WCF对腺嘌呤诱导的CRF代谢紊乱具有更强的调节作用。图3 代谢组学正离子和负离子模式的PCA评分图（A）；正离子和负离子模式的OPLS-DA评分图（B）
差异基因表达的测量
研究深入研究了WCF和CCF对表4中蛋白质编码基因的作用，并通过qRT-PCR技术验证了差异表达的mRNA。在CRF模型中，发现FMO1、FMO3、CYP2E1、CAT和ACOX1的表达水平上调，而GSTA1、SLC27A2和CYP4A14的表达水平下调（图4A-H）。随后，在CCF和WCF的处理下，GSTA1、SLC27A2、FMO1、FMO3、CYP4A14、CYP2E1、CAT和ACOX1的表达水平均出现了不同程度的逆转。值得注意的是，相较于CCF，WCF对GSTA1、FMO1、FMO3和CYP2E1的影响更为显著，而CCF在调节SLC27A2、CYP4A14、CAT和ACOX1的表达方面表现出更强的能力。虽然CCF和WCF都能对SLC27A2和ACOX1的表达进行调节，但两者之间的表达水平并没有显著差异（P>0.05）。qRT-PCR实验结果显示，WCF和CCF对FMO3和CYP2E1基因的表达表现出显著的调节作用，超过了它们对其他基因的影响。因此，研究推测FMO3和CYP2E1可能是WCF和CCF对抗CRF的重要靶点。
图4 CCF和WCF对FMO1（A）、GSTA1（B）、CAT（C）、CYP2E1（D）、SLC27A（E）、CYP4A14（F）、FMO3（G）和Acox1（H）表达的影响
FMO3和CYP2E1表达的测定
经过严谨的验证，研究发现二甲基苯胺单加氧酶（A0A0G2JSI0）和细胞色素P450 2E1（A0A0G2 K5X9）这两种差异蛋白分别由FMO3和CYP2E1基因编码。为了进一步确认该发现，研究者采用了免疫印迹法来检测FMO3和CYP2E1在CRF大鼠肾脏中的表达情况。如图5所示，FMO3和CYP2E1的表达水平在CRF大鼠肾脏中显著上升。
这一结果进一步支持了假设，即WCF和CCF具有抗CRF作用，其机制可能是通过抑制FMO3和CYP2E1的表达来实现的。另外，研究也发现CCF和WCF处理能够显著降低腺嘌呤诱导的FMO3和CYP2E1的过度表达。值得注意的是，WCF对FMO3和CYP2E1表达水平的影响更为显著。
综上所述，结果表明甲基苯胺单加氧酶和细胞色素P4502E1可能是治疗CRF的潜在靶点。这为未来开发针对CRF的新型药物提供了重要的理论依据。
图5 FMO3和CYP2E1在不同组之间的蛋白质表达
研究运用代谢组学与蛋白质组学联合分析，对比了不同炮制工艺下的山茱萸（CCF与WCF）在CRF大鼠模型中的效果差异，探索山茱萸在治疗慢性肾功能衰竭（CRF）中的机制。综合分析确定了治疗靶点，发现WCF效果优于CC，这一研究为深入探索山茱萸作用机制及作为CRF治疗药物应用提供了基础和支持。
Sun S, Peng K, Yang B, Yang M, Jia X, Wang N, Zhang Q, Kong D, Du Y. The therapeutic effect of wine-processed Corni Fructus on chronic renal failure in rats through the interference with the LPS/IL-1-mediated inhibition of RXR function. J Ethnopharmacol. 2024 Mar 1;321:117511. doi: 10.1016/j.jep.2023.117511老中医（微信号：wxid_rszr95aw79ie22）梅斯循证中医药用最前沿的循证证据解读现代中医药
133篇原创内容
公众号
