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01 实验原理 人体肿瘤移植于免疫缺陷动物（裸鼠），能保持其生物学特性，用于研究人体肿瘤对药物的敏感性有很大帮助。早期工作是将人体肿瘤移植于动物缺乏免疫机能的特殊部位，如鸡胚、动物的眼前房、仓鼠颊囊内等，虽有一定比例的成活率，但因肿瘤生长缓慢又受移入部位包膜的限制，肿块往往较小，难于传代，更不能适应需要较多瘤源的实验治疗工作。因此，利用裸鼠建立肿瘤模型进行防治研究，是基础医学研究中的重要课题。  02 应用简介 裸鼠皮下荷瘤是指将人源或鼠源细胞注射到免疫缺陷的Balb/c 裸鼠皮下，通过施加药物或其它条件来验证细胞成瘤或转移能力的实验方法。裸鼠肿瘤模型是研究肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价以及有效性筛选等研究课题的基础。  03 试验方法 tep1：准备细胞样品，生理盐水重悬：对接种环境进行消毒，用注射器进行细胞重悬，酒精棉球对裸鼠注射部位消毒后，取对数生长期的细胞，制成浓度为1*107/ml的细胞悬液。 Step2：细胞计数，注射细胞到裸鼠皮下：按照分组进行接种，每只裸鼠于右腋皮下缓慢接种150μl细胞悬液，拔针后迅速用针头将细胞聚集，防止细胞液外漏。 Step3：观察记录成瘤情况 Step4：处死裸鼠，取出肿瘤，做进一步研究 04 实验中常见的问题 问题一：肿块增大后又缩小或消失? 回答： 肿块出现后经常会有此现象，可能是由于炎症反应导致，肿瘤细胞被吸收，建议持续观察数周，若未见再次增大迹象，则考虑更换方法。 问题二：单只小鼠是否可接受多个接种点 回答: 不可。单只小鼠只应接受单个接种点，因为在同一只小鼠身上进行多个接种可能会相互影响。 问题三：为何肿瘤无法生长出来： 回答： 1.肿瘤生长速度缓慢，从出现肿块到形成完整肿瘤可能需要1~2个月； 2.可能是细胞状态不佳或肿瘤细胞不易形成肿瘤，可尝试使用基质胶辅助或增加接种量，或更换细胞系； 3.可能是小鼠年龄过大或免疫排斥，建议更换免疫缺陷程度更高的小鼠（如Nod-scid小鼠）。 问题四：肿瘤体积差异大 回答： 首先，并非所有肿瘤都具有均一形态。其次，可能与小鼠年龄及接种细胞量不一致有关，建议重新进行接种。 问题五：皮下或皮内肿瘤生长迅速或出现溃疡和坏 回答： 考虑小动物感染，可对其提供支持性治疗和预防感染的抗生素。若小动物出现全身坏死和溃疡，长度不超过1.5cm，且持续超过48-72小时而不愈合，则可能需要安乐死处理。 |
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