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| 共 38 篇文章 |
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标题: RACE(3''端 和 5''端-RACE)实验技术摘要: RACE(rapid-amplification of cDNA ends，RACE) 即cDNA末端快速扩增技术，是基于PCR技术，由一段cDNA已知片段，通过往两端延伸扩增从而获得完整cDNA的5 和3’末端的有效方法, 由于RACE具有简单、快速、廉价等优势，使其在cDNA文库的构建及筛选，新基因的发现等方面得到了广泛的... 阅2200 转13 评0 公众公开 16-04-25 17:44 |
cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5''和3’末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等(1988)发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5’和3’端，包括单边PCR和锚定PCR。 阅16473 转41 评0 公众公开 16-04-25 17:44 |
比如GO分组，也就是对于这个基因的位置，基因的功能，基因的细胞学意义的定义。通过这些基因GO分析相关的关键词，我们可以了解具体我们找到的这个基因周边研究都是在什么方向。李莫愁博士：从文本中整理出基因功能相关，信号通路相关的信息，对于快速掌握基因研究方向，是很有价值的。文本相关的基因也一样有一定参考价值的，把这些基因整理出... 阅234 转7 评0 公众公开 16-03-24 12:53 |
比如转染质粒到细胞内，48小时后做WB，那么此时细胞的密度最好不要长满. 因为细胞长的过爆严重影响细胞的状态（周期进程阻滞，凋亡增加等）从而影响实验结果。质粒：脂质体=1：1， 1：1.5， 1：2， 1：2.5， 1：3， 1：3.5的梯度比例来检测最佳转染比例（一般质粒有带荧光，可以通过观察每组荧光强弱来判断转染效率，没有荧光的只能通过qPCR来... 阅15487 转104 评2 公众公开 16-03-24 12:04 |
外泌体miRNA与肿瘤耐药性密切相关！外泌体的功能之一可以通过传递miRNA来发挥肿瘤细胞耐药性。但是，有一部分miRNA水平在外泌体内比较高，这表明这部分miRNA会在外泌体内富集。在这些失调的miRNA当中，22个miRNA在外泌体中上调。对于这12个miRNA在耐药性方面的具体机制，研究人员还需要进一步的证实，以阐明其在化疗当中的作用。 阅231 转5 评0 公众公开 16-03-23 16:26 |
Cell：外泌体的研究现状与未来方向。细胞一方面通过分泌出单个分子，另一方面也可以分泌一类外泌体来运输蛋白、核酸、脂质到靶细胞。虽然，已有初步研究结果解释外泌体在体内的运输途径。但关于，其介导的细胞间的信号传导的功能研究仍需要一些实质性的研究来解释。在这篇Cell文章中，作者首先总结了目前外泌体最引人注目的功能研究：1）外泌体... 阅1184 转6 评0 公众公开 16-03-23 16:26 |
Hepatology：天津医大揭示肿瘤外泌体激活树突状细胞发挥肿瘤抑制功能。免疫疗法上，用肿瘤细胞裂解物作为抗原离体活化的树突细胞（DC）用于肿瘤的治疗，但是在HCC患者中反应不佳。来自天津医科大学的尹海芳教授团队研究发现，肿瘤细胞来源的外泌体（TEXs），带有大量肝癌抗原，能够在体外和体内引起比细胞裂解物更强的免疫应答。图：肿瘤来源的... 阅200 转1 评0 公众公开 16-03-23 15:11 |
3‘RACE实验好不好做。分子生物学新手，实验方案里计划通过3’RACE实验验证基因是否表达以及查找表达的基因。看文献里面也是通过这种方法做的，但是今天去找导师，听说之前有位师姐做3‘RACE做了好几年到毕业也没做出来。实验室之前没有人做过ＲＡＣＥ，我自己也没有分子生物学背景，担心在实验技术层面出问题。在此请教各位做过ＲＡＣＥ的前辈... 阅282 转0 评0 公众公开 16-03-11 16:50 |
RACE技术的原理和操作。利用mRNA的3''末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA.然后用一个基因特异引物GSP1（gene specific primer，GSP）作为上游引物，用一个含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为下游引物，以c... 阅3620 转18 评0 公众公开 16-03-11 16:49 |
教你怎么做miRNA靶基因验证（实验篇）又方便又有高认可度的miRNA靶基因验证实验就是双荧光素酶报告基因实验啦。双荧光素酶报告基因实验是通过将预测能够与miRNA结合的靶基因3’UTR序列插入载体中萤火虫荧光蛋白（firefly luciferase）的3’UTR。我们再来用学术语句描述一下：miRNA通过和靶基因结合后抑制靶基因的翻译，从而导致萤火虫荧光素发... 阅23642 转267 评0 公众公开 16-03-07 20:35 |
