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伤口愈合/细胞划痕实验新方法-如何划出笔直均一的划痕。细胞在培养皿内贴壁后,使用移液枪的枪头在贴壁细胞的中间划过,人为造成一道伤口(划痕),之后定时测量划痕的宽度,进而得到伤口愈合的细胞迁移数据。●24小时后对细胞前一天种的细胞做镜检。●采用ibidi伤口愈合分析软件,统计细胞的覆盖面积,做出曲线图,可以看到在大约11个小时的...
首先加入预热的胰酶消化细胞,显微镜下观察细胞脱离培养皿形成单个或者团状的细胞,加入培养基终止消化反应。由于机械划痕时会对边缘的细胞造成损伤,可以选择购买划痕插件,即避免细胞损伤又能保证细胞宽度相同。(1)实验原理:利用一层膜(基质胶)将高营养的培养液和低营养的培养液隔开,细胞放在低营养的培养液里,为了寻找营养,细胞会往...
formazan 结晶的生成量仅与活细胞数目成正比(死细胞中琥珀酸脱氢酶消失,不能将 MTT 还原,无法形成结晶),且该结晶溶解于 DMSO。接种细胞:用含 10% 胎牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔合适的细胞数量接种到 96 孔板,每孔体积 180 ul。加入 DMSO 溶解后,我喜欢将加入 DMSO 的 96 孔板放入 37 ℃ 孵箱内孵育 10~20 min,这样有助于...
实验指南|一文掌握Annexin V-FITC/PI细胞凋亡实验方法一、技术原理。三、使用方法1悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,,2000...
科研小白血泪之细胞划痕实验经验总结。我为什么会选择做细胞划痕实验?2)适合研究细胞与胞外基质(ECM)、细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。2)待细胞铺满后,用200ul枪头垂直于孔板和线制造细胞划痕,尽量保证各个划痕宽度一致, 人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性,影响实验结果,这也是该方法最大的缺陷,有条件的同学可以选...
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