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MTT经验总结MTT经验总结。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。细胞密度要根据不同细胞的特点来定.如果你做的药品对细胞具有刺激作用那么取小点的细胞浓度，如果你做的药品对细胞具有抑制作用那么取大点的细胞浓度，这样与对照的区别更明显，数据更好。加入MTT个人认为MTT最关键的是你的细胞数目和你加入真正起作用的的MTT的适当比例，具体细胞数... 阅1 转自schistoso... 公众公开 18-05-13 16:33 |
蛋白印迹（Western blotting，WB）（一） 蛋白样品的制备。对于某些特定的亚细胞组份蛋白，例如细胞核蛋白、细胞浆蛋白、线粒体蛋白等，可以参考相关文献提取这些亚细胞组份蛋白，也可以使用试剂盒进行抽提。转膜时，具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间... 阅1 转自schistoso... 公众公开 18-05-13 16:33 |
实验流程：1）查找相关基因启动子区域 2）预测启动子可能的结合位点（如果需要进行截断载体构建）3）设计启动子引物（特别重要，一对好的引物能让你快速的扩增出你需要的DNA片段，如果引物不好，无法扩增出目的片段，后面操作无从谈起）4）选择合适的载体（我常用的是PGL3-basic、Pmir-GLO等）5)选择合适的限制性酶切位点并加入引物5端，然后合... 阅3079 转21 评0 公众公开 18-05-13 16:24 |
