共 19 篇文章 |
|
如何制备血清减量或无血清培养基?目前,人们普遍认可单一类型细胞的最合乎生理的培养基是添加了蛋白质的、并且含有适当浓度的各种成分以及细胞外基质组分的限定培养基。凭经验先选用特别适合某种细胞生长的培养基,减少未限定培养基成分的浓度,直至细胞增殖能力降低,但活力仍较高。优化培养基中的生长因子、激素、转运蛋白及黏附因子等添加... 阅19 转0 评0 公众公开 22-04-11 13:48 |
如何制备含血清的培养基?许多细胞类型,尤其是成纤维细胞和转化细胞,其生存和增殖都要在基础培养基中添加5%~20% (v/v) 的血清。此外,培养基还可有选择性地对抗某些类型细胞的增殖。除了正处于修复的细胞外,添加血清成分的培养基并不真正接近于细胞的生理环境。基础营养培养基,如DMEM.2.加一定量HEPES 溶液,在终体积培养基中为15mmol/L 。... 阅43 转1 评0 公众公开 22-04-08 09:39 |
如何制备血清减量或无血清培养基?目前,人们普遍认可单一类型细胞的最合乎生理的培养基是添加了蛋白质的、并且含有适当浓度的各种成分以及细胞外基质组分的限定培养基。凭经验先选用特别适合某种细胞生长的培养基,减少未限定培养基成分的浓度,直至细胞增殖能力降低,但活力仍较高。优化培养基中的生长因子、激素、转运蛋白及黏附因子等添加... 阅11 转0 评0 公众公开 22-03-22 10:06 |
选择组织块还是消化液培养法?一要用酶制剂(最常用的是胰蛋白酶)处理组织块,除去细胞间质,使细胞相互分离,形成细胞悬液;(1) 用何种酶进行消化可视所培养细胞而定,除胰蛋白酶外,常用1 型胶原酶消化睾丸支持细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞;(3) 严格地说,原代培养是指未经传代的细胞,但在实际工作中,人们常将10 代以内的细胞用作... 阅87 转0 评0 公众公开 22-03-17 09:33 |
细胞培养的无菌技术。无菌技术在理论上是很简单的:阻止无菌的、未被污染的物质或物品与任何有菌的、被污染的物体相接触。70 %乙醇或其他适当的消毒剂。待乙醇自然挥发后,持器械在喷灯火焰上通过,去除残留的乙醇。彻底清洁层流式超净台的工作面,用70 %乙醇或其他消毒剂对工作台面及左右两侧进行消毒。使用垂直式层流超净台应注意:4b. 提... 阅14 转1 评0 公众公开 22-03-11 09:34 |
细胞培养液可不止血清、抗生素、平衡盐溶液,还有...一种细胞生长因子常常是多种细胞的丝裂原,如碱性FGF, 不仅是成纤维细胞的丝裂原,还是内皮细胞、角质细胞、黑素瘤细胞的丝裂原。EGF 可促进上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞及平滑肌细胞等多种细胞的增殖。现在已有多种特定细胞培养液,且有商品供应,如血管内皮细胞培养液、神经干细胞培养... 阅31 转0 评0 公众公开 22-02-25 13:20 |
实验室小白篇:细胞培养用的液体。一种细胞生长因子常常是多种细胞的丝裂原,如碱性FGF, 不仅是成纤维细胞的丝裂原,还是内皮细胞、角质细胞、黑素瘤细胞的丝裂原。EGF 可促进上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞及平滑肌细胞等多种细胞的增殖。现在已有多种特定细胞培养液,且有商品供应,如血管内皮细胞培养液、神经干细胞培养液、骨髓干细胞培养... 阅429 转3 评0 公众公开 22-01-25 09:51 |
原代细胞的分离培养。一要用酶制剂(最常用的是胰蛋白酶)处理组织块,除去细胞间质,使细胞相互分离,形成细胞悬液;(1) 用何种酶进行消化可视所培养细胞而定,除胰蛋白酶外,常用1 型胶原酶消化睾丸支持细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞;(3) 严格地说,原代培养是指未经传代的细胞,但在实际工作中,人们常将10 代以内的细胞用作原代培养... 阅66 转0 评0 公众公开 22-01-18 09:28 |
悬浮好的细胞(既可以是悬浮生长的细胞,也可以是胰蛋白酶处理的贴壁生长的细胞),确认贴壁生长的细胞已经充分游离成单细胞(见图1) ,涡旋培养瓶后取代表性样本。图2 使用血球计数计(改进型)进行细胞计数,细胞计数计中央网格的两侧格室都要铺满细胞a 用10 X 的物镜观察(总放大倍数为100), 1 mm2 的格子可以完全出现在视野内。计算1 mm2 ... 阅267 转0 评0 公众公开 22-01-12 09:26 |
由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。放入二甲苯和石蜡各半的混合液15min,再放入石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ透蜡各50-60分钟。包埋时,用镊子夹取石蜡模子(金属质地)在酒精灯上稍加热,放在平的桌面上,从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯,倒入少许石蜡。之后,石蜡切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各5min,然... 阅93 转1 评0 公众公开 21-12-14 13:27 |