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灭菌方法

 彩云追竹 2010-05-31

灭菌sterilization)指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。

消毒disinfection  指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。

防腐antisepsis  阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。

       无菌asepsis)指没有活的微生物的状态。经过灭菌的物品是无菌的。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法,称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。

物理因素:

.温度对微生物的影响

干热灭菌法

方法

原理

用途

火焰灭菌法

火焰直接烧灼,如接种环

 

热空气灭菌法

灭菌温度需160℃维持2 h

高温下不损坏、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌

湿热灭菌法

煮沸灭菌

煮沸1020 min可杀死所有细菌的繁殖 体,芽胞常需煮沸12 h才被杀死

用于饮水、一般器械,如刀剪的消毒。

巴氏消毒法

以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物,而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒法

 

高压蒸汽灭菌法

121.3℃温度下维持1520min;应用此法灭菌,一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气

用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等

.  

非电离

辐射

可见光

波长400800nm,可见光线对微生物一般无多大影响,但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖

 

阳光

直射日光有强烈的杀菌作用,是天然的杀菌因素。

许多微生物在直射日光的照射下,半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多,往往需经20h才死亡。

紫外线

波长200-300nm部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外线杀菌灯紫外线波长为253.7nm

常用于微生物实验室、无菌室、手术室等的空气消毒,或用于不能用高温或化学药品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种;对人体皮肤、眼睛有损伤作用,使用时应注意防护

电离辐射

X射线

 

热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面; 忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面; 食品消毒可以 不破坏营养成分

. 其他方法:

 

微生物在干燥的环境中失去大量水分,新陈代谢便会发生障碍,甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。

主要用于菌种和食品的保藏。

超声波

频率在20 000200 000 Hz的声波称为超声波

主要用于裂解细胞,提取细胞组分

 

从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。所需时间短、加热均匀

主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿,金属器皿忌用

 

通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌L型等小颗粒

主要用于不耐高温的营养液、血清、抗菌素、空气等除菌

 

 

化学消毒剂

名称

常用浓度

原理

用途

酚类

石炭酸:2%-5 %

来苏:2%

高浓度使菌体蛋白凝固,低浓度破坏细菌的细胞膜,使胞质内容物渗出

地面、器具表面和皮肤的消毒

醇类

乙醇70%-75%

损伤细胞膜,使菌体蛋白变性, 灭活酶类

主要用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡

重金属盐类

1%硝酸银

2%红汞

0.05-0.01%升汞

使细菌发生变性和沉淀;

使细菌的酶活性丧失

 

11%硝酸银新生儿滴眼,预防淋球菌感染

22%红汞用于皮肤、粘膜和小创伤的消毒

30.05-0.01%升汞,非金属器皿的消毒

氧化剂

0.1%高锰酸钾

3%过氧化氢

2%-2.5%碘酒

0.2ppm-0.5ppm

10%-20%漂白粉

靠氧化作用,灭活酶类

     使蛋白质变性

 

10.1%高锰酸钾,皮肤、尿道、水果等

23%过氧化氢,创伤、皮肤粘膜消毒

32%-2.5%碘酒, 皮肤消毒   

40.2ppm-0.5ppm,饮水和游泳池消毒

510%-20%漂白粉,地面、厕所与排泄物消毒

表面活性剂

新洁尔灭、杜灭芬

损伤细胞

  灭活酶类

  蛋白质沉淀

10.05%-0.1%新洁尔灭,皮肤粘膜消毒、浸泡手术器械

20.05%-0.1%杜灭芬,伤口冲洗,金属器械、塑料、橡皮类消毒

烷化剂

缺点:对人体有一定的毒性,且有的有致癌作用,如β-内脂

 

   使菌体蛋白和核酸的烷基化

 

110%甲醛,物品表面、空气消毒        

2 2%戊二醛 ,精密仪器、内窥镜等消毒







 

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