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第一节消毒灭菌的常用术语 1、灭菌：杀灭生物体上所有微生物的方法，包括杀死细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。 2、消毒：杀死物体上或环境中的病原微生物，并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。消毒剂 3、防腐：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。防腐剂 4、清洁：指除去尘埃和一切污秽来减少微生物数量的过程。 5、无菌：无菌即不存在活菌，多是灭菌的结果。无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。 第二节消毒灭菌的方法 一、物理消毒灭菌法 热力、辐射、滤过、干燥和低温等。 ㈠热力灭菌法 繁殖体经55~60℃作用30~60分钟死亡，100℃立即死亡；芽胞煮沸3~5小时死亡。分为干热灭菌和湿热灭菌 1、干热灭菌法： 一般细菌繁殖体在干燥状态下，80-100℃经1小时可被杀死，芽胞则需要更高温度才能被杀死。 ①焚烧：焚烧炉内焚烧或直接点燃，用于废弃物、尸体 ②灼烧：用火苗灭菌，用于接种环、试管口 ③干烤：150~180℃加热2~4h灭菌，适用于耐高温物品 ④红外线：1~10μm波长的电磁波，用于医疗器械灭菌 2、湿热灭菌法： 最常用，在相同温度下湿热灭菌法比干热灭菌法效果更好，因为：①湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性；②湿热的穿透力比干热大；③湿热的蒸汽有潜热效应存在。 ①巴氏消毒法：用较低的温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法（61.1-62.8 ℃ 30min 或71.7℃15-30s，主要用于牛乳消毒和酒类）。 ②煮沸消毒法：100 ℃，一般细菌繁殖体5min能被杀死。食具、注射器等消毒 ③流动蒸汽消毒法：100 ℃细菌繁殖体15~30分钟可被杀灭，不能消灭全部细菌芽胞 ④间歇蒸汽灭菌法：100 ℃ 5-30min，杀死其中繁殖体，取出放进37 ℃孵箱过夜，芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，重复3次。 ⑤高压蒸汽灭菌法： *密闭耐高压蒸锅中，压力103.4KPa，温度121.3 ℃，时间15-20min，杀灭包括芽孢在内所有微生物。是一种灭菌效果最好的方法，适用于所有耐高温、高压、耐湿的物品。 ㈡辐射杀菌法： ①紫外线：波长240—300nm的紫外线具有杀菌作用，机理是干扰细菌DNA合成。手术室空气消毒或用于耐热物品表面消毒。 特点：空气穿透能力强；固体穿透能力弱；对机体组织有损伤。 ②电离辐射：高速电子、X射线、γ射线 ③微波：可穿透玻璃、陶瓷、薄膜等，不能穿透金属表面。 ㈢滤过杀菌法： 用物理阻留的方法除去微生物以达到无菌目的。 液体除菌用滤菌器，用于不耐高温的血清、毒素、抗生素的除菌。 空气除菌用空气过滤器 二、化学消毒灭菌法 原理： ⑴破坏菌体蛋白； ⑵干扰细菌的酶系统和代谢； ⑶改变细胞膜的通透性。 化学消毒剂分为高效、中效、低效消毒剂3种。
第四节影响消毒灭菌效果的因素 微生物对消毒灭菌的敏感性高低排序大致如下：真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞。 D值指在一定条件下灭活90﹪最初的微生物群体所需的时间。 第五节病原微生物实验室生物安全 一、病原微生物的分类 第一类：能够引起人类或动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或已经宣布消灭的微生物。 第二类：能够引起人类或动物严重疾病，比较容易直接或间接在人与人、动物与动物、动物与人间传播的微生物。 第三类：能够引起人类或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病并且具备有效治疗和预防措施的微生物。 第四类：通常情况下不会引起人类或动物疾病的微生物。 第一、二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。 二、病原微生物实验室的分级： 根据生物安全防护水平（BSL）及实验室生物安全国家标准 一级： 二级： 三级：对人体、植物、动物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动物植物或环境具有高度危险的致病因子。通常有预防治疗措施。 四级：对人体、植物、动物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗措施。
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