中草药免疫增强剂在养猪业上的应用研究进展

近年来随着我国养猪业的迅速发展和集约化程度的提高，国内外畜禽贸易日益频繁，疾病传播机会增加，传染病频繁流行，多种病原混合感染，免疫抑制性疾病危害加大，造成疫苗免疫效果不佳，严重影响了养猪业的发展。免疫增强剂因具有提高机体免疫系统功能、增强机体抗病能力、减少疾病发生等特点，近年来引起了人们的普遍关注和重视，研制出了多种免疫增强剂应用于畜禽生产。化学药物免疫增强剂存在毒副作用和药物残留弊端，而中草药免疫增强剂对机体具有双向调节作用，无毒副作用和药物残留，因此成为近年来十分活跃的研究领域。

　　1 中草药免疫增强剂的作用机理

　　1.1 对免疫器官的促进作用

　　免疫器官是动物机体发挥免疫功能的组织机构，发育状况直接影响机体免疫力的的高低。猪免疫器官主要由中枢免疫器官胸腺和外周免疫器官脾脏及淋巴组织等组成。一般认为免疫器官质量降低为免疫功能下降所致，而质量增加则为免疫功能增强的表现。中草药免疫增强剂能促进胸腺和脾脏的生长，使胸腺和脾脏增重、延缓衰老，从而达到提高机体免疫力的作用。李先荣等(1989)从黄芪根中提取的多糖制成的粉针具有显著的免疫增强作用，能显著增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能，促进血清溶血素的形成，提高空斑形成细胞的溶血能力和明显的碳粒廓清作用以及显著增加脾重;这些作用在正常的生理状态下存在，在机体免疫力低下时同样显示明显作用。梁华平等(1994)研究发现，烧伤后6d的小鼠脾脏指数和胸腺指数降低，经腹腔注射250mg/kg体重黄芪多糖，每天一次，连续5d，不仅可以明显提高正常小鼠的脾脏指数和胸腺指数，还可使烧伤小鼠的脾脏指数和胸腺指数恢复正常。彭远羲等(1995)用中草药仔猪白痢散(由黄芪、白术等组成)注射液0.1ml/只腹腔注射小白鼠，每天一次，连续7d，结果药物组脾脏系数明显大于注射生理盐水的对照组，说明仔猪白痢散可促进脾脏细胞增生，具有增加脾重的作用，这也许是该制剂提高机体免疫功能的途径之一。王莉等(1999)用芦荟多糖进行的小鼠体内试验和大鼠体外试验结果表明，芦荟多糖可促进小鼠免疫器官胸腺和脾脏的增长，显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分数和吞噬指数。近年来免疫增强剂对鸡免疫器官的影响研究报道较多，但对猪免疫器官的影响研究报道较少，刘惠等(2007)测定发现，中草药(白术、黄柏、党参、苍术、陈皮、山楂、马齿苋)多糖能提高断奶仔猪增重和免疫器官(腹股沟淋巴结、肝脏、脾脏、肾脏及胸腺)指数，复合多糖对断奶仔猪生长性能和免疫器官指数的提高均优于单一多糖和抗生素，且以在饲粮中添加0.6%和0.9%的中草药复合多糖效果较好。

1.2对非特异性免疫的增强作用

　　非特异性免疫主要是机体单核巨噬细胞系统的各种巨噬细胞产生的非针对特定病原体的防御技能。中草药免疫增强剂能刺激单核巨噬细胞系统，增强机体吞噬异物的能力。方维焕(1991)发现，金银花、蜂胶注射液以及蒲公英、紫花地丁口服液均能显著增强小鼠白细胞吞噬功能，尤以紫花地丁的作用更为显著，吞噬率比对照组提高26%。马兴铭等(2000)发现，枸杞多糖、猪苓多糖、茯苓多糖、灵芝多糖、黄芪多糖、当归多糖均能促进小鼠腹腔巨噬细胞对鸡血红细胞的吞噬作用，尤其枸杞多糖能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数;表明6味中药多糖均能显著加强巨噬细胞的功能、提高细胞免疫力，枸杞多糖增强巨噬细胞的功能的作用明显优于其它中药多糖。许杜娟等(2003)检测发现，黄芪多糖能促进正常小鼠脾脏细胞增殖反应，对亚适量ConA(刀豆蛋白A)和LPS(脂多糖)诱导脾脏细胞增殖反应也有显著促进作用，对脾细胞干扰素γ和腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α产生有显著促进作用。方桂友等(2006)在仔猪饲粮中添加中草药免疫增强剂，其日增重比对照组提高19.87%(P<0.05),血清总蛋白含量增加了17.60%(P<0.05)，说明中草药免疫增强剂能该善仔猪的生长性能、提高饲料利用率，增加血清中总蛋白、白蛋白的含量，促进免疫球蛋白(IgG、IgM)的生产，增强小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。黄志坚等(2007)在断奶仔猪基础饲粮中添加精制中草药饲料添加剂(由绞股蓝、茵陈、板蓝根和甘草4味中药组成方剂一，由刺五加、茵陈、板蓝根、牛滕、和甘草5味中药组成方剂二，提取浓缩过滤制成浸膏)，能明显改善断奶仔猪的生产性能，血清中总蛋白、白蛋白和免疫球蛋白IgA、IgM、IgG及补体C3、C4的含量，白细胞介素-2、干扰素-γ的含量等均显著提高;CD3、CD4、CD8含量均无显著变化，但CD4于CD8比值差异极显著。尹富贵等(2007)饲喂添加0.2%中草药复方(北黄芪、炒白术、茯苓、炒山楂、炒麦芽、炒神曲、菟丝子、淮山药和党参等)的饲粮能显著提高断奶仔猪外周血白细胞、中性粒细胞淋巴细胞、单核细胞计数及超氧化物歧化酶活性、中性粒细胞、单核细胞百分率，显著降低丙二醛和一氧化氮含量;提示所用中草药复方可显著增强断奶仔猪的免疫功能、减轻炎性反应及断奶应激造成的损伤，其抗应激效果优于黏杆菌素。周淑兰等(2008)用精制芦荟多糖以不同剂量连续多次给小白鼠后腿肌肉注射后，高剂量(每只每天4mg)芦荟多糖能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数(P<0.01)，而低剂量组(每只每天2mg)对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数没有影响，表明高剂量芦荟多糖能明显提高单核巨噬细胞的功能，从而增强机体免疫功能;同时也对雄性的睾丸等生殖腺有明显的抑制作用。

1.3对特异性免疫的增强作用

　　特异性免疫是指有淋巴细胞参与的针对特定病原体的免疫反应，包括T淋巴细胞参与的细胞免疫和B淋巴细胞参与的体液免疫。

　　1.3.1对体液的免疫增强作用 体液免疫是由B淋巴细胞介导的一种重要免疫反应，抗体效价的高低直接反映机体的体液免疫状态。中草药免疫增强剂能够促进抗体的产生，延缓抗体的下降或消失。陆纲(1997)用90mg和30mg玉米花粉多糖水溶液直接稀释猪瘟疫苗，在18-20日龄仔猪首免时一次给与，首免后7d血清抗体OD值高剂量组、对照组与低剂量组之间差异显著;14d高剂量组、低剂量组均高于对照组;35d时低剂量组明显高于高剂量组和对照组;结果提示玉米花粉多糖(30mg)对猪瘟弱毒疫苗的免疫预防有良好的增强作用。陈小波等 (2002)对生长肥育猪分别添加中药(黄芪、当归、白芍、茯苓、贯众、使君子、蛋黄、甘草、柴胡有效成分提取物)、中药(成分同上述药物)+西药(阿散酸、肝菌泰锌、金霉素或喹乙醇)，结果显著提高了不同阶段猪血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量，提示中草药添加剂不仅能促进生长肥育猪免疫球蛋白的生成，而且还能促进补体的 生成，从而改善了机体的体液免疫功能。刘弟书等(2003)对断奶仔猪进行中药“水肿灵散”饲养试验，结果0-10d、10-20d阶段，实验组的IgG分别提高了15.62%(P<0.05)、15.68% (P<0.01);IgA分别提高了17.08%(P<0.05)、15.11%(P<0.05);IgM分别提高了22.76%(P<0.01)、5.85%(P<0.05);C3水平分别提高了14.29%(P<0.05)、15.94%(P<0.05);C4水平分别提高了5.95%(P>0.05)、6.49%(P>0.05);表明 “水肿灵散”不仅能促进断奶仔猪免疫球蛋白的生成，而且还能促进补体的生成，继而通过改善机体的体液免疫功能达到防治仔猪水肿病的目的。江和基等(2006)在饲料中添加0.8%精制玉屏风散，仔猪的日增重、补体(C3、C4)和免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量均比其它组有显著提高，血清中淋巴细胞阳性率、白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ含量、T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)数量均比对照组显著提高，而CD4/CD8值有极显著提高，表明玉屏风散在一定程度上可以改善仔猪的生产性能，提高机体的免疫功能，是一个较为理想的免疫增强剂。

1.3.2对细胞免疫的增强作用 细胞免疫主要是由T淋巴细胞介导的，E-玫瑰花环试验和ANAE阳性率试验能检测外周血液中T淋巴细胞百分数，敏感的反映机体性能免疫水平和动态变化。中草药免疫增强剂能够促进淋巴细胞增殖、分化，促进细胞因子的分泌，提高T淋巴细胞百分率、E-玫瑰花环形成率及外周血淋巴细胞或脾脏细胞对植物血凝素、刀豆蛋白A或脂多糖等丝裂原刺激的转化能力。谢明权等(2000)采用胸腺素、黄芪多糖、人胎盘组织液、人重组白细胞介素-2(Ril-2)及左旋咪唑，以不同浓度促进体外培养不同时间的猪外周血单个核细胞(PBMC)，证明这几种佐剂均对猪PBMC有明显刺激作用，且与浓度有依赖关系，浓度过高时对其有抑制作用，适宜的浓度为104倍稀释度。王自然(2006)给仔猪注射猪瘟疫苗同时，以1%中药免疫增强剂(由黄芪、党参、何首乌、淫羊藿、女贞子、白术、白芍、五味子当归、鹿角胶、麦冬11味中草药组成)混饲，实验组猪瘟血清抗体效价显著高于对照组，而且实验组抗体生成快。持续时间长;接种疫苗后15、45d，实验组T淋巴细胞百分率显著高于对照组;表明中药免疫增强剂具有促进T淋巴细胞增殖和加强细胞免疫功能的作用，从而机体的细胞免疫水平。张红英等(2007)以板蓝根多糖作为免疫增强剂联合猪蓝耳病(PRRS)灭活疫苗免疫仔猪，检测结果表明板蓝根多糖你显著提高仔猪的CD3+、CD8+淋巴细胞的百分数和特异性抗体滴度。赵现敏等(2007)用MTT比色法比较不同浓度的板蓝根多糖、牛膝多糖、山药多糖和黄芪多糖四种中药多糖对猪脾脏淋巴细胞增殖的影响，结果表明均能显著刺激ConA或LPS诱导的猪脾淋巴细胞增殖，且4种多糖促进猪脾脏淋巴细胞增殖的作用与多糖浓度有关。杨秀娟等(2008)在饲粮中添加适量的复方中药制剂四君汤加味，能显著提高仔猪血清IL-2水平、小肠黏膜上皮间淋巴细胞和杯状细胞数量，提高仔猪的免疫力，缓解断奶的应激。

　　2 中草药免疫增强剂在养猪业上的研究与应用

　　冯昌荣(1987)用中药免疫促进剂“玉屏风散加味”煎煮或研末拌料喂仔猪和母猪试治仔猪白痢，167头病猪服药后2.5d内全部治愈。郑旭升等(1993)通过PPA-ELISA检测技术，证明党参、黄芪、白术、五味子、麦冬、淫羊藿、沙参等中药具有提高猪瘟免疫抗体OD值的作用，而且可延长抗体的存留时间。马玉芳等(2003)在基础饲粮中添加2种补体的精制中药饲料添加剂均能有效地防止保育阶段的仔猪发生腹泻，改善其生长性能，并能促进免疫球蛋白(IgA 、IgM、IgG)、补体(C3、C4)和白细胞介素-2的生成，增强机体免疫功能。边传周等(2005)在断奶仔猪饲粮中添加黄芪多糖，在断奶后第7、14天淋巴细胞百分数分别增加7.7%(P>0.05)、18.2%(P>0.05);中性粒细胞百分数分别减少了15.2%(P>0.05)、28.6%(P>0.05);断奶仔猪的SRBC抗体效价(猪抗绵羊红细胞抗体效价分别提高0.47、1.49(P<0.05)个滴度;单核细胞增殖率分别提高11%(P>0.05)、25%(p<0.05);腹泻率显著低于28日龄断奶仔猪。张素梅等(2006)在断奶仔猪饲粮中分别添加1%黄芪散剂及0.8%、1.0%和1.2%黄芪颗粒剂饲喂，对仔猪的生长性能及免疫功能均有不同程度的增强作用，免疫口蹄疫灭活苗后27d抗体水平显著高于对照组，料重比较对照组小。刘莉等(2007)在仔猪饲粮中添加复方中草药制剂(党参、炒白术、茯苓、甘草、黄芪等四君子汤味)，能显著提高仔猪白细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率、血清免疫球蛋白含量和抗氧化酶活性，提高仔猪免疫力，减轻断奶应激。张红英等(2008)将板蓝根多糖分别以高、低两个剂量和猪PRRS弱毒苗同时注射35日龄断奶仔猪，，7d后板蓝根多糖高剂量组即可检测到PRRS免疫抗体，而其它组在免疫后14d，均可检测到PRRS免疫抗体;板蓝根多糖对PRRS弱毒苗产生影响是和剂量密切相关的，高剂量能提高抗体水平，低剂量会阻碍PRRS抗体的产生。把板蓝根多糖和PRRS弱毒苗联合使用对猪外周血CD3+CD4+细胞数量的影响不显著，在早期可促进猪外周血CD8+细胞的增殖。合适剂量的板蓝根多糖可以作为免疫增强剂和PRRS弱毒苗联合使用。萧琛文等(2008)发现在仔猪母源抗体较低时，注射口蹄疫疫苗后，抗体水平普遍升高;在疫苗中加入中药木鳖子提取物后，抗体的升高幅度加大，使抗体合格率至少增加10%。邵珊等(2009)以黄芪多糖和白花蛇草多糖作为免疫增强剂联合高致病性猪蓝耳病灭活疫苗免疫26日龄断奶仔猪，与生理盐水组比较，黄芪多糖和白花蛇草多糖均能极显著促进外周血淋巴细胞的增殖，使抗体提早产生并提高抗体滴度和IL-2表达水平;因此黄芪多糖和白花蛇草多糖能增强猪对高致病性猪蓝耳病灭活疫苗的免疫应答能力。

　　综上所述，中草药免疫增强剂在养猪业上具有广阔的应用前景，应该结合利用显得高新技术，从中草药中分离、提取有效成份以及筛选配伍合理的复方制剂，在整体水平、细胞水平及分子水平上，探讨单个中草药成份和多成份制剂的作用机理，研制出高效、稳定、无毒的中草药免疫增强剂，为实现绿色养猪业提供保障。