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课题1 DNA的粗提取与鉴定教学设计
生物1 选修 生物技术实践 专题5 DNA和蛋白质技术
课题1 DNA的粗提取与鉴定教学设计 教学分析：DNA的粗提取与鉴定，特别是DNA的粗提取涉及试剂种类多，步骤复杂繁多，不容易成功，为了降低难度，提高效率，提高学生实验的成功率，关于本实验我打算用三个环节这样程序来突破难点，实现教学目标， 具体是，其一.与学生一起来探讨分析原理,设计实验步骤; 其二.观看规范的本实验操作的视频; 其三.由学生亲自操作,完成DNA的粗提取与鉴定.下面介绍关于本实验教学设计. DNA的粗提取与鉴定 教学设计 一、实验目的： 1. 理解DNA粗提取与鉴定的原理. 2.通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。 3.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法 二、实验原理 提取原理：DNA主要存在于动植物(鸟类血液的红细胞、新鲜菜花、蒜黄和菠菜等)细胞的细胞核内，且往往与蛋白质结合形成染色质。首先，利用DNA在NaC1溶液中的溶解度具有二重性和蛋白质的盐溶现象，当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低,析出DNA，并分离出蛋白质；其次，利用DNA不溶于酒精，但细胞中其他物质(某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质)可溶于酒精的特点进一步提取较纯净的DNA；最后，利用DNA遇二苯胺试剂呈蓝色的特异性显色反应鉴定提取DNA。 鉴定原理：DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成戊糖，它再和二苯胺起反应而显现蓝色。 三.实验材料: 要选最容易获取又满足实验要求的实验材料: 鸡血细胞液 四、实验步骤： 制备鸡血细胞液→ 提取鸡血细胞的细胞核物质→ 溶解细胞核内的DNA→ 析出含DNA的黏稠物→ 滤取含DNA的黏稠物→ 将DNA的黏稠物再溶解→ 过滤含有DNA的氯化钠溶液→ 提取含杂质较少的DNA→ DNA的鉴定 五、思考 1．能否选用牛、羊、马血做实验材料？为什么？ 不能。因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数DNA，在实验中很难提取到。 2．为什么要设置对照组？实验中能观察到什么现象？ 确定二苯胺不与氯化钠发生颜色反应；实验组试管中可看到溶液变蓝色。 六.归纳总结 (一)提取DNA的思路与环节 1.选适宜的材料 DNA主要在染色体上，所以选动植物细胞，(植物细胞需要加洗涤济和食盐研磨),而动物细胞没有细胞壁更容易打破细胞结构，得到DNA 2.破坏细胞膜，核膜等细胞结构得到核物质 3.从核物质中将DNA与蛋白质等物质分开，得DNA 4.提纯，去掉DNA 中的杂质，进一步提纯DNA (二)用12345来巧实验要点 1次加冷酒精 2次加蒸馏水 3次过滤 4次调整NaCl溶液浓度 5种溶液(柠檬酸钠溶液,酒精溶液,二苯胺试剂,2mol∕L NaCl 溶液,0.015 mol∕L NaCl溶液) 6次搅拌 |
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