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1.植物的组织培养 2．血红蛋白的提取与分离。 3.从生物组织中提取某些特定成分。 4.实验：DNA的粗提取与鉴定。 一、菊花组织培养 1．植物组织培养的过程和原理 (1)原理：植物细胞的全能性。 (2)高度分化的细胞全能性表达的条件 ①离体状态。 ②营养物质：有机营养、无机营养。 ③植物激素：生长素、细胞分裂素等。 ④无菌、适宜的外界条件。 (3)过程 2.菊花组织培养过程 (1)影响植物组织培养的主要因素 ①选材：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 ②营养供应： 培养基：常用MS培养基 营养成分：大量元素、微量元素、有机物、植物激素 (2)实验操作过程 制备MS固体培养基：配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌 ↓ 外植体消毒：消毒→清洗→消毒→清洗 ↓ 接种：始终在酒精灯火焰旁进行，对接种工具要用火焰灼烧 灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意不要倒插 ↓ 培养与移栽：在18～22 ℃的无菌箱中培养，得到试管苗后 进行移栽 3．影响植物组织培养的主要因素 (1)培养材料 ①不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。 (2)无菌条件 培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡，因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。 二、月季的花药培养 1．被子植物的花粉发育过程 孢子母细胞)⇒四分体时期⇒单核期⇒双核期⇒花粉粒 2．产生花粉植株的两条途径
3．影响花药培养的因素 (1)主要因素：材料的选择和培养基的组成。 (2)月季花药培养一般选择单核期。 三、DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理
2．操作过程 材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织 ↓ 破碎细胞(以鸡血为例)：鸡血细胞，加蒸馏水，用玻璃棒搅 拌，用纱布过滤，收集滤液 ↓ 去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 ↓ DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液 ↓ DNA的鉴定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂， 沸水中加热5 min，溶液变成蓝色 易错警示！ (1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。 (2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。 (3)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。 四、PCR技术的基本操作和应用 1．PCR原理 DNA热变性原理，即：
2．PCR反应过程 (1)变性：当温度上升到90_℃以上时，双链DNA解旋为单链。 (2)复性：温度下降到55_℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 (3)延伸：温度上升到72 ℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 五、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理
2.血红蛋白的提取和分离过程 六、植物有效成分的提取 1．植物芳香油的提取 (1)提取玫瑰精油实验 ①方法：水蒸气蒸馏法。 ②实验流程 (2)提取橘皮精油的实验 ①方法：一般用压榨法。 ②实验流程 石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤 ↓ 橘皮油←再次过滤←静置 2．胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素的性质：不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。 (2)实验设计 ①方法：萃取法，石油醚最适宜作萃取剂。 ②实验流程 胡萝卜→粉碎→干燥→萃取 ↓ 胡萝卜素←浓缩←过滤 (3)鉴定方法：纸层析法。   一轮复习内容持续更新中…… |
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