用二龄蚕种植虫草方法及步骤
1.悬浮液的制作<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />
配方:葡萄糖20克(粉壮),黄豆粉10克,维生素B15片,硫酸镁0.4克,磷酸二氢钾3克,味精0.1克,食盐0.3克,水1000毫升。
(2)制法:按上面配方称好,放入锅中煮沸10分钟,然后将悬浮液倒入时筒或量杯中,如果不够1000毫升,加清水补足。沉淀10分钟后,把上面清液装入盐水瓶中(葡萄糖瓶)。装量为瓶体积的7/10瓶口用棉塞塞紧,注意:寄去的虫草一级母种可接4~5瓶悬浮液,故最少要装4瓶悬浮液。
(3)灭菌:
①用手提式小型高压灭菌锅灭菌,乡村只要有卫生院医院点,均有小高压来菌锅,可借用不必购买,把瓶放进小高压锅,把螺旋用力拧紧,为防止漏气,升温火力应逐渐加大,当气压表指针升到0.5公斤/平方厘米时,即可打开排气阀排出冷空气,待冷气放尽后, 压力表指针到零,再关上排气阀重新升温,当气压表指针达到1.5公斤/平方厘米时, 再保持40分钟,即灭菌完毕。把灭菌锅拿下火炉,让其自然冷却,待压力表指针到零时,打开放气阀排出残留蒸气,打开锅盖,取出灭菌的悬浮液瓶。
②用常压锅灭菌,用家里蒸馒头的锅也可,把瓶放在锅里,盖严盖子,等水开后,计算时间,8小时即灭菌彻底,也可每次灭菌3小时,第二次再灭菌3小时,第三次再灭菌2小时,总之需灭菌8小时。
(4)接种:按资料上无菌箱严格操作接种,首先把经过灭菌的4瓶悬浮液放入接种箱, 再放酒精灯、火柴、接种钩(用自行车条自制一个钩即可),寄去虫草母种,然后把高锰酸钾30克放入瓷碗或铁盒内,再将20克甲醛也倒入盛有高锰酸钾的容器内,迅速关闭接种箱门,几秒钟后,甲醛溶液即沸腾挥发。高锰酸钾是一种强化剂,当它与一部分甲醛作用时,由氧化反应产生的热可使其余的甲醛挥发为气体。灭菌40分钟即可。 这时, 把手用75%的酒精棉球擦一下,把手伸进接种箱,先点燃酒精灯,左手拿寄去的虫草母种,将试管口的棉塞在酒精灯火焰上烧一下灭菌(主要烧死棉塞上的杂菌),然后用右手指将棉塞拨出试管口,右手拿起接种钩在酒精灯火焰上通过两次,并立即将接种钩伸进试管内,取试管内的母种,只要试管斜面上的白色丝菌,少带一点斜面培养基也可迅速接入悬浮液中,接过种后,悬液瓶口棉塞必须再塞紧,每支母种可接4瓶县浮液。接种完毕, 可把四瓶悬浮液取出接种箱。
(5)培养:将接过种的悬浮液,放在黑暗处,在20~30℃温度下培养5~7天,见瓶内悬浮液表面布满白色菌丝,可用手握瓶体摇晃,使瓶内的菌丝与液体混合均匀。因培养基浮液大多数联营户是在自然温度下培养,不是在恒温箱中,悬浮液上部有虫草菌丝与悬浮液摇晃不开,这是正常现象,因虫草的生长是以分生孢子式,在摇晃时,悬浮液表层结块的虫草菌的孢子,就象花粉一样,肉眼看不到已进入悬浮液,栽培时①可以不用悬浮液表层结块的虫草菌,但必须是培养5~7天,摇晃过以后,栽培时,用消过毒的接种钩把悬浮液表层虫草菌块钩出,然后把悬浮液装入经消毒的喷雾器中,进行喷虫体。②栽培时在消过毒的室内,用消过毒的接种钩,把悬浮液表层结块的虫草菌搅拌成块状,栽培时一起洒入在虫体身上,但是悬浮液只是虫草菌的稀释,感染虫体均不如液体菌种,有条件的联营户,可用书后部的“发酵法栽培虫草:成功率高,但千万不要把悬浮液瓶口棉塞搞湿。以免感染杂菌,再培养5~7天再摇一次,即可作为栽培种喷虫体。