韩邦兴1，2， 朱志祥3， 姚勇4， 李媛媛2， 陈钧2*
(1. 植物细胞工程安徽省工程技术研究中心，安徽六安237012; 2. 江苏大学药学院，江镇江212013; 3.池州市食品药品监督管理局，安徽池州247000; 4. 宣城市金泉生态农业有限责任公司，安徽宣城242000)
关键词:太子参; 多糖; 氨基酸; 道地产区
中图分类号:R284. 1
文献标识码:B
文章编号:1001-1528(2010)03-0513-02
2010 年3 月第32 卷第3 期中成药
太子参为石竹科植物孩儿参Pesudostellaria heterophylla(Miq. ) Pax ex Pax et Hoffm. 的干燥块根，是常用补益中药，具有益气健脾、生津润肺之功效［1］，现代研究表明，太子参具有抗疲劳、抗缺氧、抗应激、抗衰老等药理作用［2-5］。近年来，随着市场需求逐渐增大，安徽、江苏、福建、贵州等地开始大面积栽培太子参［6］。研究并控制太子参药材的内在质量，建立便捷、准确、可靠的太子参质量评价方法，为临床提供道地药材尤为必要。本研究对五个产地太子参中多糖及氨基酸含量进行比较分析，结合太子参道地产区分布情况，探讨太子参多糖及氨基酸含量与地道产区的关系，为太子参道地药材质量评价提供参考。
1 仪器与试药
UV-2401 紫外分光光度计(日本岛津株式会社);葡萄糖与精氨酸均购于中国药品生物制品检定所;其余所有试剂均为分析纯;安徽太子参药材(宣城市金泉生态农业有限责任公司提供)，江苏太子参( 盐城市药饮片有限公司，批号20070905)，河南太子参( 宛西制药股份有限公司，批号20071101)，福建太子参( 亳洲市新城区十八里中药有限公司，070804)，贵州太子参( 安徽海鑫中药饮片有限公司，080217)，经江苏大学代剑平博士鉴定均为石竹科植物孩儿参Pesudostellaria heterophylla (Miq. ) Pax ex Pax et Hoffm. 的
块根。
2 方法与结果
2. 1 太子参多糖含量测定
2. 1. 1 标准曲线绘制配制0. 1 mg /mL 葡萄糖标准溶液。分别吸取0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0 mL 置10 mL 具塞试管中，依次加入蒸馏水使终体积为2. 0 mL，蒸馏水作空白对照，各管加入苯酚试液1. 0 mL，摇匀，再滴加浓硫酸各5 mL，沸水浴15 min，取出放至室温，于490 nm 处测定吸光度。以吸光度值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程:A= － 0. 03 + 12. 602C(r = 0. 991)。
2. 1. 2 样品溶液制备分别取太子参样品，粉碎过60 目筛，用8 倍水量90 ℃提取3 次，每次3 h，提取液浓缩至密度为1. 190，进行醇沉，终浓度为80%，沉淀水溶至密度为1. 065，再进行醇沉，终浓度为70%，沉淀冷冻干燥即得太子参粗多糖［7］。
2. 1. 3 样品测定同标准曲线绘制法测定不同产地太子参样品中多糖含量，结果见表1
从表1 可以看出，不同产地太子参多糖含量有较大差异，大致可以分类二大类，含量高于10% 的安徽、江苏、福建产太子参，含量低于10% 的河南、贵州产太子参。安徽产太子参多糖含量最高，而贵州产太子参含量最低。
2. 1. 4 精密度试验取0. 1 mg /mL 葡萄糖标准溶液1 mL，按标准曲线方法连续测定6 次吸光度并计算含量，RSD =1. 00%，结果表明仪器精密度试验符合要求。
2. 1. 5 稳定性试验取0. 1 mg /mL 葡萄糖标准溶液1 mL，按标准曲线方法分别在0，30，60，90，120，180 min 测定6 次吸光度并计算含量，RSD = 1. 10%，说明供试品溶液中多糖在3 h 内稳定。
2. 1. 6 重复性试验取同一产地6 份样品按2. 1. 2 项制备供试品液6 份，按标准曲线方法测定吸光度并计算含量，RSD = 1. 06%，结果表明该测定方法重复性良好。
2. 1. 7 加样回收试验取同一产地样品粉末(0. 025 g) 6份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密量取0. 1 mg /mL 葡萄糖标准溶液1. 00 mL，按样品溶液制备方法制备供试品溶液，按标准曲线方法测定吸光度并计算结果，平均回收率为99. 37%，RSD = 1. 83%。。
2. 2 太子参氨基酸含量测定
2. 2. 1 标准曲线绘制配制0. 5 mg /mL 精氨酸对照品溶液。精密吸取对照品溶液0. 40、0. 60、0. 80、1. 00、1. 20、1. 40mL 于10 mL 量瓶中，加水至同体积，依次加入醋酸-醋酸钠缓冲液( pH = 5. 4)1. 00 mL 和3% 茚三酮乙二醇溶液1. 00mL，沸水浴15 min，取出，加50% 异丙醇至刻度，摇匀，同法作一空白。在570 nm 处测定吸光度，以吸光度值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程:A = － 0. 179 +1. 264C(r = 0. 999)。
2. 2. 2 样品溶液制备取太子参粉末0. 05 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70%乙醇25 mL，称定重量，超声处理60 min，放冷，再称定重量，用70% 乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，收集续滤液，即得供试品溶液［8］。
2. 2. 3 样品测定同标准曲线绘制法测定不同产地太子参样品中氨基酸含量，结果见表2。
从表2 可以看出，不同产地太子参氨基酸含量有较大差异，亦大致可以分为二大类，含量高于5% 的安徽、江苏、福建产太子参，含量低于5%的河南、贵州产太子参。其中，江苏产太子参氨基酸含量最高，而河南产太子参氨基酸含量最低。
2. 2. 4 精密度试验取0. 5 mg /mL 精氨酸标准溶液1 mL，依次按标准曲线方法连续测定6 次吸光度并计算含量，RSD= 1. 51%，结果表明仪器精密度试验符合要求。
2. 2. 5 稳定性试验取0. 5 mg /mL 精氨酸标准溶液1 mL，分别在0，30，60，90，120，180 min 按标准曲线方法连续测定6 次吸光度，计算含量，RSD = 1. 38%，说明供试品溶液中氨基酸在3 h 内稳定。
2. 2. 6 重复性试验取同一产地6 份样品按2. 2. 2 项制备供试品液6 份，按标准曲线方法连续测定吸光度，计算含量，RSD = 2. 24%，结果表明该测定方法重复性良好。
2. 2. 7 加样回收试验取同一产地样品粉末(0. 025 g) 6份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密量取18. 10 mg /mL 精氨酸1. 00 mL，按样品溶液制备方法制备供试品溶液，按标准曲线方法测定吸光度并计算结果平均回收率为100. 84%，RSD = 1. 59%。
3 讨论
本文测定了不同产地太子参的多糖与氨基酸含量，多糖含量在8. 43% ～ 11. 87% 之间，总氨基酸含量在2. 29% ～5. 87%之间，与文献报道基本一致，说明本试验方法可靠。太子参多糖有抗应激、抗疲劳、增强免疫［2 ～ 5］作用，是太子参的有效成分之一，是太子参质量评价的重要指标。初步分析结果表明，安徽、江苏、福建产太子参多糖含量较高，河南与贵州产太子参多糖含量较低，这与太子参的地道产区分布在安徽、江苏和福建一致。太子参补益类功效可能与富含氨基酸有关［9］。因此，氨基酸含量也是评价太子参药材质量的重要指标之一。从实验结果看，以安徽、江苏、福建产太子参氨基酸含量较高，河南与贵州产太子参氨基酸含量较低，这与多糖含量的分析结果一致。河南与贵州产太子参多糖、氨基酸含量较低可能与非道地产区的生态环境等因素有关。综合试验结果与分析，太子参多糖与氨基酸含量高低与太子参道地产区的分布规律基本一致，且太子参多糖与氨基酸含量测定方法简单可靠，可以作为太子参道地药材质量评价方法和依据。
参考文献:
［1］ 中国药典［S］. 2005:46.
［2］ 龚祝南，戴岳，马辉，等. 8 个不同产地太子参对脾虚及免疫功能的影响［J］. 中药材，2001，21(10):281-282.
［3］ 刘维俊，黄光才，李汉宝，等. 太子参补益作用机理的探讨［J］. 南京部队医药，1992，5:51-58.
［4］ 王家葵，郑军，沉映君，等. 太子参总提物对环磷酰胺处理动物免疫功能和胸腺、脾脏核酸含量的影响［J］. 中药药理与临床，1996，12(6):16-18.
［5］ 刘训红，陈彬，王玉玺. 太子参总皂苷药理作用的初步研究［J］. 江苏药学临床研究，2000，8(3):6-8.
［6］ 林光美. 太子参研究进展［J］. 中国野生植物资源，2004，23(6):15-17.
［7］ 张陆军，丁怡，陈芸芸，等. 太子参多糖制备工艺研究［J］.中国中药杂志，2004，29(12):1201-1202.
［8］ 吴家红，靳凤云，龙开杰，等. 分光光度法测定板蓝根中总氨基酸［J］. 微量元素与健康研究，2006，23(5):45-46.
［9］ 刘训红，阚毓铭，喻向华，等. 江苏地产太子参中多糖、游离糖和氨基酸含量分析［J］. 南京中医学院学报，1993，9 (3):42-44.5142010 年3 月第32 卷第3 期中成药
