1.提取过程中，有机酸中的氢能将叶绿素中的镁置换出来，导致叶绿素被破坏。加碳酸钙的目的是为了中和酸。
2.叶绿体中的色素所处的环境具微碱性，实验中，由于研磨会使细胞结构遭到破坏，细胞液（具微酸性）流出，酸性的细胞液就会直接接触叶绿体中色素，致使叶绿素的分子结构遭到破坏，使叶绿素失镁，呈黄褐色，所以加入少许碳酸钙是为了中和细胞液的酸性，可起到保护叶绿素的作用
3.实验步骤
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步 骤 |
注 意 问 题 |
分 析 |
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1．提取色素
5克绿叶剪碎，放入研钵，加SiO2、CaCO3和5mL丙酮（或10mL无水乙醇）迅速、充分研磨。（若没有无水乙醇，也可用体积分数为95%的乙醇，但要加入适量的无水碳酸钠，除去水分） |
加SiO2
加CaCO3
加丙酮
迅速 |
加SiO2为了研磨得更充分。
加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。因为叶绿素含镁，可被细胞液中的有机酸产生的氢代替，形成去镁叶绿素，CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸，防止叶绿体被破坏。
叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。
减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性的丙酮挥发。 |
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2．收集滤液
漏斗基部放一单层尼龙布，研磨倒入漏斗内挤压，将滤液收集到小试管中，用棉花塞塞住试管口。 |
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尼龙布起过滤作用。
试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。 |
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3．制备滤纸条
将干燥的滤纸，顺着纸纹剪成长10cm，宽1cm的纸条，一端剪去二个角，并在距这一端1cm处划一铅笔线。 |
干燥
顺着纸纹剪成长条
一端剪去二个角 |
可吸收更多的滤液。
层析时，色素分离效果好。
可使层析液同时到达滤液细线。 |
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4．划滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线，干后重复三次。 |
滤液细线越细、越齐越好。
重复三次。 |
防止色素带之间部分重叠。
增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明显。 |
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5．纸层析法分离色素
将3mL层析液倒入烧杯中，将滤纸条（划线一端朝下）插入层析液中，用培养皿盖盖上烧杯。 |
层析液不能没及滤纸条。
烧杯要盖培养皿盖。 |
防止色素溶解在层析液中，
层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发。 |
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6．观察实验结果
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扩散最快是胡萝卜素，扩散最慢是叶绿素b，含量最多的是叶绿素a |
四种色素之所以能被分离，是因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。 |
◆分别在A、B、C三个研钵加入2克减碎的新鲜菠菜叶，并按下表所示添加试剂，经研磨得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄绿色、几乎无色。试回答：
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处理 |
A |
B |
C |
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SiO2（少量） |
＋ |
＋ |
＋ |
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CaCO3（少量） |
－ |
＋ |
＋ |
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95%乙醇（10毫升） |
＋ |
－ |
＋ |
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蒸馏水（10毫升） |
－ |
＋ |
－ |
（1）A处理得到的溶液颜色（ ），原因（ ）
（2）B处理得到的溶液颜色（ ），原因（ ）
（3）C处理得到的溶液颜色（ ），原因（ ）
