【求助】己酸菌的筛选与培养条件及方法

雨霧山庄 2012-10-27

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己酸菌是一种厌氧菌，在白酒窖池中比较多，而且是浓香型白酒产香的主要菌种，有做过这方面研究的朋友吗？我是新手上路，大家多指教～ Smile

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yououoy

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2007-11-24 13:53消息引用收藏

分离培养己酸菌所使用的培养基
1．培养基；
种子培养基：
乙酸钠 0.5％．
硫酸铵 0.05％，
硫酸镁 0.02％，
磷酸氢二钾0.04％，
酵母膏 0.1％，
乙醇 2％(杀菌后，接种前加入)，
碳酸钙 1％(稍后加)，
水 100％。
发酵培养基：
有如下几种：
①同种子培养基。此法质量较好，不易污染，但成本较高。
②液态法白酒
发酵糟水40—50％，
醋酸钠0.3％，
碳酸钙0.5％．
pH(用石灰乳中和)6.5—7.0，
酒精2％(稍后加)。
③固态法白酒酒糟20％，用水浸泡后。用石灰乳调至pH值6.5—7.0，煮沸，加2％酒精。
④固态法白酒发酵淋浆水，用石灰乳调pH值至6.5—7.0加水4倍，煮沸，冷后加酒精2％。

2.培养步骤：

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yououoy

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2007-11-24 13:56消息引用收藏

注意事项：
①为保证厌气条件，各代培养基必须装满容器，高液面培养，并用乙醇封口。瓶口可采用塑料布包封。

②只要不发生污染，生产中不必每代都从砂土管接种，可从中间扩大分割，如用卡氏罐、三角瓶，进行分割循环,即将大部分清液移至下代后，在瓶底残留物中，注入新培养基，继续培养使用。

③己酸菌培养易发生氨细菌污染，使发酵液发黑、恶臭，己酸产量大幅度下降。为了避免这种情况，各代培养必须严格操作，保证必要的卫生和无菌条件。同时应适当加大接种量，比如可加大接种量至10—20％。

④生长良好的已酸菌，可在培养液中见到较好的分层，并有己酸特有的清新气味。产生细小的气泡(H2)，表面不形成浮膜。

参考资料：http://www./fread.php?id=5660
希望有帮助！

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jianzhiyang2008

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2007-11-26 20:40消息引用收藏

谢谢楼上的指导，在以后的实验中遇到的问题希望还可以得到你的指点，真的非常感谢！

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cats

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2007-11-26 21:57消息引用收藏

己酸菌[18]
1968年贝强普氏(Bachamp`s)首先发现土壤细菌产己酸。1936年巴克氏(Barker)分离出产己酸的克鲁瓦氏梭状芽孢杆菌。1948年日本北原氏分离的棱菌，具有独特的性能，命名为巴氏棱菌。巴克氏(1942)所使用的培养基分1号培养基和2号培养基两种：
巴氏1号培养基：乙醇1％(V／V)，K2HPO40.5％，MgSO4?7H2O 0.01％，(NH4）2SO40.03％，FeSO47H2O 0.002％，酵母自溶液0.5％(V／V)，CaCO3约10％，加压灭菌后，加入2％(V/V)的5％NaCO3溶液和1％(V／V)的1％Na2S?9H2O溶液，使培养基PH值达到7.0—7.4。
巴氏2号培养基：除含酵母自溶液20％(v／V)，乙醇0.5％(V／V)以外，其它无机盐同1号培养基。
而北原氏用的培养基为巴克氏最初用于分离奥氏甲烷细菌的培养基，配方为；乙醇2％(V/V)，K2HPO4 0.04％，NH4Cl 0.075％，MgCl20.01％，CaCO3 2％，使用时每100毫升加含5％Na2CO3 和1％Na2S?H2O的溶液各3毫升，使培养基pH值达到7.0。
巴氏1948年所用的培养基又稍有改变；乙醇0.1—0.2g，脂肪酸钠0.1—1.5g，KH2PO4—Na2HPO4缓冲液(1MpH7.0）2.5毫升，(NH4)2SO450mg，MgSO4?7H2O20mg，CaSO4?2H2OlMg，FeSO4?7H2O 0.5mg，MnSO4?4H2O 0.25mg，NaM0O4?2H2O 0.25mg，酵母浸汁75mg，Na2S?9H2O20mg，Na2CO310mg，蒸馏水100m1，调pH值至7.0—7.4。
与此同时，用于12公升试验者，乙醇0.65％，乙酸钠0.5％，其余同上。以上培养基的pH值为7.0—7.4。而老窖泥中己酸菌生长的环境为偏酸性，能否适于窖泥己酸菌的分离培养，有待试验证明c
现将目前从白酒发酵老窖泥中，分离培养己酸菌所使用的培养基，及其扩大培养方法介绍如下：
1．培养基；
种子培养基：
乙酸钠 0.5％．
硫酸铵 0.05％，
硫酸镁 0.02％，
磷酸氢二钾0.04％，
酵母膏 0.1％，
乙醇 2％(杀菌后，接种前加入)，
碳酸钙 1％(稍后加)，
水 100％。
发酵培养基：
有如下几种：
①同种子培养基。此法质量较好，不易污染，但成本较高。
②液态法白酒
发酵糟水40—50％，
醋酸钠0.3％，
碳酸钙0.5％．
pH(用石灰乳中和)6.5—7.0，
酒精2％(稍后加)。
③固态法白酒酒糟20％，用水浸泡后。用石灰乳调至pH值6.5—7.0，煮沸，加2％酒精。
④固态法白酒发酵淋浆水，用石灰乳调pH值至6.5—7.0加水4倍，煮沸，冷后加酒精2％。
2．培养步骤：

①为保证厌气条件，各代培养基必须装满容器，高液面培养，并用乙醇封口。瓶口可采用塑料布包封。
②只要不发生污染，生产中不必每代都从砂土管接种，可从中间扩大分割，如用卡氏罐、三角瓶，进行分割循环,即将大部分清液移至下代后，在瓶底残留物中，注入新培养基，继续培养使用。
③己酸菌培养易发生氨细菌污染，使发酵液发黑、恶臭，己酸产量大幅度下降。为了避免这种情况，各代培养必须严格操作，保证必要的卫生和无菌条件。同时应适当加大接种量，比如可加大接种量至10—20％。
④生长良好的已酸菌，可在培养液中见到较好的分层，并有己酸特有的清新气味。产生细小的气泡(H2)，表面不形成浮膜。