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1.预先对生物安全柜紫外消毒30min；
2.预热血清培养基至25℃；
3.取15ml离心管加入8ml培养基；（复苏细胞：培养基=1：4）
4.在烧杯中加入36℃的温水，并准备浮漂；
5.从液氮罐中取出细胞，装载至浮漂上，迅速浸入温水中；
6.酒精擦拭冻存管口，打开冻存管，将细胞缓慢移至3步骤准备的离心管中；
7.800r/min离心4min；
8.弃上清，并加入2-3ml血清培养基重悬细胞；
9.取小培养瓶，并预先加入3-6ml血清培养基（最终培养基量大约为6-8ml），小心将细胞悬液移至培养瓶中，摇匀，观察，培养箱中培养；
10.第二天观察细胞状态，可考虑换液以降低DEMO对细胞的毒性。
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