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大肠杆菌显色培养基的微生物计数

 生物探索 2014-04-15

培养基名称:大肠杆菌显色培养基

英文名称:Chromogenic E.coli Agar

大肠杆菌显色培养基用途:

用于大肠杆菌的快速检测和计数。

大肠杆菌显色培养基使用原理:

蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;显色底物与大肠杆菌β-葡萄糖醛酸苷酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生绿色的菌落。

培养基配方(每升):

蛋白胨15.0g

酵母膏粉3.0g

氯化钠 5.0g

十二烷基硫酸钠 0.1g

琼脂12.0g

显色底物 6.5g

最终pH 7.0±0.2

使用方法:

1、称取大肠杆菌显色培养基41.6g,加入蒸馏水或去离子水1.0 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压灭菌10min。

2、以无菌手续取样品25.0g或25.0mL,加入含225.0mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基。

3、观察结果。

培养基质量控制

本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36±1℃培养18~24h生长情况如下表。

菌 名        菌 号    生长状况   培养特征

大肠埃希氏菌    ATCC25922  良好    菌落绿色

柠檬酸杆菌    ATCC8090    良好    菌落无色

鼠伤寒沙门氏菌  CMCC50115   良好    菌落无色

粪肠球菌     ATCC29212  受抑制    -----

贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

规 格:可配置1L的培养基干粉。

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