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大肠杆菌O157显色培养基实验原理及结果

 昵称14158986 2013-10-17

  中文:CRM007大肠杆菌O157显色培养基

  英文:Chromogenic E.coli O157 Agar

  用 途:

  用于大肠杆菌O157的快速分离和鉴定。

  原 理:

  蛋白胨和酵母膏粉提供碳源和氮源;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;选择性添加剂抑制非大肠杆菌O157菌的生长;色素混合物与大肠杆菌O157所具有的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生品红色的菌落。

  配方(每升):

  蛋白胨 6g

  酵母膏粉 2g

  氯化钠 5g

  色素混合物 1.2g

  选择性添加剂 0.0005g

  琼脂 15.0g

  最终pH 7.0±0.2

  使用方法:

  1、称取本品29.2g,加入蒸馏水或去离子水1000毫升,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶)。

  2、待基础培养基冷至50℃时,每100毫升培养基加入1瓶添加剂(SR0200,需先用1ml无菌水溶解),混匀并倾注灭菌培养皿,凝固后备用。

  3、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液,用接种环取1环增菌液,划线接种于显色平板上,置于36±1℃培养18-24小时。

  4、观察结果。挑取显色平板上呈品红色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。

  5、对疑似大肠杆菌O157菌落可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验和O157菌血清学试验。

  质量控制:

  本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表:

  菌 名 菌 号       生长状况          菌落       特征

  大肠杆菌 O157    NCTC12900          良好       品(紫)红色

  大肠杆菌       ATCC25922          受抑制       蓝绿色

  奇异变形杆菌   CMCC(B)49005        受抑制        -

  粪肠球菌       ATCC29212         受抑制        -

  贮 存:贮存于10℃-30℃、避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

  规 格:可配置1L的培养基干粉。

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