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液体菌种

 老玉米棒 2014-04-26
“液体菌种”是用液体培养基,在生物发酵罐中,通过深层培养(液体发酵)技术生产的液体形态的食用菌菌种。液体指的是培养基物理状态,液体深层培养就是发酵工程技术。

        “液体”指的是培养基物理状态,“液体深层培养”就是发酵工程技术。“液体制种”实质是利用生物发酵工程生产液体菌种,取代传统、朴素的固体制种;利用生物发酵原理,给菌丝生长提供一个最佳的营养、酸碱度、温度、供氧量,使菌丝快速生长,迅速扩繁,在短时间达到一定菌球数量,完成一个发酵周期,即培养完毕。

 

液体菌种应用于食用菌的生产,对于食用菌行业从传统生产上的繁琐复杂、周期长、成本高、凭经验、拼劳力、手工作坊式向自动化、标准化、规模化升级具有重大意义。
液体菌种接入固体培养基时,又具有流动性、易分散、萌发快、发菌点多等特点,较好的解决了接种过程中萌发慢、易污染的问题,菌种可进行工业化生产。液体菌种不分级别,可以用来做母种生产原种,还可以作为栽培种直接用于栽培播种。液体菌种栽培黑木耳具有八大优势:
(1)成本低:制种成本是固体的三十分之一;
(2)时间短:制种时间是固体的1/10;
(3)萌发快:接种后6小时萌发,24小时菌丝布满接种面;
(4)生长快:栽培养菌时间比固体缩短1/2;
(5)纯度高:设备完全密闭运行,菌种纯度高、活力强;
(6)污染少:菌种萌发速度快,杂菌几乎没有侵染机会;
(7)菌龄短:菌包上下菌龄一致,出耳齐、产量高;
(8)自动化:按键操作,自动化程度高。
 
常规制备液体菌种多采用“母种—一级摇瓶种—二级摇瓶种—培养(发酵)器”的生产工艺,环节多,操作复杂,周期长。全禾菌业研制的CQY系列液体菌种培养器及其配技术,将母种经过提纯、活化制备成大量的“液体菌种专用母种”,直接接种到培养器中培养。使用液体专用母种,解决了液体菌种生产及使用上的一系列难题。传统的生产从一级摇瓶、二级摇瓶到培养器一个生产周期需9~13天,而专用种直接接到培养器上到生产出成品液体种只需2~4天时间,使得液体菌种自身的生产周期大大缩短。同时节约了投资和生产成本,减少了中间环节的污染;菌球量大,菌龄一致。液体菌种制种工艺流程如下:
清洗和检查→培养基配制→上料装罐→培养基灭菌→降温冷却→接入专用菌种→发酵培养→接出菌种
 

液体菌种研究应用背景

1、国际背景
20世纪中期,微生物液体深层培养(发酵)技术迅猛发展,从而形成了现代医学、食品发酵工业。1948年美国科学家Humfeld 等成功地对蘑菇进行了液体深层培养,从而揭开了人类进行食用菌液体培养和液体菌种研究的序幕,并很快使欧美国家蘑菇生产在五、六十年代快步进入了液体菌种和工业化栽培时代。
目前世界生物发酵工业发展速度惊人,英帝国化学公司SCP(单细胞蛋白)生产罐有30层楼高,达100m,罐容近3500m3。而英国的食用菌液体菌种生产也代表西欧与北美发达国家菌种生产模式。英国的蘑菇菌种采用全自动化的大罐发酵制备液体菌种,全国菌种仅由Sylvon和Amycel两大国际菌种公司完成。双孢蘑菇是英国重要作物,其产值超过马铃薯和蕃茄,进入自动化和电子计算机时代,成为了现代农业的代表。其两大菌种厂的菌种都在进行出菇检验合格后才出厂销售。
近年来,日本韩国等亚洲国家对香菇、金针菇、平菇液体菌种的研究应用已经很深入,已有许多菇厂开始用中小型发酵罐生产液体菌种进行栽培。
西方国家液体菌种与设备的总体特点是早、精、大。
2、国内背景
我国较早从事食用菌液体深层发酵研究的是上海植物生理研究所孙美聿等人,于1960年进行了香菇液体培养研究。1979年上海师院的杨庆尧教授开始对香菇、金针菇等培养液体菌种,并进行栽培试验。自80年代至20世纪来,我国许多科研院所的专家教授前辈开始对食用菌深层发酵、液体菌种及中小型发酵设备进行了反复、深入和刻苦的研究。 为今天我国液体菌种的社会化推广应用,不论在发酵设备、工艺技术还是在栽培应用上,都提供了宝贵的经验,奠定了坚实的基础。目前已见的液体菌种生产与应用的食用菌品种,包括平菇、香菇、黑木耳、双孢菇等常规品种和白灵菇、杏鲍菇、真姬菇等珍稀品种约五十多个品种。
我国液体菌种研究的总体特点是晚、全、小。
3、差距与出路
西欧、美国、日本食用菌产量都很大,发酵技术与生产都很先进,其液体菌种的优势发挥得令人惊叹不已。我们为什么不仿效和照搬一套模式,建造一个或几个县级、省级或国家级液体菌种厂,来促进我们食用菌产业发展呢?本人认为其原因诸多,主要有三:
其一是国外设备投资大、技术要求高。一套设备得成百上千万元,且要求水、电、气、汽俱全。然而我国食用菌商品价格比国际市场平均低几倍至十几倍,这种大、洋、贵的设备不适合中国国情。
其二是与手工化农户生产不协调。液体菌种自身是工业化生产,西方国家在液体菌种发展的同时,其栽培生产也同步实现了机械化、工业化,两者相辅相成,互相促进和发展,而我国食用菌生产仍然是传统的手工化、作坊式、千家万户的小农生产,两者难以接轨。况且液体制种客观上能做到常年化生产菌种,而农户实际栽培只能季节性栽培出菇愈显不协调。
其三是我国栽培品种太多。西方国家仅对一、二个品种实现了社会化、工业化大生产,并把液体菌种作精作细,但我国食用菌商品化栽培已几十个品种,其工艺、设备研究难点多,需多年积累,逐步突破。
探索研究适合中国国情的液体菌种生产技术与设备是许多食用菌行业许多有志之士梦寐以求的愿望。尤其要求的是规模小、投资小、运行成本低,技术操作简单,适于多品种生产等等。今天我们率先研究和推广的液体菌种培养器,就是针对并解决了上述问题,从而得到了我国食用菌行业和从业菇农的认可。

液体菌种优势的认识

1、液体菌种的优势
液体菌种是采用生物培养(发酵)设备,通过液体深层培养(发酵)的方式生产食用菌菌球,作为食用菌栽培的种子。其液体菌种是相对固体菌种(木屑、棉壳、麦麸、枝条等)的物理性状而言的。液体菌种具有固体菌种不可比拟的优势:
其一是制种快:在液体菌种培养罐内菌体细胞处于最适温度、酸碱度、氧气、碳氮比等条件下,以动态方式培养,菌丝分裂迅速,在短期内能获得大量菌丝体(球)。固体菌种培养,其菌丝体是以自然数的速度自上而下匀速生长;而液体菌种培养,其菌体细胞是以几何数字的倍数加速增殖。采用大连全禾菌业有限公司的液体菌种培养器生产液体菌种一般2~4天完成一个培养周期,而固体菌种从原种再到栽培种,每级扩繁都得1个多月。
其二是活力强。液体菌种不仅营养、温度、氧气、酸碱度等环境通过控制,最大限度地满足了菌体的生长需求,而且呼吸作用产生的代谢废气能及时排除,新陈代谢旺盛,所有菌球菌龄基本一致,因此菌丝活力强。而固体菌种菌体细胞代谢物积留混杂于培养基营养物中间,自然影响菌体质量。况且固体菌种往往是瓶(袋)上下菌龄不一致,下面刚长好,上面可能老化,并失去活力。
其三是纯度高。液体菌种所用母种一般需经筛选纯化制备而成,种源纯度高。而固体菌种所用斜面母种经一些商家无限转代后纯度降低。液体菌种培养是在密闭罐体内运行,供氧系统空气经过滤,以全禾菌业液体菌种培养器为例,其纯度达到99.999999%,从而保证所培养的液体菌种是纯种。
其四是防污染。液体菌种具有流动性,接种后易分散,萌发点多,菌球接入后萌发快,在适宜条件下,接种后24小时左右菌丝布满接种面,使栽培污染得到有效控制。而固体菌种接种时,菌体经过剥离与撕裂和药物薰杀,从萌发吃料到封闭接种面,一般得5~7天。所以杂菌污染机率多。
其五是缩短栽培周期。液体菌种使栽培发菌速度快一倍,出菇集中,减少潮次,周期缩短,栽培的用工、能耗、场地等成本都大大下降。有的品种(如杏鲍菇、金针菇)从制种到栽培、采收上市不超过30天,更容易抓季节,赶行情。
其六是成本低。以130型全禾液体制种培养器为例,每罐菌种成本100元左右,接种4000~5000袋,菌种成本不超过3分钱。
2、液体菌种的不足
事物都是一分为二的。液体菌种目前也有着不尽人意之处。诸如培养设备需要有电源、偏远农村常停电、设备需要投资(有的菇农由于诸多原因,尚未完成资金积累),需要重新学习和掌握制种工艺,设备故障自己不会维修;一家一户小规模生产(1000-2000袋),上设备不划算,但可联户引进设备等等。但这些问题也正是我们科研单位正在努力解决的,况且有的目前已经解决。比如停电问题,目前全禾菌业培养器能在停电后继续自动运行10~20小时,短期停电不用怕,全禾菌业不仅负责培训技术,出现问题还能上门服务,这也是科研单位应有的服务。
3、对液体菌种认识的误区
因为液体菌种研究与推广的突破是在近几年,而许多人的认识尚受前些年,甚至十几年前液体菌种研究水平的影响,对液体菌种的成功和应用推广持谨慎、怀疑甚至反对态度,实际是自身认识的误区所致。最主要的有以下几种观点:
其一是液体菌种培训器污染。是的,发酵液营养丰富,比固体木屑培训基杂菌生产速度快。然而,现在的国际先进的膜过滤材料,其过滤孔径为0.01微米,是最小细菌个体的几十分之一,从而保证了供养纯度并有效控制杂菌。
其二是液体菌种技术要求高,农户不易掌握。实际上我们现在的液体菌种培养器全部是自动控制,按键操作,比过去制种瓶瓶袋袋地转要轻松简单十几倍,农户一学就会。
其三是液体菌种贮藏运输难。实际上,液体菌种培养器制种2-3天就一罐,一罐百八十块钱,就能接几个至上万袋,现用现作,现作现用,何需贮藏运输呢?
其四是液体菌种对出菇的影响。有人怀疑液体菌种物理搅拌造成菌体单核化,营养液体造成菌性变异退化等等。实际上,这些问题是多年前液体发酵中存在的问题,恰是我们现在技术已经解决了的问题。气体搅拌代替机械搅拌,天然有机物代替化学试剂,专用母种代替传统母种,并取消摇瓶工艺,从而保障了菌种的种性,使食用菌栽培产量质量都有了保障。延续到今天。
其五是简单化认识倾向。这种倾向和以上怀疑态度相反,认为液体菌种好干,设备谁都可造,技术也没啥,甚至把菌种培养的发酵都混为一谈。有的人说搞几个瓶子几个塑料袋子都可生产液体菌种,有的人说单位和个把别人的罐买来一台一解剖一模仿,就说出了科研成果,有的公司成立没几天,就称“雄厚的实力”、“产业的龙头”,请问这些人自己对液体菌种生产过没有,用过没有?竟敢向社会推广,简直是对科学的讽刺。(王德林)
 

液体菌种的制作难点
  1.试管的选择:生产液体菌种时,试管的选择非常重要,有好多的人就是在试管的选择上出问题,总是做不出专用母种。在生产上,我们要求试管一是自己新生产的,再一个就是存放时间短的。长期存放的、上面长霉菌的,一定不能用。
  2.三角瓶专用母种的制作:三角瓶专用母种其实很好做,就是有些人不求甚解,以为接上种就可以,其实这样是永远都不会生产出三角瓶的。这里面的操作细节一定要掌握。
  3.发酵罐的制作细节:发酵罐其实很好操作,只是做为一个最后的环节,它要求的是细节。操作规程上说的那些是对的,只是要想做得好,最好是学习一下。由老师亲自做一次,注意哪个地方应该特别小心,也就是细节要特别小心,可保成功率。
  4.接种技术:接种技术对于固体来说应该没什么的,可以在液体菌种上,是有说法的。特别是一些特别品种,在接种时应该特别注意。
  5.栽培料的含水量和接种量的控制:这一项没做好,是好多人做液体菌种失败的一个重要原因。需要一些计算公式和方法。
  液体菌种制作与士兵用枪射击是一个道理,其实一般的人也会射击,可是要想一枪毙命,正中眉心,就不是一般人能做到的了,要经过系统的学习和训练。理论上说的是一回事,实际上做的又是一回事。
正常情况下,经过系统培训的人,在做液体菌种时,成功率应该在95%以上。能熟练掌握试管的制作、搅拌器和摇瓶机的液体菌种制作技术,能自己一个人操作液体菌种发酵罐、懂得不同品种的接种技术。经常做的人,应该在98%以上,甚至更高。这里面除了技术外,还有设备的问题。

液体菌种的制作过程及方法
  (一)试管种的生产:液体菌种对试管的纯度要求很高。所以要自己会做试管种。
试管种的制作其实很简单,在我们要用种的前三个月,到市场上去看哪个菇符合要求,就买回来(也可以用自己保存的试管种均可)。在接种箱内进行常规气雾(最好是高锰酸钾和甲醛)消毒,30分钟后,开始分离。分离时先将用具消毒,然后用手把菇体分开,用镊子夹一小块菇肉(不同的菇取种位置不同),放到试管里。塞上棉塞就行了。这样的成功率一般在80%以上。在菌丝生长阶段,要经常观察菌丝的生长情况。对菌丝生长不整齐的,有污染的,全部淘汰。只留下没什么问题的,长满试管后,再取特定部位进行转管(见实操)。菌丝长到**cm时,从菌丝生长的尖端提取一小块,一般地认为,取****大小就可以了,不过从试验上看,提得**效果越好。平菇一般提二次就可以了,提到五次,基本上与脱毒菌种效果差不多。别的品种要多些,最多不超过五次,都可以达到提纯的目的。
  (二)三角瓶专用母种生产:专用母种分固体和液体两种。
从生产技术上看,液体专用母种要难一些,是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。整个过程要4-7天时间,生产的液体种稍经加工就可以直接使用。
液体菌种专用母种的配方就是用PDA加富配方去掉琼脂。用三角瓶盛装,在高压锅里121℃保持30分钟就行了。待三角瓶的温度降到30℃以下时,在超净工作台或接种箱内进行接种。马上就可以进行搅拌或摇瓶了。
固体种生产时间要长些,保存的时间也长,而且方便运输。固体专用母种一般污染要严重一些,有的人污染率要达到20-30左右。
  固体专用母种我们现在一般不用,污染率太高,而且不好发现,最糟糕的是容易堵枪。配方是把木屑过20-40目的筛,用去掉琼脂的PDA配方拌料,在121℃高压下灭菌2小时,待温度下降到30度以下时,在超净工作台或接种箱内进行常规接种。一般20多天可以长好。具有运输和贮存方便等特点。
搅拌器是应用磁性材料N、S极的异性吸引,同性相斥的原理制成的。工作时,机械的磁转子转动时,瓶内的磁转子在瓶内跟着转,带动液体旋转,为液体供氧。液体菌种培养基本条件是有一定的氧气、菌丝、水份和营养,几个因素溶合才能使菌丝快速繁殖。由于转子的高速旋转,产生的菌丝被剪切成菌丝片段。
摇瓶机就是通过摇动液体,使空气与水溶合,增加液体中的氧气含量。通过摇动,液体在瓶内翻滚,使菌丝滚动成菌球。
发酵罐生产
  生产时要先进行培养料的配制。配料时先将土豆去皮切片,与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁,再将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入,混匀后装入罐中,也可将免煮培养基或公司提供的专用培养基直接加入到罐内加热灭菌,125℃维持40分钟到一小时进行灭菌,灭菌结束后用冷水冷却至30℃以下。将并瓶后的三角瓶专用种在火焰的保护下接到罐内进行培养,培养时根据不同的菌种,设定适宜的温度。 
培养期间应注意观察菌球出现的时间、颜色和排出气体的气味等,压力控制在**Mpa。如遇到停电,关闭排气阀来保持罐中处于正压状态。来电后重新启动,并打开排气阀继续培养。培养过程中,可随时采样分析,几天后待菌球密度符合要求时(从视镜或排料观察),即可接种。
  (四)接种
液体菌种生产结束后,在检测合格的情况下,就要进行接种。接种前要先将接种枪、连接管道用棉花塞上,放到高压锅里进行灭菌。121℃20分钟就行了。与此同时,将接种机打开工作。在接种时,前几枪不要接到栽培袋里,应该先喷到量筒里,以检查接种量的大小。全部接种过程都要在接种机下进行。
液体菌种的制作方法
  液体菌种的生产方式可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵(吹氧)法、发酵罐法。
  1.电磁搅拌法比较简单,投资也比较少,200元钱的投资就可进行生产。从接种到菌丝长好要7天时间。但也存在生产量小的缺点,所以生产中常用几个搅拌器同时生产来加以解决。也可以用扩张法来加以解决。主要生产过程:在无菌条件下将试管种接到三角瓶里,搅拌4-7天后得到大量的菌种。
  2.摇瓶机法也是一种比较简单的方法,接种简单,管理方便,生产量根据机器的设定而不同。投资要1000-3000元钱。但也存在噪音大等缺点。生产过程:在无菌条件下将试管种接到瓶内,摇动。一般7天左右会出现大大量的菌球。
  3.简易深层发酵(吹氧)法相对来说比较麻烦一些,主要是器材的联接要在无菌状态下进行,如果哪个环节出现问题,不能保证成功率。投资也要3000多元。生产过程:在无菌条件下将试管种接到容器内,通气培养7天,得到大量的菌球。
  4.发酵罐法是目前要求最高的一种,涉及到好多方面的知识,很难自学成才,而且投资也高,一般要10000元以上。如果你的生产量大或是菌种场,建议你还是用发酵罐比较好。因为生产量大,很快就会把你的投资收回来,而且可以减轻你很多工作量。
 
发酵罐液体菌种的生产主要过程:专用母种的生产,时间在一周之内。发酵罐接种后,一般品种在三到五天内生产好。时间的长短一是看罐的大小,二是看品种。各有不同。
需要说明的是电磁搅拌器生产的液体菌种是菌丝团,而摇瓶机法、简易深层发酵(吹氧)法、发酵罐法生产出来的液体菌种一般是菌球。
 
— 、对液体菌种设备的认识
液体菌种设备已经基本完善,可以开展规模化生产 食用菌液体菌种设备不论大小原理都一样,培养容器(瓶、罐) 加无菌供气系统,看似简单的设备各生产厂家的设计都有不同,如罐 的形状、空气的过滤层次、罐内液体的循环、灭菌温度的均匀性等。

  1、1 液体母种生产设备 电磁摇床和机戒摇床都可以培养优质种子, 最好不用固体种子 (种 子是否染菌难判断)和简易培养的液体种子。

  1、2 发酵罐的形状有的罐高廋、有的则矮胖,前者依据传统理论认为空气从进入液 体到冒出的时间越长溶氧越多, 后者则采取多供气的方法来弥补空气 在液体中运动距离短的缺陷, 这两种设计理念都能完全达到培养优质 液体菌种的目的,在长期的应用中我们感到矮胖罐也很好用,因为这 种罐灭菌时上下温差小, 而且夹层与罐内的压差在较小的情况下蒸汽 就可经过过滤器进入罐内, 能很好的进行过滤系统的在位 (安装位置) 灭菌,同时可以用能耗低而供气较大的电磁式气泵供气

  1、3 发酵罐的层数 市场上典型的有单层、双层(夹层)、三层(夹层外设保温层),使 用单层及双层罐在灭菌时能耗较大, 有的罐靠自身热源不另加棉被进 行保温温度很难达到 120 度以上、且要防止烫伤皮肤;三层罐保温性 好;单层罐只能自然降温,双、三层罐可以用流水降温。

  1、4 发酵 罐体设置上的不合理点 罐体夹层应设进排水(汽)口,安全阀、压力表,内层应设压力表、 温度表、接种口、出种口、进气口、呼吸口、进料口、取样口等。各 品牌的发酵罐不合理点有内层装安全阀(负压时易吸气污染)、不装 压力表(不知道罐内压力) 过滤器离罐灭菌 、 (连接时有可能受污染) 、 呼吸器离罐灭菌(不方便)、接种口过大(火焰圈难控制)、过滤层 次少到只一级 (不安全、 应有粗—精—精三级) 空压机选配不当 、 (电磁式气泵、无油空压机、有油空压机)能耗相差三五倍、过滤器能力 不足(过大压差击破过滤膜)等。  

  1、5 发酵罐内液体的循环 各品牌都以进入罐内的无菌压缩空气为动力,个别品牌装有导流 装置、气体破啐网等。在菌丝球少时液体都会很好的流动,后期则有 差异,特别是痩长罐无导流装置时底部液体几乎不流动,对菌丝生长 不利。设备生产厂家应认真考虑让液体很好的循环流动起来。

  1、6 空气过滤器 小罐因通气量小,有的用棉花或活性碳做过滤材料,棉花纤维间的空 隙一般达到十几微米,它的过滤作用仅仅是靠沉降和粘附,当气流过 大时过虑效果不好,几十升以上的罐多用膜过虑器,如粗过虑器用 0.2um 聚丙希、精过虑器用 0.01um 聚四氟乙希膜

  1、7 气泵的选用 电磁式气泵的能耗低气量大,但压力低(仅 0.03-0.05mpa),能与大 多数罐配用; 无油空压机 (膜片式) 压力中等, 活塞式空压机压力大、 能耗高; 500 升罐为列用电磁式气泵和用活塞式空压机相比能耗相 以 差 3-4 倍、月电费相差千元以上。

二、对液体菌种技术的认识
  多品种规模化生产证明液体菌种生产技术已经成熟。 技术是生产应用液体菌种成功与否的关键, 相同的设备不同的人 员操作结果大不一样,有的可以连续几个月生产不会出现污染,而有 的可能罐罐都污染,菌种质量的优劣也相差很大。

  2、1 基本现状 培养基的配方、 培养条件的控制已有较多的研究报道, 各有特点, 培养结果也不完全相同,如菌球的大小(1—几 mm)、数量(每毫升 几百—几千个),用直观的方法即菌丝占液体的百分比列来看(静止 2hr)如香菇、双孢菇为 50-95、平菇金针菇黑木耳鸡腿菇杏孢菇白灵 菇为 80-98,很多品种已经在生产中正常应用液体菌种。

  2、2 培养基的选择 很多原料可以做液体培养基,如玉米粉、土豆、面粉、麸皮、豆粕、 蛋白胨、酵母膏、葡萄糖、蔗糖等,所选原料可以因地制宜,如用量 小时主料用土豆、 用量大时多用玉米粉, 没有蛋白胨时用豆粕或黄豆。 不同配方的最终培养液 ph 值是不会一样的,一般高氮配方 ph 值高, 低氮配方 ph 值低(如香菇不同配方培养后 ph 值为 3.5-6.5)。粘度 高则菌球小,氮多则菌球疏松,生产中注意调节。

  2、3 无菌操作过程这是液体菌种培养的关键,整个过程中不能有一个细菌进入发酵液 中。 采用电磁式摇床培养液体菌种时可以在接入试管菌种后静止培养 3-4 天,观察无污染后再摇动培养,可以有效避免菌种带杂菌;发酵 罐及空气系统先空消一次再做培养液, 摇瓶菌种接入发酵罐的过程是 最易被污染的操作过程,操作中必须对罐体的接种口进行严格消毒, 火焰圈应该完整控制接种口, 摇瓶管口与罐体接种口的对接应在火焰 中进行,接种完后迅速关闭接种口;种子罐与下一级培养罐的连接管 道最好在使用前再次蒸汽灭菌一次。 培养期间应始终预防系统产生负 压。

  2、4 抗生素的使用问题 抗生素主要用于预防细菌污染,虽有一定的效果但不提倡使用,试验 中如果发酵液被污染了再用抗生素来治疗, 即使用量加大到一般用量 的 3-5 倍也不可能阻止细菌的繁殖,这说明抗生素不是万能的,而且 在生产中某些抗生素在液体菌种培养中曾经引起食用菌遗传性的改 变,导致不出菇(如茶薪菇、紫木耳),复合使用或先后使用两种抗 生素可能更易使遗传性发生改变,导致不出菇。实验中还发现有些抗 生素达到一定浓度可以使鸡腿菇菌丝不生长, 某抗生素只要较低浓度 就可以抑制黑木耳菌丝的生长, 所以应该认识到抗生素对食用菌菌丝 生长是有影响的;同时大多数抗生素都有一个代谢失效的过程,如果 不能杀死细菌而只能抑制细菌的话等到抗生素失效时培养液仍然会 被污染
  三、液体菌种与栽培技术的结合问题

  3、1 液体菌种与培养料的含水量等 配料时应考虑准备接入的菌液量减少加水量,避免培养料过湿;液体 菌种的液体中含有一定的糖等营养物质,配料时可以不再加糖

  3、2 液体菌种生产与菌包生产 液体菌种的保存时间短,生产中最好在培养好后尽早使用,否则必须 用冷水降温培养,虽然当温度降到很低时(10 度以下)可以保存十 多天,但仍应尽早使用,这就要求做液种与做栽培袋按计划进行。

  3-3 液体菌种优势的利用 如果将菌液喷满料表面,菌种萌发就可以封面,可以有效控制杂菌污 染;如果采用插入式接种可以将菌种接到料的深处,可以明显缩短养 菌时间;小麦菌种在接入液体菌种后摇动使麦表粘满菌种,几天即可 长满菌丝,十天即可使用,可以解决生产急用。
液体菌种的几种接种方法
  液体菌种具有方便快捷菌龄短而一致纯度高活力强等优点, 越来 越受科研工作者和广大食用菌生产者的重视, 但如何正确使用液体菌 种尚未见系统报道. 液体菌种培养好后接种方法直接影响液体菌种优势的发挥,甚至关系到生产的成败.我们在规模应用液体菌种接种中 使用过多种接种方法, 各有特点, 下面就几种成功的方法介绍给大家.
一 料表面接种法:这是目前采用比较多的方法,采用这种接种 方法时多为瓶装或袋装培养料,上端有一定的空间,如生产金针菇茶 薪菇黑木耳杏鲍菇菌包以及生产香菇鸡腿菇平菇等各种菌种, 接种时 尽量将料表面喷淋上菌种,液种萌发生长快,封面早杂菌污染的机会 很小,除破袋外菌袋污染的机会极低,甚至以万袋计算可以达到零污 染.这种方法的菌球处于氧气充足的条件下生长很好.
 二 表面加枪头插入式接种法: 因表面接种法接种时菌球易被培 养料的过滤作用阻滞在料的上半部分,菌丝生长需要从上往下生长, 不能在料内上下同时生长.如果将接种枪枪头做成管状插入料内接 种, 菌球在料内同时生长, 可以缩短发菌时间一半左右, 甚至更多. 这 种方法一要注意料内氧气的供应(不适应扎口袋),二要注意接种环 境的无菌要求,避免菌种不萌发或枪头带入杂菌造成污染.如生产中 香菇菌棒从两端中心插入接种时即使不封口, 菌棒中段的菌种也不易 萌发. 这种方法曾在低温季节大量接种香菇鸡腿菇金针菇平菇等菌种, 成品率在 98-100%,缩短时间一半以上.
三 袋表面扎孔接种法:长菌棒从两端接种不能缩短养菌时间, 从袋的表面一面或两面)用枪头扎入3-5cm 深并同时接种,扎孔 间隔根据需要确定,如香菇每棒扎3-5个孔,这种方法调节接种量 和孔间距离可以达到缩短养菌时间和减少杂菌污染的目的, 缺点是用 种量大,每个孔的接种量不少于10ml,接种后不封口的应达到每孔20ml 以上.这种方法 2007 年大量生产香菇出菇菌棒,成品率高达 99%以上
四 袋壁内喷射接种法: 长菌棒还可以采取从两端一则用枪头分 别扎入到袋薄膜内,从料与塑料薄膜之间喷射菌种(要求液体压力达 到1kg/cm2以上),喷射后用手按压分散菌种,使菌棒一则布满菌 种,待菌丝生长1-3cm 后可以扎孔增氧.这种方法可以覆盖较大 的料表面,发菌快袋面微孔污染小,缺点是用种量大,每喷射一次用 种多在100ml 左右.而且在配料时就要注意减少培养料的含水 量.这种方法在香菇生产上应用比较成功.是我们在第三种方法的基 础上改进的方法,期望今后适应开放接种的需要.
五 接种后摇动接种法: 颗粒菌种培养基接液体菌种最能发挥快 速发菌的优势, 液体菌种接入玻璃瓶后旋转或摇动使液体流动粘到每 粒颗粒上,在适合温度下三天即可长满菌丝,继续培养几天让菌丝深 入颗粒内部后即可用于生产.这种方法可以在急需用种时使用. 液体菌种对不良环境的抵抗力不如固体菌种(如耐缺氧能力不 强),采用发酵料,生料栽培或塑料袋熟料开放式拌料栽培往往不易 成功.液体菌种生产技术与食用菌栽培技术的很好结合才能发挥液体 菌种的优势 以上方法可以灵活运用, 如生产蛹虫草时由于培养液中含有大 量由菌丝产生的孢子,接种时只要液体流到的地方都会有菌丝生长, 无论是薄料生产子实体还是厚料生产菌丝体粉都可以朝料表喷一下 液体菌种即可.

液体菌种推广的必然性

1、 菌种生产方式落后已成为影响行业进步的瓶颈
传统的固体菌种三级四级地代代转接,一转就是半年。生产中前怕污染,后怕老化,烟薰火烧,繁琐复杂。今天好了明天不一定好,东家好西家不一定好,少干了还行,一上规模就出问题。由于固体菌种纯度低萌发迟缓,污染居高不下,大面积污染的地区数不胜数。到了出菇时袋与袋之间菌丝参差不齐,即使是同一袋内,菌丝的菌龄上下也相差悬殊,上面的菌丝已经老化,而下面的还没长满,出菇难以集中,产品质量差,管理费用高。
2、产业发展需要菌种生产方式的创新
我国食用菌产业今后的发展主要有三种趋势:一是标准化;二是工厂化;三是周年化。但是建筑在固体菌种的基础上来谈标准化、工厂化、全年化,那无异于空中建楼阁。
3、市场需求呼唤生产方式的创新
据中国菌协报道,我国近年来,食用菌出的量度在下降、产值在下降,近五年来出的贸易下降,损失了50亿人民币。另据中国菌协报道,我国食用菌2002年部产已达870万吨占世界65%。那么是我国食用菌供过于求了吗?
我国只有实现标准化、工厂化、全年化生产,才能从生产大国发展到生产强国。面实现标准化、工厂化、全年化生产,首先得解决机械化、设施化问题。液体菌种是整个食用菌生产的源头,液体菌种技术设备的研究与应用就是标准化菇厂的入门证。是我国菌业振兴,立于国际菌业强国之林而不败的有力武器。

液体菌种研究推广形势

1、设备越来越精
一是型号越来越多。既有每罐生产几十升可接种一、两千袋的“家庭型”罐,也有每罐生产几百升可接种一、两万袋的菇厂、菌种厂用罐。我国食用菌生产发展正处于上升时期,普通菇农生产大户和大小菇厂(场)同时并存,设备型号多才能适应我国食用菌发展现状,才适合现阶段食用菌的国情。
二是功能越来越好。目前全禾液体菌种培养器不仅解决了自动控制,还实现了电脑远程集成监控,不怕停电,停电20小时之内机器照常运转;能实现定量接种,误差不到+0.5毫升,能与全自动液体菌种接种机相连接,整筐(12袋)一次性接种,6秒钟完成。
2、是工艺越来越先进
目前已实现人工栽培的食用菌品种已达四、五十种,这些品种液体菌种生产的培养基配方、培养条件、工艺及设备控制各有不同,目前全禾菌业除常规品种制种工艺完成之外,对一些难度较大的品种也已获新的突破。
3、推广普及正在深入
液体菌种在我国推广应用的四年时间,基本消除了食用菌生产者对其怀疑观望心理,得到了行业的认可。不仅各省、市、自治区都得到推广应用,还辐射到了其他国家和地区。目前全禾液体菌种培养器已销往加拿大、法国、马来西亚、韩国和我国台湾等十八个国家和地区,得到国外同业人士的称赞,这也是我国对世界食用菌行业的又一贡献。
4、液体菌种正朝着标准化方向迈进
中国食用菌协会与国家相关部门正在加强和推进食用菌标准化建设,制定了从制种的培养基、各级菌种、生产工艺、生产设备和食用菌产品等一系列标准。在目前食用菌液体菌种的国家标准、行业标准尚未确定的情况下,科研单位制定和实施企业标准十分重要。目前全禾液体菌种设备、工艺、菌种及接种设备、技术先后制定了六项企业标准,对规范液体菌种的推广应用起到了积极有效的作用。
 
 
 

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