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香菇新菌株庆科20选育报告 发布日期： 陈俏彪 吴应淼 叶长文
我国是香菇生产大国和香菇出口大国，筛选和推广香菇良种是香菇产业可持续发展的关键。香菇主栽菌株“241-4”、“庆元9015”、“135”等随着栽培年限的增长相继出现种性退化、产量品质降低等趋势，香菇生产急需优良的替代菌株。浙江省庆元县食用菌科研中心继选育出香菇当家菌株“241-4”和“庆元9015”后2000年3月又成功选育出高产、高抗、优质、高效的香菇新菌株“庆科20”，它克服了“庆元9015”菌柄过长、连体丛生等不足，并适宜作高棚层架栽培花菇和低棚脱袋栽培普通菇。该菌株于2005年2月通过了省级品种认定（认定编号：浙认菌2005001）。 1 材料与方法 1.1“庆科20”母本选择 母本为庆元县香菇（Lentinula
edodes）主栽菌株“庆元9015”。 1.2供试菌株 供试香菇菌株“庆元9015”、“241-4”、“135”、“Cr02”、“66”、“868”和“南花103”等由庆元县食用菌科研中心保藏提供。 1.3选育方法 1997年，庆元县食用菌科研中心从“庆元9015”栽培场采集到23只菇柄短、单生、长势好的子实体，经组织分离→拮抗试验→出菇试验→品比试验→稳定性观察→生物学特性、栽培特性研究，选择采种顺序为“20”的菌株进行中试推广。2000年将该菌株定名为“庆科20”。 1.4实验室筛选 挑选菌柄短的菇体进行纯种分离，并进行菌丝拮抗试验、菌丝耐温培养、菌丝长势和形态观察等试验，剔除菌丝长势弱的株系。 1.5栽培筛选 所获菌株按常规培养料配方（杂木屑78%、麦麸20%、红糖1%、石膏粉1%,含水量55-60％）进行出菇试验，淘汰菌柄过长、子实体有丛生、产量过低的株系。 所获菌株按常规培养料配方（同 1999～2000年在庆元县及其毗邻的龙泉、景宁及福建省的松溪、政和、寿宁等县市高（800～1200m）、中（500～800m）、低（300～500m）三种不同海拨高度分别设点进行产量鉴定和品比试验，接种期安排在春季，出菇后抽样进行评价分析。 1.6 PCR扩增条带分析 PCR扩增条带分析采用CTAB/NaCl法[1.2]提取香菇菌株全基因组DNA。PCR扩增采用PX2(美国Thermo Hybaid公司)MJ梯度PCR仪，反应所需的dNTP、Tap酶、PCR缓冲液和随机引物S375均由上海生物工程公司提供。。 1.7蛋白电泳分析 蛋白电泳分析采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)，谱带迁移率（Rf值）计算参照文献[3]介绍的方法。 2 结果与分析 2.1 生物学特性 “庆科20”菌株孢子印白色，菌丝密集浓白，子实体单生，朵型圆整，菌盖表面颜色较淡，为淡褐色，含水量高时颜色较深，菌盖直径2.0～7.0cm，菌肉组织致密，厚0.5～1.5cm，菇柄直且短，长2.8～4.0cm，直径0.8～1.3cm；菌褶整齐、较致密，呈辐射状排列，易开膜，条件适宜时易形成花菇。 菌丝拮抗试验显示，“庆科20”与“241-4”、“135”、“Cr02”有明显的拮抗作用，与“庆元9015”无明显拮抗作用。表明“庆科20”是一个与“241-4”、“135”属不同品系的菌株，但与“庆元9015”具有较近的亲缘关系。
2=“868” 3=“庆元9015”Qingyuan9015 4=“庆科20”Qingke 20 5=“241-4” 图1 5个香菇菌株的PCR扩增条带图谱 Fig.1 PCR amplification band
pattern of five Lentinula edodes strains “庆科20”、“庆元9015”、“241-4”、“66”、“868”5个菌株的PCR扩增条带表明（图1），“庆科20”具有与其它参试菌株不同的带型，与“庆元9015”等具有明显的遗传差异。
2=“庆科20”Qingke 20 3=“庆元9015”Qingyuan9015 图2 3个香菇菌株蛋白电泳图谱 Fig.2 The protein
electrophoretic profile of three Lentinula edodes strains 从图2中可以看出3个菌株具有各自独特的电泳图谱，“庆科20”和“庆元9015”均有17条蛋白带，但有明显不同之处，而“241-4”拥有20条蛋白带，“庆科20”与“庆元9015”等菌株具有明显的遗传差异。 2.2栽培特性 “庆科20”菌株属中低温型中熟菌株。菌丝体生长适温为22～27℃，出菇适宜温度8～22℃，最适14～18℃， 9月下旬～翌年5月出菇，子实体单生，其分化和发生需一定的昼夜温差刺激；适宜接种期2～7月份，最适为3～5月，不同接种期菌棒的出菇期、香菇产量无明显差异，但冬菇率、折干率等会随接种期提前而提高。 “庆科20”、“庆元9015”、“南花103”、“135”4个的进行接种成活率和菌棒成品率对比试验表明，“庆科20”与“庆元9015”、“南花103”的接种成活率和菌棒成品率比较高，而“135”菌株的接种成活率和菌棒成品率明显低于其它3个菌株。 经过1997～2000年3个产季的初筛、复筛和中型生产试验表明，“庆科20”栽培性状稳定、产量高、品质优、商品性好、抗性较强、适应性广，适宜高棚层架栽培花菇和低棚脱袋栽培普通菇。表1数据表明，“庆科20”比“庆元9015”和“241-4”袋单产分别提高3.9％和21.5%，产值分别提高14.3％和18.6%。“庆科20”具有适应性广，稳定性强和高产优质的特点。 表1 不同海拔高度中试结果 Table 1 Comparison table of
different elevation pilot experiment 海拔高度Elevation(m)
菌株Strains 单产Per bag yield（g） 产值value(Yuan /Per bag) 生物效率Bioefficiency（%） 300～500 庆科20Qingke 20 90 2.99 113 9015 84 2.62 105 241-4 77 2.57 96 500～800 庆科20Qingke 20 97 3.16 121 9015 95 2.72 119 241-4 79 2.58 99 800～1200 庆科20Qingke 20 101 3.21 126 9015 98 2.85 123 241-4 81 2.74 101 “庆科20”和“135”花菇形成速度观察测试结果表明，在连续5d晴朗、适度通风的条件下，“庆科20”和“135”的菇蕾在割口[5]培养60~70h后，菇盖表面均形成深浅不一的白色裂纹，两个菌株在花菇的形成速度上不存在明显差异。 试验还发现“庆科20”菌株已形成白色花纹的花菇，受环境湿度变化的影响没有“135”菌株明显。空气湿度高65%以上时，“庆科20”花菇的花纹能保持较长时间，而 “135”菌株的花菇盖面会很快转为棕红色，裂纹逐步消失。 2.3子实体质量 “庆科20” 朵型圆整，菌盖中等，菇柄短而中空，畸形菇少，菌盖占总菇重的85.2％，比“庆元9015”、“241-4”、“Cr02”的菌盖占总菇重分别高6.4％、0.8％、3.9％，可见“庆科20”菌株更适于生产剪柄菇。“庆科20”菌株每潮菇的菇体大小较“庆元9015”、“241-4”和“Cr02”均匀，而3个菌株的菇体大小相对就参差不齐。 通过对“庆科20”、“庆元9015”、“241-4”、“Cr02”4个菌株的香菇子实体的含水量、干鲜比、收缩率、肉质疏密、食用口感、保鲜期进行比较，“庆科20”菌株的子实体含水量88.3%、干鲜比1:8.7、收缩率31.0%、肉质致密、食用口感鲜嫩、保鲜期较长，“庆元9015”、“241-4”与“庆科20”的上述特征较为接近，而“Cr02”较差（含水量90.5%、干鲜比大、收缩率38.6%、肉质疏松、食用口感略差、保鲜期相对偏短）。 表2数据表明，“庆科20”菌株的白花菇比重大，质量品位好，达到“135”水平，明显优于“庆元9015”和“南花103”，适宜进行花菇栽培。 表2 各等级花菇[5]比例 (%) Table 2 The statistics of
variety figured mushroom rate(%) 菌株Strains 天白花菇White figuredmushroom 茶花菇Fulvous
figuredmushroom 伞花菇Opening figured mushroom 135 27.2 54.2 18.6 庆科20Qingke 20
28.5 50.8 20.7 9015 20.4 51.0 28.6 南花103Nanhua 103
21.3 48.6 30.1 3 讨论 3.1“庆科20”是一个具有区别于亲本和其他供试菌株的PCR扩增条带、蛋白电泳图谱的香菇新菌株。 3.2“庆科20”菌株子实体朵型圆整、菇盖平整，组织致密，食用口感鲜嫩，含水量低，折干率高，菇柄短而中空，畸形菇少。 3.3 “庆科20”栽培性状稳定、产量高、品质优、商品性好、抗性较强、适应性广，易形成花菇，花菇率高，适宜作高棚层架栽培花菇和低棚脱袋栽培普通菇。
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