天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术

人工栽培天麻，在有性繁殖过程中，需要萌发菌和蜜环菌两种共生菌。笔者在生产实践中，摸索出两种共生菌都能生长的培养基及生产技术。具体做法如下。     1 培养基配制     1.1 液体培养基 马铃薯（挖去芽眼、去皮、切片）100g，硬杂木屑、麦麸、玉米面各50g，自来水或天然水1300mL，在双重锅内煮沸30分钟后用双层纱布过滤。取滤液补水至1000mL，加葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、蛋白胨0.5%、10mLVB1。全部溶解摇均后，分装于500mL的三角瓶或罐头瓶内，每瓶装150mL左右，也可装于试管内，装入量为试管容积的1/4。三角瓶和试管用棉花塞口，罐头瓶用2层牛皮纸或4层报纸上盖一层塑料布封口后，用皮筋扎口。特点：技术含量高，繁殖快，长好即可应用，但不能长期保存。     1.2 固体斜面培养基 是食用菌生产中常用的培养基，按照“1.1”的操作程序制取滤液，在滤液中加入琼脂18g，加热溶化并补水至1000mL，趁热加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、蛋白胨5g、10mgVB1，全部溶解摇均，分装于试管内，装量为试管容量的1/4，然后用棉花塞口。     1.3 木屑培养基 硬杂木屑50%、玉米芯（粉碎成小颗粒状）25%、麦麸15%、玉米面10%，外加葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、石膏1%、石灰0.5%、磷酸二氢钾0.2%、硫酸镁0.1%、2%VB1。将原料和石膏、石灰等干料拌均，再将上述可溶解的所有辅料溶于水中并拌入原料中，使之含水量为70%，充分拌均后装入试管，并适当压实。装入量为试管容积的1/2，然后用棉花塞口。特点：耐贮藏，便于邮寄。     2 灭菌     用手提式高压灭菌锅，也可用民用高压锅代替。     2.1 液体和斜面固体培养基 灭菌时，蒸汽压力为1.4kg/平方厘米时稳定保持30分钟，待锅内温度降到50～70℃时出锅。液体培养基出锅后直接放入接种箱中，待温度降到25℃以下时接种；斜面固体培养基需趁液体状态时倾斜成斜面（斜面长度约占试管长的3/5），待培养基自然凝固后移入接种箱。     2.2木屑培养基 灭菌时，蒸汽压力在1.4kg/平方厘米时稳定保持45～60分钟，自然降温后，出锅直接放入接种箱。     注意：灭菌锅应事先加足水，开锅后一定要待内部冷空气排尽后再压阀，达到压力后，调小热源，维持压力。灭好菌后，降压不能过急，以防冲掉棉塞。     3 接种     必须在无菌条件下，严格按照无菌操作要求进行。     3.1 接种液体培养基 只需从母种试管内挑取花生米大小的1～2块母种（带有菌丝的种块）接入三角瓶中。接入试管液体培养基时，种块可小一些。     3.2 接种斜面培养基 蜜环菌需趁斜面有凝结水时接种，凝结水有利于蜜环菌萌发。每支试管斜面上接入1～3块母种；接种萌发菌时，需待培养基表面无凝结水时再接种。每支试管斜面上接入1～2块母种。     3.3 木屑培养基 培养基灭菌后不能存放，需尽快接种。接种时，要用接菌钩适度推压种块，使其与培养基紧密接触，以利菌种萌发生长，接种后需立放。     4 培养     接种后，尽快放入恒温箱或培养室内，在22～24℃的条件下恒温培养。     4.1 液体种 在培养过程中，从第2天开始启动摇床振荡培养；手工操作时，每天需手工摇动6～8次。如果是试管装，摇动后需斜放，7天左右即可终止培养（萌发菌比蜜环菌的培养时间要多2～3天），应尽快用于生产。成熟的培养液应是清澈透明、淡茶色或土黄色。如果浑浊、液面膜状或呈大量泡沫状即是杂菌污染，应废掉。     4.2 斜面种 培养时需平放，48小时左右可看出菌丝萌动并逐渐向周围辐射延伸。当10～15天菌丝贯穿斜面培养基（萌发菌培养时间需长一些）时即可用于生产。置于0～4℃的冰箱内，蜜环菌可保存40天，萌发菌可保存60天。     4.3 木屑种 接种后需竖立放置培养，防止种块振动，经15～20天培养，蜜环菌菌索或萌发菌菌丝贯穿到瓶底时，即可用于生产。置于0～4℃的冰箱内保存，6个月质量不变。经冰箱内久存的木屑菌种用于生产时，为防止接种时感染杂菌，可从试管底部破管取种接种。

相关阅读 ·食用菌菌种贮藏技术 ·兽医实验室采制畜禽血清的方法和技术要 ·食用菌菌种简易保藏法 ·润滑油质量的简单检验方法 ·全球首个试管汉堡将于本周在伦敦一家餐 ·试管汉堡本周伦敦上餐桌：每个花费236 ·实验室中使用的浊度计的读数高于在线监 ·鉴别环氧树脂的化学方法 ·专家介绍5种化学方法鉴别环氧树脂胶 ·内毒素检测恒温仪WN10产品优点介绍供用 ·上海五相内毒素检测恒温仪WN10优点介绍 ·冷冻离心机参数 ·英国将成为首个支持三人试管授精的国家 ·简述聚氨基甲酸酯塑料的鉴别方法 ·淀粉类胶黏剂的鉴别方法是什么 ·高中生发明“化学方法”提炼学霸学渣引 ·简述聚甲基丙烯酸甲酯塑料鉴别法 ·塑料鉴别(11):聚氨基甲酸酯 ·塑料鉴别(3)：聚甲基丙烯酸甲酯 ·简述聚苯乙烯塑料的简单鉴别法 ·我国育出优良乳肉兼用水牛 ·废旧塑料鉴别6:热解试验鉴别 ·几种快速鉴别塑料材料的方法 ·聚甲基丙烯酸甲酯塑料的简易鉴别方法介 ·聚氨基甲酸酯塑料的鉴别法介绍 ·实验过程中装置气密性的检查 ·胶黏剂类别鉴别方法之特征元素检定法 ·怎样使用格氏管对聚氨酯组分一(预聚物) ·常用的对甲苯二异氟酸酯凝固点的测定方 ·常用的几种胶粘剂怎样鉴别?