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目的 研究木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用及其机制。 方法 通过MTT法、克隆形成抑制实验观察木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用, 碘化丙啶(PI)单染色法检测细胞周期, AnnexinⅤ-PI双染法测定细胞凋亡, 蛋白质印迹法检测Bcl-2家族蛋白、Caspase蛋白、周期及自噬相关蛋白的表达情况。 结果 MTT法检测发现, 木犀草素作用于MGC803细胞 24、48和72 h后, IC50分别为127.37、76.12、16.84 μmol/L;木犀草素能抑制胃癌细胞MGC803的克隆形成。PI单染色法发现随着木犀草素浓度的增大, 发生G2期阻滞的细胞比例增加。蛋白质印迹法的检测结果表明, 随着木犀草素浓度的增加, CDK4、CDK6、CyclinE2表达减少, CyclinD1、CyclinD3和p-Wee1表达基本不变, CyclinA、CyclinB、Myt1、p-cdc2(Tyr15)表达增高。AnnexinⅤ-PI双染法发现随木犀草素浓度增加, 细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率均增加。蛋白质印迹法的检测结果表明, Mcl-1、Bcl-xL、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达随木犀草素浓度增加而减少, Bcl-2蛋白表达量变化不大, Bax蛋白表达量增加, 因而引起Bcl-2/Bax、Mcl-1/Bax和Bcl-xL/Bax的比例下降;同时可见到Caspase-3和PARP出现了切割的条带;P62表达下降, Beclin-1、 LC3Ⅱ表达增加。 结论 木犀草素使胃癌细胞MGC803发生G2期阻滞, 诱导细胞自噬的发生并抑制细胞的生长, 还通过线粒体途径诱导胃癌细胞MGC803凋亡。研究表 明细胞周期中Z!"6 检查点是细胞存活和死亡的主 要决定点)#D*木犀草素是一 种多靶点的抗肿瘤药物木 犀草素引起胃癌细胞 6ZKB"%的凋亡是通过线粒 体通路实现的#同时伴有细胞自噬性死亡第二军医大学学报!!2016年3月#第37卷
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