来源:中华病理技术网 在临床病理科和组织学实验室,切片是最重要的技术之一,切片的质量不好,就无法对标本进行观察。好的病理切片制备除了需要好的仪器、专业的水平,同时也离不开规范化的操作。不论是标本的接收、制片,还是归档、保存都是有严格的要求的,只有病理制片做好了,才能做到准确的病理诊断。 一、标本的接收、清点制度 1、巨检结束后病理医师应向技术组当面交付组织块,并点清块数,记录签收。有要求特殊处理的标本(如脱钙、糖原染色等)应当面向技术组说明,以便加以特殊处理。 2、组织包埋完成后必须进行清点蜡块数量,以防组织块在脱水、包埋过程中遗失。 3、切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点。
4、医师在诊断完成后交付档案室时必须当面清点,并作记录。 二、制片过程各步骤应注意的事项 1、组织处理 此过程包括固定、脱水、透明、浸蜡直至包埋,是制作优质切片的关键过程,一旦组织处理有欠缺,往往导致无法挽回的后果。
(1)制片过程按操作流程进行标本处理。 (2)有条件的单位应将大小标本分开固定脱水。 (3)取材后组织应补充固定,固定时间:大标本固定时间不得少于6小时;小标本不得少于3小时。固定液必须及时更换,固定后必须流水冲洗。 (4)固定、脱水温度不得高于37℃。 (5)包埋用石蜡必须过滤。 (6)试剂必须及时更换。
2、切片 切片是技能含量很高的步骤,同一蜡块,用同一台切片机,同一把刀,不同的操作者会切出不同质量的片子。 (1)切片刀必须锋利,切片厚度3~5微米。切片完整,无污染,无皱褶。 (2)组织片贴附应在除去标签位置后玻片的中间。 (3)胃镜、纤支镜、穿刺等小活检组织切片须作非连续性切片,数量不得少于8张。 3、染色封片注意事项 (1)烤片温度应在60~62℃左右,不得高于65℃,时间不能少于20分钟。 (2)试剂染料必须及时更换。 (3)切片封固前必须经酒精充分脱水,二甲苯透明,湿封。不得用温箱烤干或电吹风吹干后干燥封片。
(4)盖玻片使用前必须清洗(真空包装除外)。
(5)封片时不得有气泡,不得有树胶外溢。 4、其他 (1)标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚、整齐,且不易褪色,有条件者尽量采用打印。
(2)制片工作一般应在24~48小时内完成。 三、归档 1、所有送检单病例均必须进行登记,如用计算机管理的,必须有文字打印材料及资料备份(以光盘刻录为佳)。 2、在切片进入档案室时必须与医师当面清点,并作记录。 3、切片必须晾干或烘干后,才能归档。归档切片应按序排列。 4、蜡块必须在切面封上蜡后才能入柜。归档蜡块应按序排列,编号标签应朝上,以利查找。 5、各种档案柜外面应写明年份和编号,以利查找。 6、各种送检单应及时清点,归类(细胞学检查、冰冻切片、常规切片、会诊切片等),按年份和顺序装订成册入柜。
四、试剂的配制及更换制度 1、更换、配制试剂必须详细登记。
2、各种染料试剂应选用化学纯以上的级别。
3、配好的试剂应盛于磨口瓶内,避光试剂必须用棕色瓶,需冷藏试剂应放置于冰箱内备用。
4、瓶签上应标明试剂名称,浓度和配制时间。
5、各类试剂应进行定期更换,更换的时间应根据标本的多少进行量化。
6、废弃试剂建议由专业公司回收。目前应排入具有污水处理功能的下水道,不得直接排入雨水管中。
五、仪器的使用和保养 1、显微镜:放置于干燥、少灰的房间,勿暴露在日光中;电光源显微镜使用完毕后必须先将亮度打到最小,然后关闭电源;目镜上的灰,应该先用吸耳球吹净,再用擦镜纸由内向外擦拭;物镜应用擦镜纸擦拭,如镜头沾到树胶,需先用擦镜纸蘸上少许二甲苯擦拭,再用擦镜纸立即将二甲苯擦干。每次用完后需用罩子盖好。定期擦拭。
2、切片机:切片时用力均匀,每次用完后将机器清扫干净,然后用松节油擦拭,需要加油的地方加上润滑油。 3、自动脱水机(全封闭式):设定好程序,检查液体瓶有无插紧,浸蜡用石蜡必须过滤,每次用完后必须擦拭干净。 4、自动脱水机(提蓝式):设定好程序,检查加热部分的水位,检查试剂量是否足够,检查提蓝周围有无大头针外露,以防提蓝卡住。每次用完后必须擦拭干净。 5、磨刀机:保持磨石清洁,磨刀角度尽可能不发生改变;当磨石不平整时应及时修正。每次用完后必须擦拭干净。 6、温箱:定时检查水位。
7、冰冻切片机(恒温冷藏式):为保证压缩机正常工作,不应经常开关,以24小时恒温(-15℃~-20℃)为佳。夜间应设定自动除霜,并定期停机清洗,以保证冰冻切片机工作窗内清洁和压缩机正常制冷。 病理制片的规范化操作是每个病理工作者都需要牢记并切实做好的,每一次规范化的制片,长久下去自然会形成规范化的操作习惯,在今后的病理制片中,做出的切片更加严谨。 |
|