基因敲入小鼠技术原理及应用

基因敲入可以在目的基因位置引入特定的突变或外源基因。比如在目的基因上引入点突变(模拟人类遗传疾病模型) ；或将报告基因(如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等)通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点，从而可以通过报告基因来跟 踪目标基因的表达。也可以用报告基因取代小鼠本身的基因，使KO/KI同时发生。

 

应用

1、用于药物筛选相关研究；

2、用于信号通路的研究；

3、用于示踪的相关研究。

 

建系原则与流程

1、去除抗性基因 Neo：选择阳性TurboKnockout KI小鼠与野生型小鼠杂交，获得去除打靶载体中的Neo 基因的杂合子F1 代小鼠；

2、再挑选一对杂合子F1 代小鼠进行自交，通过 PCR 鉴定筛选得到去除Neo的F2代纯合子KI小鼠。