异嗜性抗体(Heterophil antibody,HA)是由已知的或未知的抗原物质刺激人体产生的一类具有足够滴度、能与多个物种的免疫球蛋白发生相对弱的结合的多重特异性的免疫球蛋白。这种抗体能和原抗原毫无关系的抗原起反应,这种与被检物质化学结构不同但活性相似的物质被称之为异嗜性抗体。异嗜性抗体可以与许多动物免疫球蛋白的片段结合,干扰实验,使测定结果与临床表现不符,导致错误结果出现。 HA的特性:HA属人体内源性抗体,具有相对稳定的化学结构,分子量约160kD,由于其分子量较大,不易通过肾小球滤过膜,因此HA在正常情况下通常存在于血液中而不会存在尿液中。HA是IgG亚类中较弱的抗体,可与许多动物免疫球蛋白的Fc和Fab表位结合, 而不与抗原结合位点结合。根据HA结合动物免疫球蛋白的部位,可以将其分为两类,一类是可以结合山羊、老鼠、大鼠、马及牛IgG的Fab部位,另一类是可以识别老鼠、马、牛和兔子的免疫球蛋白的Fc段。不同物种的Fab片段相似,所以HA在牛、羊、马、豚鼠、鼠和猴免疫球蛋白间存在的交叉反应,鼠抗体表现得特别强烈,而兔抗体与其它物种发生的交叉反应少见。 HA对检测项目的干扰:HA可以与许多动物免疫球蛋白Ig的Fc、Fab和F(ab)’2部位上的表位结合,模拟被测抗原的免疫活性,同时结合捕获抗体、标记抗体或标记抗原干扰实验。根据文献报道,发现HA对多种组分的测定存在干扰,见下表: HA对检测项目的影响
注:*为假性降低结果,余为假性增高 目前部分免疫试剂抗体来源于实验动物,因此,体内含HA的患者在进行免疫血清学试验时,HA可与试剂抗体结合而导致干扰。临床上被经常使用的夹心法和竞争法是主要的被干扰方法。双抗体夹心法中HA抗体影响免疫反应主要有两种方式:方式一、充当被测抗原的角色,同时结合捕获抗体和标记抗体,使结果出现假性增高。方式二、不形成桥梁,但分别与捕获抗体或者标记抗体结合,抑制被测抗原被试剂抗体识别,使结果出现假性降低,见图1。 图1、HA对双抗原夹心法的影响 在竞争法中,HA抗体影响免疫反应主要有两种方式:方式一、像夹心法一样,同时结合捕获抗体和标记抗原,使结果出现假性减低。方式二、同时取代被测抗原和标记抗原,只与捕获抗体结合,使结果出现假性增高,见图2。 图2、HA对竞争法的影响 HA干扰的去除方法: 1、稀释法:部分免疫检验试剂中添加了吸收异种抗体的成分,如果样本HA浓度含量不是很高,且它所造成的干扰不是很大时,稀释法是可以减少它的干扰,但不能够完全消除。 2、物理化学技术:可通过超速离心、样本加热、凝胶过滤或色谱、三氯乙酸沉淀、聚乙二醇(PEG)、巯基抗原和清洁剂或增加固定蛋白A和蛋白B来消除Ig片段降低干扰。 3、阻滞剂:利用非特异性和特异性阻断剂与HA结合从而达到减少干扰。特效阻滞剂主要有Ig抑制试剂和HA阻滞试剂,一般为鼠单克隆抗体。非特异阻滞剂,高浓度的非特异性Ig来阻止HA的干扰,如鼠单克隆抗体、牛和鼠非特异Ig,。 4、利用与HA低反应性的物质:可使用非Ig亲和蛋白、特异的兔F(ab’) 2片段等作为固相抗体或酶标抗体,减少与 HA结合的机会。 5、使用不同的测定方法:利用不同厂家生产的单克隆抗体存在的差异,减低体内HA的干扰。 尽管对异嗜性抗体的研究有了很大的进步,但因其对于很多的不同的结合位点都有亲和力,到目前为止还没有一种方法可以彻底消除HA的干扰。在日常工作中,需要对所使用试剂的特性,特别是干扰因素进行必要的了解和验证,以确定试剂在哪些情况下可能会出现干扰。同时在出现检验结果与临床不符时,应及时与临床联系和沟通,运用多种技术和方法并结合临床给出最终结果。 【参考文献】 [1]韦维.异嗜性抗体在免疫测定中干扰的研究进展[J].国际检验医学杂志 2010,31(10):1123-1125. [2]蒋利君,黎宇,戴盛明.异嗜性抗体对免疫测定干扰的研究进展[J].分子诊断与治疗杂志,2010(1):68-72. [3]黄飚,唐炜,金坚.免疫分析中的干扰物及其排除[J].标记免疫分析与临床,2004,11(3):177-179. [4]李金万,李钰,戴圣明.内源性干扰对免疫分析的影响[J].国际医学检验杂志,2010,3(10) :1167 -1169. [5]王惠欣.免疫测定中内源性蛋白质干扰的相关问题探讨[J].黑龙江医药,2010,12(6):970-972. |
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