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本次课程讲解的文章也是最近刚发表的，研究的是KDM1A这个分子在肝癌中的耐药机制。为啥选KDM1A，见课程视频。 Targeting KDM1A attenuates Wnt/β-catenin signaling pathway to eliminate sorafenib resistant stem-like cells in hepatocellular carcinoma Cancer Lett. IF:5.992 PMID: 28377178 耐药机制怎么做？ 筛选耐药细胞 耐药细胞的筛选有两种办法，一种是文章中用的逐步加药法，增加药物的浓度一步步筛选出耐药细胞。  还有一种就是高浓度冲刷，顾名思义就是直接上高浓度来筛选，能在高浓度药物下茁壮成长的就是耐药的宝宝。 两种方法筛选出的细胞有哪些不同？哪张方法更好？具体解答见视频。
筛选出耐药细胞，可以做一些细胞特征和表型研究，如克隆形成能力，表面标志物等等。  差异基因筛选 表型做好，接下去就是探究分子机制了。如何找差异基因了，这个大家都很熟悉，可以测序，也可以用芯片。 但差异基因好找，具体挑哪个差异基因却不容易。在这里呢，王刚老师也给了大家一些很实在的tips，比如说哪些功能基因会和肿瘤发生发张关系会比较密切。
功能研究 文章作者挑选了KDM1A，并用干扰和过表达验证了KDM1A在肝癌中耐药的作用，还用突变的方法具体验证了KDM1A蛋白具体的作用位点。 机制研究 这些都弄清楚之后，接下来就是研究KDM1A是具体通过哪些通路，影响了哪些分子以致于让肿瘤产生了耐药性。这又是实验中的一个难题。 文章的作者是怎么找到这个Wnt/β-catenin signaling pathway的呢？一两句话也说不清，大家自己看视频吧。
动物实验 细胞实验之后，还得做动物实验，这是做机制绕不开的。文章怎么能在原先的基础之上发得更高一点呢？这里可是有诀窍的。具体怎么做，见视频。
 文章思路总结起来就是这样的。 |
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