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【实用】白细胞计数“金标准”,检验人都应该掌握的技术

 基层检验网 2021-07-25

在科技飞速发展的今天,细胞计数往往依靠仪器法。仪器法具有快速检测、精密度高、重复性好的优点。但手工法无论到什么时候也不能忘掉,再先进的检测系统也有需要手工对照的时候,因为手工计数才是细胞计数的“金标准”。

计数前准备

1、白细胞稀释液:2%冰乙酸(冰乙酸2ml,蒸馏水98ml,10g/L亚甲蓝溶液3滴),混匀过滤后备用。稀释液的作用为消除红细胞的干扰,可不加亚甲蓝。

2、标本:用EDTA-K2抗凝全血或者用微量吸管采集末梢血。

3、计数工具:改良牛鲍计数板、盖玻片及显微镜

计数

1、稀释血液:在试管中加入0.38ml白细胞稀释液,用微量吸管准确吸取血样20μl,然后用棉花沿着吸管口方向擦净余血,同时检查血量是否足量。将吸管插入小试管中稀释液的底部,慢慢排出吸管内的血液,然后吸取上清液清洗吸管3次,立即混匀,制成白细胞悬液

2、冲池:静置一段时间等红细胞完全破坏后,再次混匀。吸取10μl,沿盖玻片与计数板之间的缝隙冲入计数池。以计数池充满为准,如过多、过少或有气泡,则需要重新冲池;

3、计数:冲池后静置2-3分钟,待白细胞完全下沉后,用显微镜低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数,对压线的白细胞采用“记上不记下,数左不数右”的原则。

计算

公式中:N    4个大方格中白细胞的总数 

÷4    为每个大方格(即0.1μl)内白细胞平均数    

×10   1个大方格容积为0.1μl,换算为1.0μl

×20   血液稀释倍数 

×106   由1μl换算成1L

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