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一鼓作气!荧光素酶报告基因解决方案

 stingray928 2017-11-25



01

双报告基因检测操作流程



02

单报告基因检测操作流程




GeneCopoeia 荧光素酶报告基因解决方案


1.荧光素酶载体构建

GLuc-ON™ 转录响应(TRE)克隆

Genecopoeia 提供 GLuc-ON™ 转录响应 (TRE) 克隆,用于在哺乳动物细胞系上进行快速灵敏的信号通路分析。这些克隆使用分泌型的 Gaussia Luciferase (GLuc) 作为报告基因,通过灵敏而显著的荧光反应,检测特定信号通路对环境刺激物或其他实验操作的生物应答。GLuc 基因是一个分泌型的蛋白,无需裂解细胞就能从培养基中获得实验样本进行快速方便的检测。

GLuc-ON™ 启动子报告克隆

GeneCopoeia 提供预制和定制的 GLuc-ON™ 启动子克隆,包括单报告基因载体系统和双报告基因载体系统。单报告基因载体系统以 Gluc 作为启动子的报告基因;双报告基因载体系统以 Gluc 作为启动子报告基因,以分泌型碱性磷酸酶(SEAP)作为信号标准化的内参,可在活细胞中对超过 20,000 种人和 18,000 种小鼠启动子进行实时活性分析。

miRNA 3' UTR 克隆

GeneCopoeia 提供两套 3'UTR 报告载体。在 pEZX-MT05 载体中,我们将 3' UTR 序列(来源于公开的基因序列数据库)插入到 Gaussia 荧光素酶报告基因下游,在哺乳动物细胞中由 SV40 启动子驱动转录生成 Gaussia 荧光素酶(Gluc)和 3' UTR 靶标序列的嵌合 mRNA,因此无需裂解细胞实时监测 Gluc 的表达,研究 mRNA-miRNA 的相互作用。在相同载体(pEZX-MT05)上带有分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告基因。CMV 启动子驱动转录的 SEAP 作为同质粒内的对照,这种双报告系统可以对多样本常规转染进行精确比较。

pEZX-MT06 是 Firefly/Renilla 双荧光素酶报告载体。3' UTR 序列在 Firefly(hLuc)荧光素酶报告基因下游,CMV 启动子驱动转录的 Renilla(hRLuc)作为同质粒内的对照。通过裂解细胞检测 hLuc 和 hRLuc 的表达。

2.转染试剂


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3. 慢病毒包装

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3.预制稳转株 (另有Cas9稳转株)

Luciferase + GFP 双标签肿瘤细胞稳转株

持续表达高水平荧光素酶及荧光蛋白。进行活体注射后,短时间即可检测荧光及荧光素报告基因,涵括 17 种常用的人源癌细胞系的稳转株现货。提供混合细胞株。

GFP 双标签肿瘤细胞稳转株

持续表达高水平荧光蛋白。涵括18种常用的人源癌细胞系的稳转株现货。提供混合细胞株。

产品详情请登录   http://www./product/premade-stable-cancer-cell-lines/


4.荧光素酶检测试剂盒

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