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特殊任务——Co-IP

 Jennymgozseons 2018-02-06

  我叫P·B. ,你们可以叫我蛋白B。我是来执行一项秘密任务的,任务的主线就是要抓一个叫P·C.的嫌疑犯。为了安全起见,总部给我配备了一个叫做His的定位器,以便第一时间找到我。


  为什么要我来执行这个任务?因为在之前的“酵母双杂行动”中,我表现得很出色,一眼就认出了嫌疑犯P·C.,并顺利地抓住了他。总部相信我也能顺利完成今天的这个任务。但这个任务能不能顺利完成,还要看接应我的特工P·A.,等我顺利逮到P·C.后,他会开着装有Anti-His探测器的Agarose牌轿车,找到我,并且把我和嫌疑犯一起带走的。最后总部会用Western Blot来给嫌疑犯验明正身,据说他身上也被黑暗组织带了一个GFP的定位器,十分危险。

 

  这次任务进行的非常顺利,我顺利地找到了P·C.,并逮捕了他。但是,接应我的特工P·A.为什么迟迟还不来呢?不对,来了一辆车,好像很熟悉,但为什么那辆车是探测GFP的?为什么是P·C.把我拽进了车里?我被捕了?


  焚蛋,原来总部安排的是Co-IP……


…华丽丽的分割线…


李莫愁博士:


  CoIP其实就是两个蛋白相互的IP实验,在已知蛋白B和C之间有相互作用的前提下,这种前提一般需要有一个酵母双杂实验或者Pulldown实验来作为支持。IP就是用来验证蛋白C和蛋白B之间相互作用的。如果在Agarose珠上的Protean A/G所结合的抗体,可以结合并拉下蛋白B,那用Western Blot即可检测出蛋白C的表达,反之亦然,通过这种相互间免疫共沉淀的实验,就可以明确地验证出,B与C之间的相互作用了。



  这一点和Pulldown是不同的,Pulldown是用来找可与已知蛋白相互作用的未知蛋白的,Co-IP则是用来检测已知有相互作用的两个蛋白间关系的。回复“IP”,就帮你掰扯掰扯究竟IP、Co-IP和Pulldown有啥区别。


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